海洋生物蛋白的酶解及酶解产物的抗氧化活性

应用4种蛋白酶：实验室保藏菌株Bacillus sp．SM98011和Bacillus sp．SM97010所产的中性蛋白酶SM98011和SM97010以及购自诺维信公司的碱性蛋白酶和风味蛋白酶分别酶解鲨鱼、牡蛎、扇贝和毛虾,分析了酶解液中蛋白质含量、氨基酸组成及肽的含量,并测定了酶解液的抗氧化能力。结果表明,酶解液中必需氨基酸含量丰富、均衡,营养价值较高;SM98011蛋白酶、SM97010蛋白酶和碱性蛋白酶的酶解液中肽的比例较高;而风味蛋白酶的酶解产物主要以游离的风味氨基酸为主,肽的含量较低。SM97010和SM98011蛋白酶的酶解液具有较高的抗氧化能力,预示在功能食品开发方面具有较好的前景。     

海洋生物抗肿瘤活性肽

海洋未被利用的有效面积约为陆地的５～１０倍 ,海洋生物中９９ %的物种尚未被利用 ,随着现代生物技术和化学技术的应用 ,反相高效液相色谱、ＦＡＢ -ＭＳ、２Ｄ -ＮＭＲ、手性色谱等技术的发展 ,近年来对海洋生物活性肽 ,特别是抗肿瘤活性肽的研究取得了很大进展，本文将予以综述 ,并展望开发利用的前景。１抗肿瘤活性肽的来源１．１海藻藻类是海洋生物活性物质的重要来源。在已发现的海洋生物活性物质中４０．８６ %来自藻类［１］ ,而其它海洋生物中发现的活性物质有可能最初也来源于藻类。如最初从海绵（Ｈａｌｉｃｈｏｎｄｒｉａｏｄａ…     

酶解鲐鱼蛋白制备低分子肽制品

介绍了以鲐鱼为原料 ,采用双酶水解技术 ,制备高质量的低分子肽粉末制品的最佳工艺。对鲐鱼水解液 4种脱苦脱腥的方法进行了比较 ,认为活性碳脱除法既可脱腥 ,又可脱苦、脱色 ,是鲐鱼水解液脱苦脱腥较好的方法。经正交试验得其最佳组合 :每升水解液中活性碳的用量为 1 0 g;时间为 40 min;温度为 40℃。制品为一种淡黄色粉末 ,含有较多的二肽、三肽等低分子肽 ,氨基酸种类齐全 ,富含人体所需矿物质元素的高质量的食品原料。     

酶解蓝圆鲹蛋白制备降血压肽的工艺研究

以蓝圆(Decapterus maruadsi)鱼肉蛋白为原料,选用6种蛋白酶在各自适宜的条件下酶解制备鲹降血压肽,通过检测酶解产物对血管紧张素转化酶(ACE)的体外抑制活性,筛选出木瓜蛋白酶为制备蓝圆降血压肽的最佳用酶。考察了不同水解度的酶解产物对ACE抑制效果,当水解度为13.7%时,产物对ACE的最高抑制活性可达67.4％。在此基础上,分别了考察酶解时间、初始酶用量、初始底物浓度、酶解温度和 pH 值对酶解工艺的影响,鲹得到制备蓝圆降血压肽的适宜酶解工艺为：初始酶用量鲹为7000 U/g,初始底物浓度为25 g/L,酶解温度为45℃, pH为7.0,酶解240 min。采用超滤技术对酶解产物活性组分进行分离富集,发现产物中高活性部分均可富集于10 kDa和5kDa渗透液中,且高活性组分分子量主要集中在5 kDa以下,该组分对ACE的活性抑制率为88.47%。     

南美白对虾副产物酶解工艺优化及其蛋白肽活性评价

为高质化利用南美白对虾加工副产物蛋白资源,本研究以南美白对虾加工副产物虾头虾壳为原料,蛋白水解度为考察指标,采用单因素和响应面试验优化酶解工艺。检测虾蛋白肽分子量的分布范围,评价其抗氧化能力及免疫调节作用。结果表明,碱性蛋白酶与虾头内源酶自溶酶解具有较好的协同作用,最佳酶解工艺参数值为：酶添加量4%、酶解时间6.5 h、酶解温度40℃、料液比1∶5。经蛋白层析仪检测,分子质量分布在75～1 355 Da的蛋白肽占比达到76.35%。虾蛋白肽的羟自由基清除率IC₅₀为4.64 mg/mL、DPPH自由基清除率IC₅₀为3.08 mg/mL,提示其具有一定的抗氧化能力。虾蛋白肽中剂量组(10 mg/kg)能显著促进淋巴细胞增殖,并提高免疫低下模型小鼠的免疫器官指数和吞噬指数,表明虾蛋白肽具有显著的免疫调节作用。     

金乌贼(Sepia esculenta)蛋白抗氧化肽的酶解制备及活性评价

采用木瓜蛋白酶水解金乌贼(Sepia esculenta)蛋白, 利用超滤、凝胶色谱和反相高效液相色谱从金乌贼蛋白水解物中制备抗氧化肽, 采用氨基酸序列分析仪和质谱(ESI-MS)确定抗氧化肽结构, 采用自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验对多肽抗氧化能力进行评价。结果表明, 金乌贼蛋白经木瓜蛋白酶水解和分离纯化得到1个抗氧化肽(AEH-P3), 经氨基酸序列分析和质谱(ESI-MS)确定其结构为Ala-Pro-Pro-Glu-Asn-Gly-Met-Ala-Gln-Met (APPENGMAQM), 分子量为1045.22Da。体外抗氧化实验结果表明: AEH-P3对DPPH自由基(EC50 4.01mg/mL)、羟自由基(EC50 4.66mg/mL)、ABTS自由基(EC50 3.44mg/mL)和超氧阴离子自由基(EC50 6.03mg/mL)具有良好的清除作用, Ala-Pro-Pro-Glu-Asn-Gly-Met-Ala-Gln-Met (APPENGMAQM)亦显示出了良好的脂质过氧化抑制作用, 可以用于抗氧化相关的功能食品、药物或者食品添加剂。     

酶解糙刺参内脏团蛋白制备抗氧化肽的工艺研究

为了能够有效利用糙刺参内脏蛋白,以水解度为主要指标,对酶解蛋白酶进行了筛选,并系统研究了酶解温度、p H、加酶量和水解时间等单因素对水解度的影响。在此基础上,利用响应面中心组合设计实验,对酶解工艺进行了优化,得到以温度、p H、加酶量及水解时间为因子的二次方程,通过方差分析和验证性实验得出,此二次方程能较好反应海参内脏团蛋白水解度的变化规律,得到最佳水解条件为:温度52.66℃,p H 6.71,加酶量2.5%(质量分数),酶解时间10 h,预测最高水解度为49.58%。最佳酶解条件下所得多肽74%以上分子质量小于500 Da。利用DPPH法测定最佳条件酶解所得多肽的抗氧化活性,3 g/L的抗氧化率达到了24.8%,利用ABTS法测定最佳条件酶解所得多肽的抗氧化活性,3 g/L的抗氧化率达到了0.255μmol/g。为海参内脏蛋白的利用提供了参考。     

海洋生物抗炎活性物质研究进展

炎症是一种常见生理反应,在疾病的发生发展过程中具有非常重要的作用。炎症反应既具有阻止致炎因子蔓延全身和清除致炎因子、修复损伤组织和器官等积极作用,也有引发细胞和组织变性和坏死,甚至诱发某些肿瘤的潜在危害。目前临床常用的抗炎药分为甾体类和非甾体类抗炎药,它们常伴有胃肠损伤等各种副作用。海洋独特的自然环境孕育了独特而多样的抗炎活性物质,如萜类、生物碱、多糖类、多肽类、脂肪酸类和聚酮类化合物等。这些独特的抗炎活性物质因具有较好的抗炎效果和较少的副作用,从而备受关注。本文综述了近年来具有抗炎活性的海洋生物活性物质及其衍生物的研究进展。     

海洋生物功能肽构效关系研究进展

海洋生物功能肽是从海洋生物中获得的一类具有多种生理活性、在体内担负着重要调节功能的肽类化合物。目前已经从海洋生物中分离出两千多种功能肽,这些功能肽具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化、降血压等多种生理活性,且来源广泛、毒性小、特异性强。海洋生物功能肽现已成为医药、食品、化妆品等领域研究的热点,国内外有许多公司和机构致力于海洋生物功能肽类新型药物的研究,大批海洋生物功能肽已经进入医药市场或临床研究阶段。功能肽的结构是其活性的基础,研究它们的构效关系有利于对海洋生物功能肽进行结构改造和修饰,对推进海洋生物资源的开发具有重要意义。本文对近年来国内外在海洋生物功能肽构效关系研究中所取得的主要进展进行综述,为海洋活性物质的开发和应用提供参考。     

海洋生物中抗肿瘤活性成分的研究进展

从２０世纪６０年代开始 ,“向海洋要药”成为沿海国家药学研究的新方向 ,各国学者用现代科学方法从海洋生物中分离和鉴定出了许多结构新颖、作用独特的天然物质 ,其中有５０００多种具抗病毒、抗肿瘤、抗凝血等药理作用 ,从而成为研制开发新药的基础。而从海洋活性物质中筛选攻克肿瘤的特效药 ,无疑是国内外科学家研究的热点。美国国立肿瘤研究所每年筛选３００００个新的抗肿瘤化合物 ,约５ %来自海洋生物。业已证实 ,约１０ %的海洋动物提取物有抗Ｐ３８８白血病及ＫＢ细胞活性 ,３．５ %的海洋植物提取物有抗瘤或细胞毒活性。本文对近几…     

Screening of protease-producing marine yeasts for production of the bioactive peptides

Over 400 yeast strains from seawater and sediments were obtained, but only five strains named HN2 -3, N13d, N13C, Mb5 and HN3 - 2 among them could form clear zones around their colonies on the double plates with 2.0% casein. Peptides in the hydrolysate produced by the proteases from strains HN2 -3 and N13d had higher angiotensin I-converting-enzyme （ACE）-inhibitory activity. The two marine yeast strains were identified to be Aureobasidium pullulans according to the results of routine yeast identification and molecular methods. After purification of the proteases from the two marine yeast strains, it was found that the optimal pH for them was both 9.0, both of them were serine alkaline protease. However, the optimal temperature for the protease from the strain HN2 -3 was 52℃ while that from strain N13d was 48℃. ACE-inhibitory activity of the peptides in the hydrolysate of shrimp protein produced by the purified protease from the strain HN2 -3 was the highest while antioxidant activity in the hydrolysate of spirulina protein produced by the purified protease from the strain N13d was the highest.     

海洋真菌及其活性物质的研究概况

海洋微生物种类繁多，是筛选新药的丰富资源宝库。陆地真菌是仅次于放线菌的多产抗生素的微生物类群，而海洋真菌正在成为海洋药源微生物研究的新热点。海洋真菌产生的生物活性物质已经引起研究者的关注，并将成为海洋药物的重要来源。本文结合国内外文献报道，阐述了海洋真菌及其活性物质的研究情况。     

海洋微生物活性物质的研究进展

海洋微生物由于其特殊的生存环境,往往能产生结构新颖、功能多样的活性物质,海洋微生物作为活性物质的新来源,正日益受到人们的关注。综述了近几年海洋微生物产生的抗肿瘤、抗心血管病、免疫调节剂、抗生素等生物活性物质的开发利用现状及相关的研究技术和方法,展示出海洋微生物活性物质巨大的开发利用前景。     

海洋生物活性肽的功能、制备技术与作用机制研究进展

许多海洋生物活性肽具有降血压、抗炎、抗氧化、抗血栓等多种生物活性,在功能食品及医药领域有着广阔的应用前景。本文主要综述了海洋生物活性肽的制备方法、功能活性及其作用机制,为进一步开发和利用海洋生物活性肽提供参考。     

牡蛎活性肽的分离及其免疫抑制作用的实验研究

采用动物蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,获得牡蛎活性肽,将分子质量小于3 kD的活性肽分别采用 MTT 法、体外抑制小鼠脾淋巴细胞增殖试验和小鼠体外脾混合淋巴细胞增殖活性实验,并通过ELISA法检测牡蛎活性肽作用后小鼠脾脏淋巴细胞上清中分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ的变化。试验结果表明,牡蛎活性肽对小鼠脾淋巴细胞增殖具有一定的免疫抑制作用,经牡蛎活性肽作用后的小鼠脾脏淋巴细胞上清中细胞因子IL-2、IFN-γ分泌减少。     

水生动物来源的抗肿瘤活性肽作用机制研究进展

<正>生物活性肽能调节人体多种生理功能,有提高免疫、抗肿瘤、抗病毒和降血压等作用,而且肽类物质的结构类型十分丰富,有巨大的药物活性筛选潜力,是当前国际药品与保健品界最热门的研究对象和极具发展前景的功能因子[1]。在中国,生物活性肽开发利用的研究起步较晚,易杨华等[2]从棕色扁海绵(Phakellia fusca)中获得一个具有较好抗肿瘤活性的新型类环七肽的phakellistatin(Pro-Gly-Phe-ProTrp-Leu-Thr),这也是首次从产于中国海域的     

利用海洋微藻制备生物柴油的研究进展

世界能源危机和环境问题的日益加剧,使越来越多的人开始关注到清洁的可再生能源。生物柴油是一种新兴的可再生生物质能,清洁环保,易生物降解,燃烧后排放的氮氧化物和CO2少,且可直接用于现有的柴油发动机,因此成为了一种良好的化石燃料替代物[1]。     

海洋生态系统修复研究进展

海洋生态系统是最具价值的人类资源之一,为沿海更多人们所依赖,尤其是具有极高生物多样性和生产力、为海洋生物提供产卵和养育的场所、保护海岸以防受到海浪和飓风侵蚀的红树林生态系统、珊瑚礁生态系统和海草床生态系统.但由于近年来经济的发展和人类活动的影响,这些生态系统都遭受到不同程度的退化,因此海洋生态系统的修复非常必要.回顾了红树林、珊瑚礁和海草床这3种典型且脆弱海洋生态系统的特点,生态修复的研究内容、方法及存在的问题,并在此基础上提出三者可通用的且更为系统的海洋生态系统修复模式和措施,未来能将三者的修复进行综合考虑,以为其他类似的海洋生态系统的修复提供借鉴.     

氟苯尼考对海洋沉积物中胞外酶活性的影响

通过室内模拟实验研究了氟苯尼考对海洋沉积物中纤维素酶、过氧化氢酶和多酚氧化酶活性的影响。结果表明,在整个培养期间,低浓度(10mg/kg)的氟苯尼考对纤维素酶和过氧化氢酶活性没有明显影响,而较高浓度(100mg/kg和500mg/kg)则对过氧化氢酶活性具有明显的抑制作用,且随着氟苯尼考浓度的增加抑制作用加大。氟苯尼考在初始阶段对沉积物中多酚氧化酶的活性有显著的抑制作用;随着培养时间的延长,低浓度(10mg/kg)的氟苯尼考对酶活性的影响变得不明显,而较高浓度(100mg/kg和500mg/kg)的氟苯尼考在整个培养期间对多酚氧化酶的活性都具有显著的抑制作用。