日本黄姑鱼人工繁殖及苗种培育技术的初步研究

日本黄姑鱼Ｎｉｂｅａ　ｊａｐｏｎｉｃａ　（Ｔｅｍｍｉｃｋ　ｅｔ　Ｓｃｈｌｅｇｅｌ），俗称白　，为石首鱼科黄姑鱼属的近海中下层鱼类，分布于我国的东海、南海及日本南部沿海［１］。日本黄姑鱼生长迅速、病害少、易于养殖，当年即可达商品鱼规格，经济效益显著，成为海水鱼网箱养殖诸多品种之佼佼者，倍受养殖业者欢迎。但其海区野生苗种来源有限，且规格不一，品种不纯，阻碍了大规模生产的发展。因此，开展日本黄姑鱼人工育苗，已成为水产科研部门与养殖业者共同关注与亟待解决的问题。有关日本黄姑鱼的人工孵化工作，日本在１９８…     

黄姑鱼工厂化育苗技术研究

黄姑鱼 Nibea albiflora (Richardson),俗称黄姑子、铜锣鱼,属石首鱼科,黄姑鱼属,是太平洋西北部沿海的特有种,在我国的黄海和渤海,日本的土佐湾和有明海都有其产卵场。 有关黄姑鱼的研究,雷霁霖等(1981)于1959年首次记录了其胚胎及仔稚鱼的形态观察;田北彻(1974)研究过其早期生活史;谷口顺彦(1979)进行过箕作氏黄姑鱼(N.milsilaii)的孵化与仔稚鱼饲育的研究。但是,黄姑鱼的工厂化育苗我国尚无先例。     

基于线粒体16S rDNA和COΙ基因探讨中国近海黄姑鱼类的分子系统进化关系

为探讨中国近海黄姑鱼类的系统进化关系,通过PCR扩增了黄姑鱼(Nibea albifora)、浅色黄姑鱼(N.coibor)、日本黄姑鱼(N.japonica)和状黄姑鱼(N.miichthioides)等4种黄姑鱼类的16S rDNA和COΙ基因片段并进行了序列测定,计算其种间及种内遗传距离并结合来自GenBank的13种石首鱼科鱼类的相应基因片段序列构建分子系统树。结果表明:(1)利用16S rDNA片段可以对4种黄姑鱼类进行分子鉴定;但是基于COΙ基因片段计算的日本黄姑鱼和状黄姑鱼的种间遗传距离为0.002—0.005,尚未达到种间分化水平,应用该基因片段进行这两种鱼的分子鉴定值得商榷;(2)分子系统树显示日本黄姑鱼和状黄姑鱼与黄姑鱼和浅色黄姑鱼处于不同的系统发育阶元,日本黄姑鱼和状黄姑鱼与白姑鱼属鱼类聚为同一类群,支持形态学上将日本黄姑鱼和状黄姑鱼划归为白姑鱼属的分类学观点。     

基于线粒体DNA控制区的黄姑鱼养殖群体与野生群体比较研究

黄姑鱼(Nibea albiflora)是我国重要的经济鱼类.由于受到过度捕捞和环境污染等因素的影响,野生黄姑鱼资源量急剧下降.为了解黄姑鱼野生群体与养殖群体的种质资源现状,本研究扩增了2个野生群体和2个养殖群体的线粒体DNA控制区高变区部分序列,同时结合NCBI数据库中部分已发表序列进行分析.研究显示:173个黄姑鱼...     

(鱼免)状黄姑鱼的肌肉成分分析

测定了以野生苗和人工苗养殖的两组克状黄姑鱼Nibeamiichthioidses肌肉的生化成分、能值、氨基酸组分及8种金属元素的含量。结果表明,状黄姑鱼肌肉中蛋白质含量较高（＞19％）而脂类则较低（＜2．8％）,富含各种氨基酸和人体所必须的多种金属元素。结果还表明,野生苗和人工苗养成的克状黄姑鱼,在肌肉生化成分、氨基酸及金属元素含量等方面无明显差异。     

养殖浅色黄姑鱼体表溃烂症病原菌的分离与鉴定

浅色黄姑鱼的高密度养殖一直受到病害的困扰,导致成鱼养殖成活率低,直接影响了浅色黄姑鱼养殖业的发展.以汕头南澳岛患皮肤溃烂症的养殖浅色黄姑鱼为材料,从其溃烂头部组织中分离得到优势菌KLg,人工感染实验证实菌株KLg为浅色黄姑鱼的致病菌.药敏试验表明菌株KLg对头孢哌酮、红霉素、头孢曲松、先锋霉素V、复达欣、头孢呋辛和氧哌嗪青霉素等7种抗生素敏感,革兰氏染色、生理生化测定等手段初步确定菌株KLg为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi),这一结果通过16S rDNA基因序列及进化树分析得到进一步确认.哈维氏弧菌是海水养殖鱼类的常见致病菌,但在浅色黄姑鱼养殖中尚属首次报道.实验结果可为我国沿海地区浅色黄姑鱼养殖中弧菌病害的防治提供重要参考.     

鮸状黄姑鱼的肌肉成分分析

测定了以一苗和人工苗养殖的两组Ｍian状黄姑鱼Ｎｉｂｅａ ｍｉｉｃｈｔｈｉｏｉｄｅ s肌肉的生化成分、能值、氨基酸组分及８种金属元素的含量。结果表明,Ｍｉａｎ状黄姑 鱼蛋白质含量较高（〉１９％）而脂类则较低（〈２．８％）,富含各种氨基酸和人体所必须的多种金属元素。结果紧生苗和人工苗养成的Ｍｉａｎ状黄姑鱼,在肌肉生化成分、氨基酸及金属含量等方面无明显差异。     

Mian状黄姑鱼的早期发育研究

本文对Ｍｉａｎ状黄姑鱼的胚胎和仔、稚鱼各发育阶段的形态特征进行了描述。Ｍｉａｎ状黄姑鱼的爱精卵的为圆球形浮性卵,无色透明。在水温２０￣２３℃,盐度２６￣３０的条件下,经２４ｈ３５ｍｉｎ陆续孵出仔鱼。胚胎发育分为２６期。初孵仔鱼至孵化后４日龄为仔鱼前期;孵化后５￣２２日龄为仔鱼后期;孵化后２３￣３２日龄为雅鱼期;孵化后３３日龄进入幼鱼早期。仔、稚鱼培育水温１８￣２８℃,盐度２０￣３０。仔鱼２日龄稍开     

四种重金属对鮸状黄姑鱼胚胎和仔鱼的毒性

本文研究了汞、铜、锌和铬四种重金属对鮸状黄姑鱼（Ｎｉｂｅａ ｍｉ－ ｉｃｈｔｈｉｏｉｄｅｓ）胚胎发育和仔鱼存活的影响。结果表明;在试验浓度范围内,胚胎发育受 阻,受精卵孵化率显著低于对照组,初孵仔鱼出现不同程度的畸形,这些重金属对鮸 状黄姑鱼仔鱼的毒性强弱依次为Ｈｇ~２＋＞Ｃｕ~２＋＞Ｚｎ２＋＞Ｃｒ~６＋。根据实验数据求得四种 重金属对鮸状黄姑鱼仔鱼的２４、４８、７２和９６ｈ ＬＣ_５０值及安全浓度。     

鮸状黄姑鱼染色体核型的研究

采用体内注射PHA和染色体常规制片方法对状黄姑鱼 (NibeamiichtheoidesChu,Lo &Wu)的核型进行了研究 ,结果表明状黄姑鱼二倍体染色体数目为2n=48,核型为2n=48t ,臂数NF=48。本文还就鱼类的染色体核型演化趋势进行了探讨。     

四种重金属对Mian状黄姑鱼胚胎和仔鱼的毒性

本文研究了汞,铜,锌和铬四种重金属对Ｍｉａｎ状黄姑鱼胚胎发育和仔鱼存活的影响。结果表明;在试验浓度范围内,胚胎发育受阻,肥放孵化率显著低于对照组,初孵仔鱼出现不同程度的畸形,这些重金属对Ｍｉａｎ状黄姑鱼仔鱼的毒性强弱依次为Ｈｇ＾２＋〉Ｃｕ＾２＋〉Ｚｎ＾２＋〉Ｃｒ＾６＋。     

Mian状黄姑鱼胚胎和仔鱼发育的实验生态

本实验研究了温度、盐度、ＰＨ对Ｍｉａｎ状黄姑鱼胚胎发育和前期仔鱼存活的影响。结果表明,Ｍｉａｎ状黄姑鱼受精卵孵化的温度范围为１５￣３０℃,最适孵化温度为２５￣３０℃;孵化盐度范围来１５￣４５,最适孵化盐度范围为１５￣２５;ＰＨ值在５．００￣８．９９范围内,受精卵孵化率没有显著的差异。Ｍｉａｎ状黄姑鱼前期仔鱼存活的适合温度为１５￣３０℃,最适温度为２５℃;适合工为１５￣３５;适合ＰＨ值为５．９９￣１     

(鱼免)状黄姑鱼早期发育特征及对温盐度的适应性

1996年3~6月采用人工注射LRH-A和HCG诱导状黄姑鱼自然产卵受精,观察6批次胚胎发育的结构特征和1~16日龄仔鱼形态变化及温度、盐度对状黄姑鱼早期发育和存活的影响,为状黄姑鱼大规模人工繁殖和苗种培育提供科学依据。根据其外部形态和胚胎行为的出现将状黄姑鱼胚胎发育划分为17期,3日龄开口;状黄姑鱼受精卵孵化的温度范围为16.3~30℃,最适孵化温度为22~24℃;孵化盐度范围为13.7~53,最适孵化盐度范围为26.9~40.7,其中盐度为7.2时受精卵无法孵化,盐度在40.7以上的受精卵全部为浮性,盐度为26.9以下全部呈沉性;状黄姑鱼仔鱼存活的适合盐度为20.2~33.4,随着仔鱼的生长,对耐盐的适应性也逐渐增强。     

黄姑鱼雌核发育的人工诱导及鉴定

采用紫外线（UV）灭活的同源精子通过冷休克抑制第二极体排放诱导黄姑鱼的雌核发育。黄姑鱼精子最适的灭活剂量为420 mJ/cm2,紫外照射剂量与黄姑鱼精子和卵子授精后的受精率及孵化率之间表现出明显的Hertwig效应。多次试验筛选的黄姑鱼雌核发育的最适条件为授精后2min在3℃处理8min。雌核发育仔鱼经形态学和流式细胞仪鉴定为二倍体。进一步利用10对微卫星分析了遗传物质在亲本和子代中的传递情况,结果表明雌核发育后代的等位基因完全来自于母本,没有父本基因参与;雌核发育后代在5个位点微卫星位点具有较高的重组率,使其与母本保持了高度同质性。     

黄姑鱼(Nibea albiflora)雌核发育的人工诱导及鉴定

采用紫外线(UV)灭活的同源精子通过冷休克抑制第二极体排放诱导黄姑鱼(Nibea albiflora)的雌核发育。结果表明,黄姑鱼精子最适的灭活剂量为420mJ/cm2,紫外照射剂量与黄姑鱼精子和卵子授精后的受精率及孵化率之间表现出明显的Hertwig效应。多次试验筛选的黄姑鱼雌核发育的最适条件为授精后2min于3℃处理8min。雌核发育仔鱼经形态学和流式细胞仪鉴定为二倍体。进一步利用10对微卫星分析了遗传物质在亲本和子代中的传递情况,结果表明雌核发育后代的等位基因完全来自于母本,没有父本基因参与;雌核发育后代在5个微卫星位点具有较高的重组率,使其与母本保持了高度同质性。     

Cr6+对日本黄姑鱼(Nibea japonica)外周血细胞及抗氧化酶(SOD、CAT)活性的影响

采用半静水生物测试法,开展了Cr6+对日本黄姑鱼(Nibea japonica)的急性暴露试验,研究了暴露6、12、24、72、96h后,Cr6+对日本黄姑鱼外周血细胞微核率、核异常率及肝胰腺超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明:不同浓度Cr6+胁迫下,红细胞微核率及核异常率均显著高于对照组(P<0.05);相同浓度Cr6+胁迫下,核异常率普遍高于微核率;对照组CAT和SOD活性无明显变化(P>0.05),不同浓度Cr6+处理组SOD和CAT活性均变化显著(P<0.05),在96h内呈现出先升高、后降低、再升高的变化趋势。     

鮸状黄姑鱼胚胎和仔鱼发育的实验生态

本实验研究了温度、盐度、 ｐＨ对鮸状黄姑鱼胚胎发育和前期仔鱼存活的影响。结果表明,鮸状黄姑鱼受精卵孵化的温度范围为１５～３０℃,最适孵化温度为２５～３０℃;孵化盐度范围为１５～４５,最适孵化公度范围为１５～２５;ｐＨ值在５．００～８．９９范围内,受精卵孵化率没有显著的差异。鮸状黄姑鱼前期仔鱼存活的适合温度为１５～３０℃,最适温度为２５℃;适合盐度为１５～３５;适合ｐＨ值为５．９９～１０．０１。     

白消安及其与高温联合处理对黄姑鱼(Nibea albiflora)性腺发育的影响

黄姑鱼（Nibea albiflora）的性成熟周期短,养殖技术成熟,是合适的生殖细胞移植受体。不育受体的制备在鱼类生殖细胞移植中非常关键。为了优化不育黄姑鱼的制备方法,采用白消安和白消安-高温（30℃）对黄姑鱼进行处理,设置5个组：对照组（Con组）、白消安10 mg/kg组（Bu10组）、白消安40 mg/kg组（Bu40组）、白消安10 mg/kg高温组（Bu10H组）、白消安40 mg/kg高温组（Bu40H组）,白消安以不同剂量进行2次的腹腔注射,间隔两周。采用组织学、qPCR以及原位杂交等方法分析白消安及其与高温联合处理对黄姑鱼性腺及其生殖细胞和体细胞发育的影响。研究结果表明白消安处理对黄姑鱼生殖细胞的影响具有明显的性别差异：雄鱼在处理28 d后其性腺重和GSI较对照组显著下降,进一步组织学观察发现雄鱼精巢在处理14 d时已经出现空腔,qPCR分析发现雄鱼vasa基因表达在处理期间显著降低,且在处理第48 d仍处于下调状态。然而,白消安及其与高温联合处理并未对雌鱼生殖细胞产生明显的影响。研究还发现高温处理组出现较高的死亡率,但雄鱼生殖细胞的消除效果并未显著增强。因此,白消安处理能够消除黄姑鱼雄鱼性腺内的生殖细胞,以40 mg/kg白消安2次（间隔两周）注射后消除效果最好,能够作为生殖细胞移植受体鱼。     

黄姑鱼胚胎发育及其与温度和盐度的关系

为研究温度和盐度对黄姑鱼(Nibea albiflora)胚胎发育的影响,作者观察了黄姑鱼受精卵的形态和胚胎发育过程。实验结果表明,温度18~28℃范围内,温度对孵化时间和初孵仔鱼有显著影响,对孵化率影响不大,24~28℃是黄姑鱼胚胎发育的适宜温度范围;盐度低于24时受精卵下沉,26~28内悬浮于水体中,盐度高于34时受精卵浮于水面;黄姑鱼胚胎发育的最适盐度范围26~32,盐度超过或低于其适宜范围时,孵化率明显下降或者幼虫畸形率明显增大。另外,根据其Q10值推算的胚胎发育的适宜水温与实验结果相似。     

印尼阿拉弗拉海浅色黄姑鱼形态性状与体重之间的关系分析

随机选取1176尾浅色黄姑鱼其中有600尾雌性和576尾雄性研究其形态性状对其体重的影响,测定性状包括其体长(X1)、躯干长(X2)、尾长(X3)、头长(X4)、体高(X5)、最大体周(X6)、体重(Y)。利用相关分析方法计算各性状间的相关系数,并通过通径分析方法计算其以体重为依变量各形态性状为自变量的通经系数和决定系数。结果表明:雌雄性浅色黄姑鱼各形态性状与体重之间相关性均达到极显著水平(P<0.01);雌性浅色黄姑鱼中各形态性状中体长、最大体周、体高、尾长、躯干长的通径系数达到极显著水平(P<0.01),而雄性浅色黄姑鱼各形态性状中体长、最大体周、头长、尾长、躯干长的通径系数达到极显著水平(P<0.01);决定系数分析结果表明雌性浅色黄姑鱼的体长和最大体周对其体重的决定程度最大;而雄性浅色黄姑鱼最大体周和躯干长对其体重的决定程度最大。经多元回归分析去除偏回归系数不显著的性状,建立多元回归方程。