甲壳动物血清中凝集素对微生物细胞的凝集性能

用12种甲壳动物血清凝集素提取液，对10种微生物细胞进行凝集试验，发现每种甲壳动物血清至少能凝集3种微生物细胞，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞对凝集素反应最为敏感。7种甲壳动物血清凝集素对酿酒酵母细胞的凝集可被2种以上的糖所抑制，12种甲壳动物血清凝集素的温度和pH适应范围表现不一，但它们的凝集活性都被EDTA所抑制。     

毛蚶血清凝集素的凝集活性

以毛蚶为实验材料,对其血清中的凝集素进行研究.毛蚶血清凝集素对人的A,B,O血型红细胞、鸡和小鼠的红细胞均有凝集作用,凝集效价分别为256,256,8,16,64,同时它还能对白色念珠菌、啤酒酵母、溶藻胶弧菌等微生物具有凝集作用.毛蚶血清凝集素具有一定的pH值稳定性和热稳定性.在选用的12种单糖和寡糖中,L-鼠李糖、L-树胶醛糖、麦芽糖、D-半乳糖、蔗糖对毛蚶血清的凝集活性有明显的抑制作用.用弧菌对毛蚶进行免疫刺激时,其血清对鸡红细胞的凝集效价明显增加.     

双壳贝类血清中凝集素凝集性能初步研究——对脊椎动物血细胞的凝集作用

在多种贝类血清中发现有可凝集脊椎动物血细胞的因子——凝集素。栉孔扇贝（Ｃｈｌａｍｙｓｆａｒｅｒｉ）血清中的凝集素可凝集鸡、鹌鹑、小鼠等多种动物血细胞,但对鳝鱼血细胞不发生作用。该凝集素具有较强的热稳定性,１００℃处理４５ｍｉｎ仍具活性;并具有广泛的ｐＨ范围,可在ｐＨ３～１１进行凝集作用。但其活性可被ＥＤＴＡ强烈抑制,Ｄ－甘露糖和Ｌ－鼠李糖对其活性有明显抑制作用,Ｄ－木糖和蕈糖也有轻微抑制作用。在栉孔扇贝血细胞的细胞膜上未发现有凝集鸡血细胞的活性物质。另外,用大肠杆菌和副溶血弧菌刺激栉孔扇贝后,血清的凝集作用不变。     

两种微藻凝集素对几种不同类型细胞的凝集作用

经离子交换和分子筛层析从紫球藻（Porphyridium cruentum）和海水小球藻（Chlorella sp．）中分离纯化得到2种凝集素,研究它们对几种不同类型细胞即动物和人血红细胞、海洋和淡水微藻、细菌和真菌的凝集活性。研究结果表明,2种微藻凝集素对它们当中一些类型的细胞或种类具有不同程度的凝集活性,其中对水生聚胞藻（Synechocystis aquetilis）的凝集活性最强,最低质量浓度只需0．0313g／L。     

脊条褶虾蛄血清及肌肉提取液凝集活性的比较

利用血凝试验及糖抑制试验测定脊条褶虾蛄的血清及肌肉提取液的凝血活性及糖抑制专一性，同时进行热稳定性、pH及Ca^2 影响试验。结果显示：其血清能凝集12种红细胞，且其凝集效价高于肌肉提取液（兔、蛇、鲫鱼除外）。血清对鹌鹑红细胞的凝集可被D－果糖、D－半乳糖和蔗糖所抑制，最小抑制浓度均为200mmol/dm^3，其凝集活性均依赖于Ca^2 ，在pH值为5.0-9.0范围内较稳定，经40℃保温10min后活性完全消失；肌肉提取液不被7种糖抑制，在pH值为4.0-10.0、温度为40－90℃范围内均具活性，说明有很强的耐热性，其凝集性不依赖于Ca^2 。以上结果表明：脊条褶虾蛄血清与肌肉提取液均含有凝集素，且凝集素的种类不同。     

经酶修饰和未经酶修饰的鹌鹑红细胞对甲壳动物血清凝集素凝集活性的差异研究

为寻找凝集素作为分子探针提供基础资料,用12种甲壳动物血清抽提液对天然的或经酶修饰的鹌鹑红细胞进行凝集试验。实验结果表明,经蜗牛酶修饰后的鹌鹑红细胞的凝集作用发生了变化,与未经酶处理的鹌鹑红细胞相比,凝集活性提高的有日本沼虾（Macrobrachium nipponense）等7种,凝集活性下降的有罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergi）等2种。凝集素对动物红细胞的凝集可看作是与这些细胞表面的多糖或糖蛋白——即受体的识别性鲒合,这表明鹌鹑红细胞表面具有12种凝集素的受体,且大多数受体都受到酶修饰的影响,从而在凝集活性上表现出差异。     

外源凝集素──水产动物御敌的有力兵器

外源凝集素是非免疫起源的热敏蛋白质或糖蛋白，由于其多价构型及对持定细胞多糖具结合亲和力，它们选择凝集某些细胞（包括脊椎动物血球及一些病原微生物）和沉淀某些复杂碳水化合物；其凝集活动常被单糖所抑制，有的却需某些二糖、三糖或多糖。外源凝集素分离自广泛的低等和较高等的生物。一些地区水产养殖业受挫，因素较多，但对发病机理认识之缺乏和调动养殖对象本身防病积极性之不足，是其重要原因。外源凝集素可在诸如凝集外来细胞，调理作用等的防御活动中扮演识别因子，协助一些生理活性物发挥作用，参与吞噬、胞囊、凝固、止血及创伤修复等作用。在生物学、细胞学、生物化学、医学和食品科技上有广泛用途。迄今外源凝集素的许多性能并未全清，在自然界中的精细生理作用仍是个谜。本文论述外源凝集素的定义、性能及用途，以提请有关人士重视。     

绒螯蟹凝集素的红细胞凝集活性分析

利用血凝试验及糖抑制试验测定一种绒螯蟹的血清及肌肉提取液的凝血活性及糖抑制专一性,同时进行热稳定性、pH及Ca^2 影响试验。结果显示：血清只能凝集9种红细胞,肌肉提取液能凝集12种红细胞。血清对鹌鹁红细胞的凝集可被乳糖、D-甘露糖、D-果糖、D-半乳糖4种糖所抑制,最小抑制浓度均为200mmol／L,其凝集活性均依赖于Ca^2 ,在pH为6．0～7.0范围内较稳定,经50℃保温10min后活性完全消失。肌肉提取液只被D-甘露糖抑制,在pH为4．0～10．0、温度为4℃～90℃范围内均具活性,说明有很强的耐热性,其凝集活性不依赖于Ca。以上结果表明：血清与肌肉提取液均含有凝集素,且凝集素的种类不同。     

文蛤(Meretrix meretrix)C-型凝集素基因的分子克隆及表达分析

C-型凝集素是一种重要的模式识别蛋白,本研究以文蛤为材料。利用PCR扩增和RACE技术首次获得了编码文蛤C-型凝集素的基因(Mm-CTL)c DNA序列,全长为1855bp,其开放阅读框为519bp,编码172个氨基酸。Smart软件预测Mm-CTL的糖识别结构域(CRD)从第34个氨基酸到第168个氨基酸。BLASTP序列相似性分析显示,Mm-CTL与大竹蛏氨基酸序列同源性最高,相似性为56.5%,与其它无脊椎动物的相似性为13.5%—23.9%。系统进化树分析与同源分析结果一致,其中Mm-CTL与双壳类C-型凝集素聚在一起,与大竹蛏亲缘性最近。环境胁迫实验显示,溶藻弧菌感染6h时Mm-CTL表达量明显上升,在12h时达到最高值,随后有所下降。盐度胁迫时Mm-CTL在盐度5时表达量相对较低,在盐度10—20中的表达量相对较高。温度胁迫时Mm-CTL在35°C时表达量相对最高,10°C时表达量明显较低。研究结果表明,文蛤应对环境因子影响可通过调节Mm-CTL的表达来应答免疫反应。本研究将为贝类先天性免疫因子研究以及病害的防控奠定基础。     

广西地区文蛤的遗传多样性研究

以随机扩增多态性DNA（RAPD）研究广西的山口、北海、犀牛角、东兴的文蛤种群的遗传多样性。结果表明，在筛选的60个引物中，23个呈阳性反应，其中10个引物可产生105条稳定、清晰的带。山口、北海、犀牛角、东兴的文蛤种群的遗传多样性指数分别为0.1995,0.2039，0.1773,0.1936；多态位点比例分别为86.32%，90.63%,81.05%,88.00%,4个种群间的遗传距离在0.050～0.070之间，相邻种群的遗传差距较小。除犀牛角种群以外，其它3个种群的遗传变异水平较高。     

中国对虾血清中酚氧化酶活力研究

１９９５年７－９月,以养殖中国对虾为材料,实验室用弧菌菌悬液注射感染对虾,血甭中测得一定量的酚氧化酶（ＰＯ）。正常状态下对虾血清中ＰＯ活力变化不大,而濒死对虾血清中ＰＯ活力变化较大。较低浓度的菌悬液能有效地提高ＰＯ活力,促使有机体对病原体的防御能力,这在实践中有重要意义。     

分子遗传标记技术在双壳贝类研究中的应用

分子遗传标记是随着分子生物学技术的发展而出现的遗传学标记技术,它突破了形态和细胞水平上遗传标记的局限性,发挥着独特的优势.分子遗传标记目前已出现了几十种,本文主要介绍了同工酶、RFLP、SSR、RAPD这几种常用的分子遗传标记方法在双壳贝类的分类学、遗传多样性研究、遗传育种研究、病理学研究等方面的应用.通过本文可以看出,分子遗传标记多应用在分类学、遗传多样性、遗传育种方面,涉及的种类较广,但主要集中于珠母贝和牡蛎的研究上.     

3种海洋养殖贝类体内的脂肪酸组成

分析了华贵栉孔扇贝Ｃｈｌａｍｙｓｎｏｂｉｌｉｓ（Ｒｅｅｖｅ）、合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｔｅｎｓｉｉ（Ｄｕｕｋｅｒ）、翡翠贻贝Ｐｅｒｎａｖｉｒｌｄｉｓ（Ｌｉｎｎａｅｕｓ）的软体部、肝胰腺和生殖腺的脂肪酸组成及含量。３种贝的各组织中,不饱和脂肪酸含量均较饱和脂肪酸含量高。多不饱和脂肪酸（ＰＵＦＡ）含量丰富,其中二十碳五烯酸（ＥＰＡ）和二十二碳六烯酸（ＤＨＡ）含量相当高,占总脂肪的２５．２６％－２７．２１％。３种贝中,翡翠贻贝的油含量最高（１３．６８％）,软体部的ＥＰＡ和ＤＨＡ含量也较高（２６．９５％）,最具开发利用价值。     

文蛤属(Meretrix)16S rRNA基因及ITS1序列的系统学分析

利用线粒体16SrRNA基因片段及核糖体DNA转录间隔区ITS1序列分析的方法,以近缘属的青蛤(Cyclinasinensis)为外群,对文蛤属的文蛤(M.meretrix)、丽文蛤(M.lusoria)、帘文蛤(M.lyrata)和斧文蛤(M.lamarckii)4种贝类进行了系统学研究。经ClustalX多重比对及DNAsp软件分析后,用PAUP4.0分析软件,计算出种间序列的碱基转换/颠换频率,利用邻接法NJ构建系统发育树。结果表明,帘文蛤与该属其他三种的分歧时间较早,两类序列与其他种类间的相对遗传距离分别在0.25866—0.28218和0.15644—0.20104之间。文蛤与丽文蛤间的16SrDNA及ITS1序列间的遗传距离仅为0.04805和0.04201,拓扑结构图显示关系很近,并且二者的分布区大面积重叠,其序列间的转换/颠换频率接近种内单元型(haplotype)间的序列变化,鉴于它们的贝壳形态有一定差别,应归为同一个种内的不同地理亚种比较恰当。     

流式细胞术比较研究4种双壳贝类血细胞的分群

应用流式细胞术对太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、海湾扇贝(Argopecten irradians)、虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)和毛蚶(Scapharca subcrenata)4种双壳贝类的血细胞分类进行了比较。根据其血细胞的前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)特性的不同将血细胞分群,FSC和SSC二维图分析发现太平洋牡蛎、海湾扇贝和虾夷扇贝的血细胞都可分为3个亚群,即透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞,而毛蚶的血细胞只可区分为透明细胞和颗粒细胞2个亚群。同时还对这4种双壳贝类各种血细胞所占比例进行了比较研究,发现各亚群细胞所占比例差异很大。     

越冬对池塘专养模式下中华鳖(Trionyx sinensis)机体形态、血清生化、脏器相关功能酶活力及肌肉和裙边物性的影响

水生动物往往会通过调整自身生理生化特征而形成各自固有的越冬生存适应对策,因此,深入探究越冬对具有冬眠习性的目标水产养殖动物机体生理状况的影响过程与机制,对指导其安全养殖具重要参考价值。以池塘专养模式下2⁺龄中华鳖(Trionyx sinensis)同生群个体为研究对象,从机体形态、血清生化、脏器相关功能酶活力和肌肉与裙边物性等四个维度开展了中华鳖越冬前后生理生化特征的差异研究,以进一步了解越冬对中华鳖生理生化的影响特征。结果表明:(1)越冬期间实验中华鳖总体上呈现较明显的生长态势,所测30项体尺性状和12项质量性状测定值间的差异相似性分别为46.7%和8.3%;(2)所测16项血清生化指标中,越冬后显著降低的为TG等5项(P<0.05),显著增加的为TP等4项(P<0.05),无显著差异的为GLB等7项(P>0.05);(3)所测8项脏器酶学指标中,越冬后酶活力显著下降的为肝脏CAT、POD和脂肪酶(P<0.05),显著升高的为胃蛋白酶等相关酶指标(P<0.05);(4)所测7项物性指标中,越冬后裙边弹性和咀嚼性均显著增加(P<0.05),其余为下降或无显著差异(P>0.05)。表明越冬为引起肝脏功能发生正常切换的重要时期,但不会引起心肝功能产生实质性改变。研究结果可为中华鳖越冬生理生态学研究和池养中华鳖越冬管理技术体系构建提供基础资料。     

不同花纹文蛤(Meretrix meretrix)的ITS2分析

采用分子生物学方法,进行了江苏和广西两个地区不同花纹文蛤群体的核糖体DNA转录间隔区(ITS2)的序列分析研究。结果表明,广西的文蛤群体和江苏的群体相比较,仅发现江苏群体在333—336bp处发生了缺失,江苏群体内不同花纹文蛤个体间的ITS2也发生了变化。聚类分析结果证实了序列分析结果,广西文蛤群体和江苏文蛤群体间发生了遗传变异,江苏文蛤群体内部也发生了遗传分化。     

双壳类清滤率在海洋污染物毒性研究中的应用

以海湾扇贝(Argopectenirradians)和紫贻贝 (Mytilusedulis)的清滤率为指标 ,研究了金矿废水及其组分、三苯基氯化锡及塔玛亚历山大藻的毒性 ,结果表明金矿废水及其主要组分丁级黄药、CN-和重金属Cd2 +、Cu2 +、Zn2 +对海湾扇贝清滤率的半抑制浓度EC50 分别为40.6 %、7.52、0.226、0.189、0.02、1.10mg/L ;三苯基氯化锡对海湾扇贝的半抑制浓度EC50 为4.86×10-9g/L;塔玛亚历山大藻能抑制紫贻贝的清滤率,半抑制浓度EC50为6000cells/ml。由以上结果可见 ,双壳类清滤率能快速、敏感地反应污染物的影响 ,是海洋污染物毒性研究的一个良好指标。