鱼生长激素基因工程酵母高密度发酵研究

毕赤酵母是一种新型的高效表达单细胞蛋白的宿主菌,本实验室已用毕赤酵母克隆表达了鲈鱼生长激素基因。为了使这一实验室成果尽快转入实际应用,本研究通过对导入生长激素基因的工程菌酵母生长及诱导条件的进一步研究,筛选出了成本低廉、配制方法简便且能使工程菌酵母生长良好的无机盐培养基配方,并确定了酵母发酵工艺过程中主要几种工艺条件。这为重组生长激素的扩大生产及水产养殖业中的实际应用打下了基础。     

基因工程技术应用于水产养殖

中国科学院海洋研究所张培军研究员带领课题组成员采用基因工程技术研制的高新技术产品——基因工程酵母饲料添加剂,在水产养殖中应用取得了显著成效。 国外利用外源生长激素进行鱼类促生长效应的研究,以及应用基因工程     

分子生物学技术在水产养殖中的应用

分子生物学理论与技术的迅猛发展,是近些年来生命科学最为突出的特征。目前,分子生物学技术在动植物品种改良与鉴定以及人类疾病诊断与治疗等领域中已得到了广泛应用,但在水产养殖中应用还很少。近些年来,许多国家竞相研究和发展与水产养殖有关的分子生物学技术,其中竞争的热点在于开发新的优良养殖种类,通过生殖和遗传操作培育优良高产抗逆的良种以及寻找检测和防治病害的新技术新方法等。因此应用分子生物学技术进行水产养殖品种改良和疾病防治就很有发展潜力。本文拟对分子生物学技术在水产育种、种质鉴定、病原体检测以及疾病防治中的应…     

鱼类生长激素的异源表达、应用及安全性评价

鱼类生长激素对鱼的生长发育起着重要的调节作用,能促进鱼体快速生长,提高饵料转化率,在水产养殖业中具有重大应用价值。转生长激素基因鱼具有快速生长效应,可以缩短养殖周期,降低养殖成本和风险。鱼类生长激素基因异源表达体系的建立和发展,使获得大量廉价的鱼类生长激素产品成为可能,为鱼类养殖业新型饵料添加剂的研制开辟了新的途径。本文综述了转生长激素基因鱼和鱼类生长激素基因的异源表达两方面的研究及其安全性评价。     

军曹鱼（Rachycentron canadum）生长激素基因cDNA的克隆和原核表达

运用同源克隆方法,从军曹鱼脑垂体中分离了生长激素基因（GH）的全长cDNA。结果表明,该基因cDNA全长862bp,含615bp的开放阅读框（ORF）,编码204个氨基酸;其中包括22个氨基酸的信号肽和182个氨基酸的成熟肽。采用T-A克隆构建pMD18-T-CoGH重组质粒,测序正确后经Nde I和Xho I双酶切获...     

转鲑鱼生长激素基因酵母菌发酵特性的研究

张培军、Ball等研究表明,外源性生长激素通过注射或浸泡的方法可加快鱼的生长[1]。根据Mclean1987年、Shunsuke等1993年研究发现鱼类后肠具有吸收部分生长激素进入血液循环的特点,本研究室将鲑鱼生长激素基因克隆进无毒无害的酵母菌中,利用可控制的诱导条件,培养出含鲑鱼生长激素的酵母菌,直接掺入饵料,使生长激素通过消化道吸收,以促进鱼的生长。Jacqueline等1989年指出,由于携带外源基因的酵母菌与普通酵母菌的培养要求不同,既要促使菌体快速生长又要保证外源基因的表达,本研究的目的在于选择适宜的培养条件,实现转基因酵母菌的高密度培…     

枝角类在水产养殖中的应用

本文就枝角类与其它活饵的营养成份进行了比较，并阐述了枝角类在海淡水苗种培育和水产饲料中的应用效果、意义，以及蒙古裸腹溞的培养问题.     

矿产资源在水产养殖中的应用

本文研究了矿产资源在水产养殖业中的应用,表明作为水产饲料和改善水产养殖环境的天然矿物和岩石有２０多种。如沸石、麦饭石、膨润土、硅藻土、凹凸棒石、海泡石、稀土等。它们具有饲料添加剂、净化剂、调节剂、催化剂及除虫灭菌和治疗等功能。文中阐述了它们在水产养殖中的作用机理,其对鱼类的生殖、生长、发育、防病等均起着重要作用。我国海水、淡水养殖面积广阔,矿产资源丰富,开发水产用矿产资源前景良好。     

益生素在水产养殖中的应用

1　益生素的由来20世纪初人们开始利用细菌来治疗人类和动物肠道疾病,早为人知的是Ellinger1980年、Sandine1979年用嗜酸乳杆菌和乳酸杆菌来防止大肠杆菌感染。Hidu1963年发现有益细菌可改善养殖水体环境,促进动物的生长。Parker1974年首次使用“Probiotic(s)”一词来描述给动物使用的有益微生物,其定义为:有助于肠道菌群平衡的微生物和物质。在1994年的德国汉堡研讨会上,学者们将Probiotics狭义地定义为“改善微生物和酶的平衡,或刺激特异性和非特异性免疫机制的活菌和(或)死菌(包括组分和产物)”[1]。Austin等用细菌、光合细菌、酵母菌…     

整合鲈鱼生长激素基因的蓝藻7942

利用载体pAMll46与烟草花叶病毒35S启动子，鲈鱼生长激素基因GH连接，构建携带鲈鱼生长激素基因的整合型表达载体pAMGH，用自然转化方法将pAMGH导入蓝藻7942，筛选到6株抗壮观霉素，氨苄青霉素敏感的藻落，提取抗性藻落的基因组总DNA，用生长激素基因特异引物进行PCR检测，结果证实鲈鱼生长激素基因已经整合进入蓝藻7942的染色体中。     

重组鲈鱼生长激素酵母饲料添加剂及对网箱喂养海水鱼的促长效应

该文应用基因工程方法开展了具有加速鱼生长的鱼生长激素基因工程研究，构建了高效表达的66鱼生长激素甲醇半赤酵母工程菌．研究中试规模的培养基配方，解决中试工艺设计和生产试验及质量检验方面的问题；通过发酵培养该工程茵获得重组鱼生长激素产品，研究掺入饲料的合适比例，并进行生产规模的海水经济鱼类喂养试验．先后对花尾胡椒鲷(Plectorhinchus cinctus)，卵形鲳鯠(Trachinouts ovatus)，大黄鱼(Pseudosciaena croces)等3种海水经济鱼(4批共约6万尾)进行生长状况对比，增重比率均值分别为20．0％、17．3％、18．4％和56．8％．饲料添加酵母工程菌具有明显地促进海水鱼生长的作用。     

半胱胺盐酸盐和LHRH-A对黄鳍鲷生长激素分泌的影响

研究了生长抑素抑制剂半胱胺盐酸盐(CSH)和促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)对黄鳍鲷生长激素(GH)分泌的影响.黄鳍鲷垂体GH含量在单独注射不同剂量CSH(25,50,100μg/gb.w)后2h均显著提高,注射后24h恢复正常.黄鳍鲷血清中GH水平在注射CSH(100μg/gb.w)后2h和CSH(25,50μg/gb.w)后6h均明显提高.单独注射LHRH-A(0.1μg/gb.w)后2h黄鳍鲷垂体GH含量和血清中GH水平均明显提高.注射CSH和LHRH-A后6h垂体GH含量明显高于单独注射CSH或LHRH-A,而血清GH水平在注射后12h明显高于单独注射CSH或LHRH-A.结果表明CSH和LHRH-A都能明显刺激黄鳍鲷垂体合成和释放GH,并且与CSH作用存在剂量依存关系,CSH和LHRH-A联合注射比单独注射作用更明显,作用的时间更持久.     

不同饵料对点带石斑鱼幼鱼生长、存活的影响

使用5种不同的饵料，投喂全长6．72mm的点带石斑鱼，分析和比较不同饵料的营养成份对点带石斑鱼幼鱼生长、存活的影响．结果表明：尽管饵料中粗蛋白的含量在48．8％～72．8％之间，粗脂肪含量在5．4％～10．3％之间，相差很大，但点带斑鱼幼鱼均能正常生长，且存活率无明显的差异．对5种饵料的脂肪酸进行了分析，结果显示，饵料中高度不饱和脂肪酸DHA和EPA的含量之间的比例，对点带石斑鱼幼鱼的生长比其含量本身更加具有明显的影响，DHA与EPA相对含量的比值为6．3的1组，其幼鱼的生长速度明显快于比值为1．73～2．75的其他4个饵料组。     

适宜浓度的维生素E促进半滑舌鳎生长激素基因的表达

本实验旨在探究维生素E对半滑舌鳎垂体组织中生长激素基因表达的影响。作者在每千克等氮等能的基础饲料中分别添加0、400和1 600mg的DL-α-生育酚乙酸酯(维生素E)投喂半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)成鱼(464±2.6) g,进行为期8周的养殖实验;另外,在L-15培养基中添加0、18和54μmol/L的维生素E,对半滑舌鳎成鱼(464±2.6) g的垂体细胞进行为期3 d的体外原代培养实验。分别取垂体组织和原代细胞,通过荧光实时定量PCR分析其gh mRNA的相对表达量。实验结果表明:垂体组织中gh mRNA的相对表达量随着饲料中维生素E含量的增加而呈现先升高后下降的变化趋势,在400 mg/kg组时显著高于其他各组(P0.05);随着细胞培养液中维生素E浓度的升高, gh mRNA的相对表达量显著增加(P0.05)。由此可见,适宜浓度的维生素E能够促进半滑舌鳎垂体组织中生长激素基因的表达。     

海州湾4种鱼类生长特征的空间异质性

传统的渔业资源评估均假设鱼类的生长参数是匀质的,然而近年来越来越多的研究表明海洋鱼类生长存在空间异质性。为探究海州湾鱼类生长参数的空间异质性现象,本研究分析了2013–2018年海州湾及其邻近海域方氏云鳚(Pholis fangi)、尖海龙(Syngnatus acus)、小黄鱼(Larimichthys polyactis)和赤鼻棱鳀(Thryssa kammalensis)的空间分布,使用电子体长频率分析方法结合Bootstrap重抽样方法估算了这4种鱼类的生长参数及其在深、浅水区域中的差异。结果显示,这4种鱼类生长参数均表现出一定的空间异质性,其中尖海龙和小黄鱼生长参数的空间异质性表现较为明显。这种差异可能是由于空间上的理化条件、群落结构以及物种本身洄游分布的差异而产生的。     

仿鱼尾推进小型水下航行器设计与模型试验研究

以蓝鳍金枪鱼为蓝本,进行了仿鱼尾推进小型水下航行器方案设计与模型制作,包括设计主体外形、主体结构及安装形式、传动机构、尾鳍形状等。在水池中开展了自航实验,测定了尾鳍的摆幅、频率、形状及刚度对航速的影响,结果表明在相同条件下提高尾鳍摆动频率或增大尾鳍摆幅,能提高水下航行器的速度;当采用柔性尾鳍时,航行器的速度明显增加。     

臭氧在鱼类育苗中的应用

本文主要研究臭氧在鱼类育苗水质处理中的应用效果，观察不同浓度的臭氧对养殖水中细菌和弧菌的灭菌效果，及其对鱼苗孵化率和仔鱼存活率的影响。     

活鱼运输船应用闭式循环技术的研究

目前国内的活鱼运输船均采用开式循环系统,即用水泵连续抽取航道水补充到活鱼舱中,使舱内水体不断溢出舱外,以此来维持活鱼所需的水质环境.若在冬春季,航道水温低于10℃时,便无法进行活鱼运输.应用闭式循环技术,可以不受季节性气温、水温的限制,不受航道水质污染的影响,并且可以在淡水航区运载海水活鱼,全年运输时间长达12个月.改装后的“闽狮渔F259”温控活鱼运输船经过1.5a的运输试验考核,其保活运输时间超过200h;鱼水比达1∶15;存活率达98%以上;平均净载量30t/航次;获得较好的经济效益.