斑石鲷(Oplegnathus punctatus)雌、雄鱼核型及Ag-NORs带型分析

为研究斑石鲷雌、雄鱼染色体的形态与结构,本文采用植物血球凝集素(PHA)及秋水仙碱体内注射法,取头肾细胞采用冷滴片结合空气干燥的方法获取了斑石鲷雌、雄鱼染色体的中期分裂相,分别对其进行了常规的吉姆萨和硝酸银染色并进行核型和带型分析。结果显示:(1)雄性斑石鲷核型为2n=47、1m+2sm+44t、NF=50,雌性斑石鲷核型为2n=48、2sm+46t、NF=50。(2)斑石鲷雌、雄鱼染色体相对长度分别为(2.30±0.37)—(6.87±0.42)及(2.28±0.30)—(10.33±0.86),雄性斑石鲷具有一条体型巨大的异形中部着丝粒染色体,其相对长度达到其它染色体的2—5倍。(3)染色体经银染后,发现含有2个Ag-NORs位点的分裂相最多,位点位于一对亚中部着丝粒染色体短臂末端,呈短棒状,且具有活性异形现象。(4)本研究中雄性斑石鲷具有一条异形性染色体,可能是性染色体Y,我们推测其染色体的性别决定类型可能为X1X1X2X2/X1X2Y型。本研究为鲈形目鱼类的细胞遗传学研究提供了基础资料,并将为进一步开展斑石鲷遗传育种等研究奠定基础。     

荣成俚岛和胶南斋堂岛斑头鱼渔业生物学特征的比较研究

对2010年10月采自荣成俚岛和胶南斋堂岛近海的斑头鱼(Hexagrammos agrammus)繁殖群体生物学特征进行了比较分析.研究结果表明:两个群体斑头鱼的体长组成和体质量组成差异不显著,优势体长组均为100～150mm,优势体质量组分别为20.0～50.0g和30.0～70.0 g;体长与体质量关系分别为W=2.0×10-5L3.0.257(R2=0.968 7)和W=1.0×10 5L3.0805(R2=0.943 8),肥满度指数(K)分别为1.83±0.19和2.08±0.20.荣成俚岛斑头鱼较胶南斋堂岛群体的生长速度慢、肥满度指数低,但卵径大、性成熟较早.斑头鱼雌雄个体的性腺成熟度和性成熟系数均与体长呈正相关关系;肝脏指数和肥满度指数变化可作为判定斑头鱼繁殖时期的重要依据.水温不同造成2个群体繁殖期差异,胶南斋堂岛群体繁殖时间相对滞后.     

青岛文昌鱼(Branchiostoma belcheri tsingtauense) 染色体荧光原位杂交条件研究

采用青岛文昌鱼18SrDNA序列为探针进行荧光原位杂交,根据囊胚晚期细胞上的核杂交信号多少及特异性确立青岛文昌鱼染色体荧光原位杂交的最佳反应条件。结果表明适合于青岛文昌鱼染色体荧光原位杂交的条件为:预处理采用5ng/μl的胃蛋白酶处理3—5min和10ng/μlRNA酶处理1h;100—300倍探针浓度的鲑鱼精DNA进行封闭;50%甲酰胺/2×SSC,1×SSC,2×SSC,42℃的洗脱强度;3%BSA进行抗体封闭;杂交时间可以控制在12—18h;杂交温度保持37℃;PI(1.5μg/ml)的量每片20μl以内。     

黑鳃梅童鱼和棘头梅童鱼的形态学比较研究

采集丹东近海的黑鳃梅童鱼29个个体和海洲湾近海的棘头梅童鱼30个个体,开展2种梅童鱼形态特征比较研究。对2种梅童鱼的顶枕部小棘、臀鳍第一鳍棘、鳔侧枝、鳃腔和耳石等部位进行拍照及形态描述,并进行了2种梅童鱼传统形态学的8个分节特征和14个量度特征的判别分析、主成分分析和单因子方差分析。结果显示:2种梅童鱼的顶枕部小棘、鳔侧枝、鳃腔颜色和耳石形态存在明显差异;除鳔侧枝数有明显差异外,其它可数性状均无显著差异。采用贡献率大的8个参数建立2种梅童鱼的判别公式,判别准确率达100%;黑鳃梅童鱼和棘头梅童鱼在外部形态可量数据上虽存在个别交叉,但仍能形成各自相对集中的组;在P=0.01显著性水平下进行单因子方差分析,结果2种梅童鱼在7个变量上存在显著性差异。     

眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)发育中体色花纹时序发生的色素细胞变化和控制基因表达的分析I.胚胎时期

眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)属于鲈形目、雀鲷科、双锯鱼属, 是热带珊瑚礁观赏鱼类的首选品种。不同体色和花纹与色素细胞相关基因的表达直接相关, 在其胚胎发育的过程中, 色素细胞的形态和数量一直在变化, 但不同发育时期各种色素细胞的动态变化及其控制基因表达情况等仍需明确研究。记录了眼斑双锯鱼胚胎时期色素细胞变化较为明显的6个发育时期, 观察了不同时期的体色及色素细胞的变化特点, 并利用荧光定量PCR检测了各发育时期的10个体色控制基因的表达情况。结果显示: 在胚胎发育阶段, 整个胚胎的颜色从橙黄逐渐转变为暗红、黑红、黑色到最终透明, 观察到卵黄囊表面幼体黑色素细胞到成体黑色素细胞的转变过程, 鱼体表面在翻转期出现成体黑色素细胞、在器官形成期出现红色素细胞, 眼睛及腹部在孵化期出现虹彩色素细胞。结合荧光定量PCR结果分析发现: 卵黄囊表面幼体黑色素细胞推测是外胚层中的神经嵴细胞直接发育而成, 不需要迁移过程; Ednrb、TYR、Tbx2b基因对幼体黑色素细胞的形成和发育有重要作用, Pax3、Dct、Aim1基因与成体黑色素细胞的分化、迁移、形成过程密切相关; 其中TYR基因的相对表达量在体节期出现显著增加, 说明TYR基因在胚胎发育初期就参与黑色素细胞的形成; Tbx2b基因不仅对黑色素细胞形成有影响, 对眼斑双锯鱼心脏的形成也有一定作用; Fms基因对红色素细胞形成有重要作用; Ltk基因的表达要早于虹彩色素细胞的出现; 相关性分析发现各基因之间存在相互作用。     

不同水温下儿茶素EGCG在黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)体内代谢动力学和肝消除研究

采用反相高效液相色谱-紫外检测法测定了黄颡鱼血浆、肝脏中儿茶素EGCG含量,并研究了不同水温(10℃和20℃)下EGCG在黄颡鱼体内代谢动力学和肝组织消除特征。结果表明,高温下黄颡鱼腹腔注射EGCG后体内吸收较快,T1/2ka为0.21h,T1/2α为2.07h,T1/2β为22.89h,AUC为5195.41μg·h/ml,Tp为0.95h,Cmax为257.75μg/ml;低温下分别为5.67h、9.53h、207.49h、17283.03μg·h/ml、12.56h和117.16μg/ml。同时在0.5、1、2、4、8、12、24、48、96h各时间点检测了肝脏组织中EGCG浓度,并计算得出高温下EGCG在肝组织中的T1/2β为24.15h,低温下肝组织中T1/2β为64.17h。对不同水温下代谢动力学和肝组织消除规律的研究表明,EGCG在黄颡鱼体内吸收、分布和消除速度与水温关系密切,高温下均较低温下迅速。     

许氏平鲉Sebastes schlegeli(Hilgendorf)及欧氏六线鱼Hexagrammos otakii Jordan et Starks核型研究

采用PHA体内注射肾细胞直接制片法研究青岛近海常见的许氏平鲉和欧氏六线鱼的核型,核型公式分别为2n=48,2m+46t,NF=50和2n=48,6m+16sm+20st+6t,NF=70。许氏平鲉的t组的第20对(t20)染色体和欧氏六线鱼t组第3对(t3)染色体分别为各自核型中具随体的特征性染色体。此外,在两种鱼中均未发现有异形性杂色体存在。     

真鲷Pagrosomus major和黑鲷Sparus macrocephalus的核型及Ag—NOR带研究

采用PHA体内注射肾细胞直接制片法及银染法研究真鲷和黑鲷的核型及Ag—NOR带。指出这两种鱼的核型公式分别为2n=48,2st+46t,NF=48和2n=48,4m+4sm+2st+38t,NF=56。两种鱼的核型中各自唯一的一对亚端部着丝点染色体(st染色体)为典型的具次缢痕的染色体。银染结果显示该次缢痕部位即为银染核仁组织者区域(Ag—Nucleolusorganizer regions NORs),并表现出多态性。同时,在这两种鱼的中期分裂相中普遍观察到了NORs联合现象。此外,还讨论了这两种鱼的亲缘关系和鲷科鱼类中两个类群及其核型的分化问题,认为从细胞遗传学角度看,鲷科鱼类的两个类群在演化过程中是分支进化的。     

多齿围沙蚕Perinereis nuntia(Savigny,1818)染色体组型

以多齿围沙蚕Perinereis nuntia(Savigny,1818)幼体为材料,研究染色体组型,2n=28,NF=56,其中中部着丝点(m)染色体4对;亚中部着丝点(sm)染色体10对。     

牙鲆染色体组型的研究

牙鲆Ｐａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓｏｌｉｖａｃｅｕｓ（ＴｅｍｍｉｎｃｋｅｔＳｃｈｌｅｇｅｌ）属蝶形目（Ｐｌｅｕｒｏｎｅｃｔｉｆｏｒｍｅｓ）、牙鲆科（Ｐａｒａｌｉｃｈｔｈｙｉｄａｅ）。牙鲆为近海温水性底层鱼类，在我国沿海分布很广，具有很高的经济价值。有关牙鲆的核型研究在国内尚未见报道。弄清这种鱼类的核型，对于了解其细胞遗传学特征、研究其种群遗传学以及牙鲆在分类和系统演化中的地位有着重要意义。１材料与方法实验材料采用青岛近海垂钓获得的活鱼７尾（雌３尾、雄４尾）。染色体制备采用ＰＨＡ体内注射法［１］。于活鱼…     

斜带髭鲷Hapalogenys nitens（Richardson）和横带髭鲷H．mucronatus （Eydoux et Souleyet）的核型

采用ＰＨＡ体内注射肾细胞直接制片法研究青岛近海常见经济鱼类斜带髭鲷和横带髭鲷的核型．得出核型公式前者为：２ｎ＝４８，２ｍ＋８ｓｍ＋２ｓｔ＋３６ｔ，ＮＦ＝５８，后者为２ｎ＝４８，２ｍ＋８ｓｍ＋１４ｓｔ＋２４ｔ，ＮＦ＝５８。斜带钱绸核型中ｔ５和ｔ１６对染色体及横带货绸核型中ｔ７对染色体为具次缢痕的染色体。两种鱼的核型特点符合典型的高位类群鱼类核型特征。     

红鳍笛鲷、紫红笛鲷和白斑笛鲷的核型研究

以红鳍笛鲷（Lutjanus erythopterus)、紫红笛鲷(Lutjanus argentimaculatus)、白斑笛鲷（Lutjanus bohar)为材料，胸腔注射PHA及秋水仙素溶液，取头肾细胞经空气干燥法制片，姬姆萨染液染色，观察分析获得染色体核型：染色体数目2N＝48，染色总臂数为48。     

鲬Platycephalus indicus（Linnaeus）的核型和Ag─NOR带研究

采用ＰＨＡ体内注射肾细胞直接法和银染法研究的核型及Ａｇ－ＮＯＲ带。提出的核型公式为２ｎ＝４８，２ｍ＋８ｓｍ十２ｓｔ＋３６ｔ，ＮＦ＝５８。核型中第二对端部着丝点染色体（ｔ染色体）为典型的具次缢痕染色体。银染结果显示次缢痕部位为银集核仁组织者区（Ａｇ－Ｎｕ－ｃｌｅｏｌｕｓｏｒｇａｎｉｚｅｒｒｅｇｉｏｎ，Ａｇ－ＮＯＲｓ），并表现出数目和结构多态性。此外，还讨论了的不同群体间核型的差异，认为不同群体间存在明显的多态性。     

中国对虾PENAEUS CHINENSIS(O''''SBECK)心脏形态及超微结构的研究

描述中国对虾心脏形态及超微结构。1.心脏存在第四对心孔,心脏壁由心外膜与心肌层组成,心孔的瓣膜处无心外膜,心肌束从不同方向穿越心脏而形成三维网状结构。2.心肌内膜系统由肌质网、横管系和Tz管系组成;肌节A带、I带和H带分明,Z线清晰,二联体或三联体出现在H带处。3.心脏神经包括自主系统及背神经系统,前者由神经节干及其分支组成,神经节干包含5个大神经细胞和4个小神经细胞;后者由一对背神经及其合成的一支背神经干组成。     

黄渤海螠虫动物（螠虫动物门）的研究

虫动物系动物界的一个小门，属真体腔原口动物。海生，世界种约１４０种，我国黄渤海目前发现４种，分隶于２目，２科，４属，其中有一新种－青岛池体Ｉｋｅｄｏｓｍａ？ｑｉｎｇｄａｏｅｎｓｅｓｐ．ｎｏｖ。现将该４种的分类、分布和生态特点记述如下：     

圆尾斗鱼的胚胎和仔鱼发育的研究

圆尾斗鱼的受精卵呈圆球形，光滑，略带淡黄色，浮性；卵膜吸水膨胀后的平均直径为１．１９ｍｍ，当水温２１－２３．５℃时，从受精卵到孵化出膜需４２．５小时；水温２２－２４．５℃时，刚出膜仔鱼到卵黄囊消失需４天，到油球消失约２５天。出膜３０天仔鱼的形态基本与成体相似。