合浦珠母贝三倍体死亡率观察

以染色体倍性鉴定方法检查合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ三倍体处理组的４个不同发育生长期（即２—４细胞期、担轮幼虫期、６个月小苗及１４个月成员）的三倍体比例，并将同一处理组培育出的贝苗经倍性鉴定后将二倍体和三倍体分开，在海上吊养１周年，分别检查其死亡率，观察比较三倍体合浦珠母贝的死亡状况。结果表明，在胚胎发育期，三倍体和二倍体的死亡率差异不大；在直线铰合期至变态附着成为贝苗这段时期，三倍体死亡率明显高于二倍体；成贝的三倍体和二倍体死亡率没有显著差异。     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４－２８，胚胎染色体数目主要为２８－４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母     

三倍体合浦珠母贝的生殖腺观察

通过对三倍体合浦珠母贝pinctada martensyy（D．）春、秋两个繁殖盛期的生殖腺发育状况和性经观察，发现大多数三倍体在外观上没有生殖腺或者只有发育不全的生殖腺。组织切片检查结果表明，多数三倍体的生殖腺停留在休止期和增殖期，少数发育到生长期。没有一个三倍体的生殖腺发育达到成熟期。三部体中，雌性占94．3％，雄性占5．7％。三倍体的生殖腺中，初期的生殖细胞占多数，没有出现成熟的卵母细胞和精子。有些滤泡和生殖细胞萎缩退化。因此，三倍体生殖腺发育异常，三倍体合浦珠母贝是不育的。     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４—２８，胚胎染色体数目主要为２８—４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母贝是不育的．     

三倍体和二倍体合浦珠母贝育珠比较初步研究

利用人工诱导培育的三倍体合浦珠母贝Pinctada martensii(D.)进行插核育珠试验,并同处理组内的二倍体同胞进行比较。结果表明:三倍体合浦珠母贝的留核率和正圆珠比率分别为81.0％和58.8％,而二倍体则为71.3％和37.8％;在非正圆珠中两者的污珠率差别不大,但三倍体的尾巴珠和素珠的比率明显低于二倍体;三倍体的正圆珠珍珠层平均厚度和平均重量分别为381μm和163mg,二倍体分别为265μm和105mg,两者差异极显著(P<0.01)。初步表明,利用三倍体合浦珠母贝培育珍珠,能缩短育珠期,提高珍珠的产量和质量。     

合浦珠母贝三倍体和二倍体的生长比较

合浦珠母贝Pinctada martensii(D.)三倍体和二倍体的生长测定表明,三倍体成贝平均壳高、壳长、壳宽和体重均超过二倍体同胞,差异极显著(P<0.01)。特别是抑制第一极体形成的三倍体,经两年养殖,壳高、体重和肉重分别比二倍体增加13.01％,44.03％和58.37％。在繁殖期,三倍体的增长率显著超过二倍体。非繁殖期的大多数月份,三倍体的增长率和二倍体相差不大。因此,可以认为三倍体生长速度快主要是由于三倍体的生殖腺发育受阻,体内积累的能量转移到体细胞生长所致。     

合浦珠母贝四倍体诱导过程中非整倍体的产生

合浦珠母贝Pinctadamartensii (Dunker)三倍体的卵与二倍体的精子授精 ,以细胞松弛素B(CB)抑制第一极体释放诱导四倍体 ,得到胚胎期非整倍体占 (88.1 8± 6 .79) % ,1龄贝中非整倍体约占 2 8.70 %。成贝非整倍体染色体数目有 2 9,3 0 ,40 ,41 ,43条 5种类型。非整倍体作为一个群体其壳长和体重与二倍体无明显差异 (p >0 .1 0 ) ,但与三倍体有显著差异 (p<0 .0 1 ) ;二倍性水平的非整倍体的壳长和体重明显小于二倍体 (p <0 .0 1 ) ,而三倍性水平的非整倍体与二倍体无明显差异 (p >0 .1 0 )。研究结果表明 ,合浦珠母贝能耐受约单倍体染色体数目 7%— 1 4%的增加或减少 ,且表明合浦珠母贝非整倍体在一定条件下是可以存活的。     

合浦珠母贝三倍体和二倍体三个基因座位杂合度与生长的比较

抑制第一极体(T_1组)和抑制第二极体(T_2组)形成的合浦珠母贝三倍体,其Lap-3,Pt-5和Sod-1基因座位的杂合度比野生贝或养殖贝都有提高。T_1组这三座位的平均杂合度高于T_2组。两处理组内三倍体各基因座位杂合度不一定高于同胞二倍体,在杂合座位数与大小测量间也未证实有正相关性。但三倍体的生长速度都显著高于同胞二倍体,这主要是因为三倍体性腺发育差导致能量转向体细胞生长所致。     

合浦珠母贝人工诱导四倍体的研究

用细胞松驰素Ｂ（ＣＢ）、聚乙二醇（ＰＥＧ）和静水压抑合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）制第１次卵裂以及ＣＢ抑制极体形成诱导四倍体。ＣＢ抑制第１次卵裂在早期胚胎２－４细胞阶段发现四倍体,但８细胞阶段以后四倍体胚胎消失。ＰＥＧ和ＰＥＧ＋ＣＢ能诱导细胞融合产生四倍体,但处理组幼虫在担轮期死亡。ＣＢ抑制极体形成能诱导出较高比例的四倍体,在胚胎初期和担轮幼虫期分别占４０％和３０％以上。处     

合浦珠母贝二倍体、三倍体和非整倍体群体的基因杂合度与生长比较

采用淀粉凝胶电泳方法对合浦珠母贝Pinctadamartensi(D.)雌性三倍体与雄性二倍体交配,细胞松弛素B抑制其受精卵第一极体释放产生的二倍体、三倍体及非整倍体3个群体进行了同工酶研究。二倍体、三倍体及非整倍体群体在6个多态位点的平均基因杂合度分别为0.255±0.087,0.286±0.097,0.275±0.089,三倍体的杂合度高出二倍体约12%,表明多倍体诱导能增加诱导群体的杂合度。但在单个位点上,三倍体的杂合度不一定高于二倍体;在各自群体内,平均杂合位点数与生长间无明显的相关性,单个位点上的杂合子也未完全表现出其生长大于纯合子,且差异不明显(p>0.05)。因此,合浦珠母贝三倍体的快速生长难以完全用杂合度增高假说解释,只能说明诱导处理能使三倍体的杂合度增高,而能量再分配和"巨型性"可能对其快速生长起着不可忽视的作用。非整倍体群体的杂合度高于二倍体群体,但其生长却小于二倍体,其原因可能是染色体的增减对机体的生长有一定的影响。     

合浦珠母贝遗传育种研究进展

随着生物技术在水产领域中的应用不断扩大,贝类遗传育种也日益受到人们的重视.自从六十年代合浦珠母贝(PinctadamartensiiDunker)人工育苗成功以来,人们对其遗传育种进行了多方面的研究,并取得了一定进展.现将其各个方面的现状作一简介.     

珍珠贝多糖肽对合浦珠母贝非特异性免疫的影响

以不同浓度的珍珠贝多糖肽投喂合浦珠母贝15—75d后，实验合浦珠母贝(Rinctada marlensii）的血细胞的总量及各种血细胞的数量、吞噬细胞的吞噬能力、血清对细茸的凝集、抑菌和杀菌活力等都有不同程度的增加，表明该珍珠贝多糖肽可以增强合浦珠母贝非特异性免疫能力。     

合浦珠母贝精子的实验生物学初步研究

用光镜观测了海水盐度,ｐＨ温度和激素对合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ精子的激活及运动情况的影响,结果表明,在ｐＨ为８．０的自然海水（盐度为３０）中,精子不被激活,在ｐＨ为９．０－１１．５的范围内８０％,以上的精子能被激活,其中在ｐＨ为１０．０时的激活率最高,精子活力最强,ｐＨ为９．５的条件下,观察了精子在盐度为１０－４５范围内的精子活力,在盐度为１５－４５范围内精子都能被激活,其中在盐度为     

合浦珠母贝精子激活机制的初步研究

分别用氨海水、不同盐度的氨海水、Na~ ,K~ ,Ca~2 ,Mg~(2 )的氯化物及Na~ ,K~ 的硝酸盐和NH_4Cl,NH_4Cl,NH_4NO_3,（NH_4）_2SO_4和（NH_4）_2CO_4为激活剂,对人工解剖获得的合浦珠母贝Pinctadamartensii精子进行激活。实验结果表明,合浦珠母贝精子的细胞膜离子通道为闸门控制类型。其激活途径主要是通过NH~ _4或HCG类激素开启该闸门,发生Na~ 和Cl~-的交换,使精于细胞获得或释放能量而激活。pH太低则会影响它们的激活作用。