海藻中的功能生物活性成分——细胞激动素

细胞激动素(Cytokinins)是植物激素的一种,广泛存在于陆生和水生植物中。绝大多数细胞激动素是嘌呤环的衍生物,在C5位上有一个取代基侧链,它们的化学活性与其结构密切相关( Skoog et al.,1970)。细胞激动素的生理作用主要是促进细胞分裂和扩张,调节细胞分化,形态建成及延缓衰老等。 人类将海藻作为肥料利用已有近两千年的历史,最初人们将施用海藻肥取得的促生长效果归因于海藻含有多种无机营养成分。近30年来,随着研究的不断深入,大量研究表明,海藻中含有多种植物激素,其中的细胞激动素是关键的功能成分,对植物具有特别明显的促生长作用。而且,作为一种内源性植物激素,细胞激动素在海藻本身的生长发育过程中起着至关重要的作用,它能促进藻类细胞的分裂、伸长、活性延迟及细胞内营养物质的运输等(IL. etham et al.,1983)。     

海藻中植物生长素组成的初步研究

海藻样品在经过提取、分离和纯化等前处理步骤后，以薄层色谱（TLC）法定性检测了16种海藻中的植物生长素（IAA）以及提取和分离纯化的效果。结果表明，大部分海藻样品经过提取、脱色、萃取、柱层析纯化过程后都发现含有IAA的显色斑点而其它生长素的显色斑点很少。这些结果说明了16种海藻样品中都含有IAA以及定性检测方法的准确性和前处理方法的必要性。     

海藻植物生长素的提取和分离纯化方法

以IAA作为生长素的研究代表，结合已有的研究和方法，探讨了海藻中生长素的提取和纯化分离方法，确立了以有机溶剂提取海藻中的生长素，以乙醚萃取法和柱层析法和对生长素进行分离纯化的方法，实验表明本方法适用于大型经济海藻和商业海藻植物生长剂中生长素测定的前处理部分。     

海藻植物生长素的提取和分离纯化方法

以IAA作为生长素的研究代表 ,结合已有的研究和方法 ,探讨了海藻中生长素的提取和纯化分离方法。确立了以有机溶剂提取海藻中的生长素 ,以乙醚萃取法和柱层析法对生长素进行分离纯化的方法。实验表明本方法适用于大型经济海藻和商业海藻植物生长剂中生长素测定的前处理部分     

16种海藻中植物生长素的提取、分离纯化和含量测定

以荧光分光光度检测法和小麦胚芽鞘切段生物试法对16种中国东部沿海生长的海洋藻类中的生长素含量进行了定量分析。结果表明,所测定的16种海藻,包括红、绿及褐藻中均有生长素(IAA)存在。海藻不同种类之间的含量变化较大,褐藻中的含量低于红藻和绿藻。小麦胚芽鞘切段生物试法对IAA测定的含量变化为5．3-110．2ng／g FW之间,荧光分光光度检测法测定的含量变化为1．1-46．9ng／g FW。小麦胚芽鞘切段生物试法对IAA测定的含量明显高于荧光分光光度检测法测定的相同种含量。讨论结果认为,小麦胚芽鞘切段生物试法的测定结果虽然灵敏度高,但易受实验材料不均一性的制约,试验周期长,并受环境因子的干扰,适用于海藻中生长素的半定量分析;荧光分光光度检测法相对适合于海藻中生长素的定量分析,有很好的可行性。     

海带中细胞激动素的纯化分离方法

海带样品于 2 0 0 1年采自青岛太平角海湾 ,用三种不同方法处理样品 ,通过对实验方法及条件的筛选 ,确立了提取、纯化和分离海带中细胞激动素的方法步骤和流程。结果表明 ,最佳方法的基本步骤为 :( 1 )用甲醇∶水∶醋酸 ( 70∶ 30∶ 3,V/V/V)从海带组织中提取出细胞激动素 ,再用PVPP柱去除提取液中的酚类和其他杂质 ;( 2 )将提取液通过连在一起的PVPP柱、DEAE柱和C1 8柱 ,以纯化样品并同时从自由基、核苷、核苷酸和葡糖苷型细胞激动素混合物中分离出核苷酸型细胞激动素 ;( 3)用接有氨基柱的正相液相色谱进一步将葡糖苷型细胞激动素分离出来 ;( 4 )用C1 8液相色谱柱分离其他各种细胞激动素     

海藻标本的采集、制作和保存

阐述了海藻标本的采集时间和地点、所需的采集工具、采集过程中应注意的事项以及标本的制作和保存方法。     

五种海藻对虹鲍的诱食作用

采用自由择食和非自由择食实验的方法,研究５种海藻Ｌｅｓｓｏｎｉａ ｖａｒｉｅｇａｔｑ,Ｄａｒｖｉｌｌａｅａ ａｕｌａｒｃｔｉｎａ,Ｐｏｒｐｈｙｒａ ｃｏｌｕｍｂｉｎａ,Ｍａｃｒｏｃｙｓｔｉｓ ｐｙｒｉｆｅｒａ,Ｅｃｋｌｏｎｉａ ｒａｄｉａｔａ对实验虹鲍Ｈａｌｉｏｔｉｓ ｉｒｉｓ的诱食作用。结果表明,５种海洋藻类的诱食作用呈显著性差异。     

海藻硫酸多糖911抗乙脑病毒作用的观察

采用体外微量细胞病变抑制实验及体内半数致死量LD_(50)测定法,分别观察海藻硫酸多糖911对乙型脑炎病毒的作用。结果表明,海藻硫酸多糖911在体外适宜的浓度条件下,对乙型脑炎病毒有一定的抑制作用,但对病毒无中和作用。体内给药,911对乙型脑炎病毒无明显抑制作用。     

海藻、牡蛎提取物HLK及其营养成分的分析

海藻、牡蛎于1993年6－8月采自青岛近海。经恒温水解、脱水浓缩、低温干燥等方法得到海藻、牡蛎提取物HLK。对HLK进行分析测定，结果表明，提取物含有丰富的氨基乙磺酸、多种维生素、多糖类、不饱和脂肪酸、低脂肪以及丰富而适量的钾。钙、锌、铁、铜、碘、硒等多种营养素和矿物质元素。为研制开发海藻、牡蛎保健食品提供科学依据。     

高浓度钙离子胁迫对褐牙鲆幼鱼鳃黏液细胞数量、超微结构及分泌方式的影响

利用光学显微镜和透射电子显微镜,研究了高浓度钙离子(37.5±0.1)mmol/L胁迫对褐牙鲆(Paralichthys olivaceus)幼鱼鳃黏液细胞数量、超微结构及分泌方式的影响。结果表明,高浓度钙离子组实验鱼鳃弓黏液细胞的数量与对照组无显著差异(P0.05);高浓度钙离子组和对照组实验鱼鳃丝黏液细胞的超微结构相同,未成熟黏液细胞呈棒状,具发达的高尔基体和粗面内质网,细胞核近圆形,位于细胞底部,细胞顶膜在鳃上皮组织表面凹陷形成分泌腔,成熟黏液细胞体积较大,呈圆形,黏液颗粒排列紧密,充满整个细胞,基质密度大,细胞器位于细胞底部,细胞核形状不规则;高浓度钙离子组和对照组实验鱼鳃丝黏液细胞的分泌方式相同,均为顶浆分泌,但高浓度钙离子组实验鱼黏液细胞分泌活动旺盛,大量黏液正在向胞外排放,而对照组黏液细胞的黏液分泌量较少。研究认为,褐牙鲆幼鱼对高浓度钙离子胁迫具有较强的耐受能力。     

羟基对微生物细胞的核酸、蛋白质、葡萄糖作用研究

羟基自由基对细胞的三大基本分子核酸、蛋白质、葡萄糖有着强烈破坏作用。压载水中羟基的比值浓度达到0．63mg／L时，含有微生物液体中的总蛋白质含量从1．49g／100mL降到0．993g／100mL，减少了33．4％；核酸中RNA、DNA的含量分别从2．43μg／mg、0．96μg／mg分别减少到1．29μg／mg、0．19μg／mg，分别减少46．9％、80．2％；葡萄糖含量从0．246mg／100mL增加到0．492mg／100mL，增加了1倍。试验数据表明，羟基自由基氧化、分解、破坏了微生物细胞三大基本分子核酸、蛋白质、葡萄糖，这是微生物致死的主要生化原因之一。     

海藻工具酶研究Ⅱ.褐藻酸酶的制备、性质及对裙带菜细胞的解离研究

褐藻酸降解菌埃氏交替单胞菌(Alteromonas espejiana)菌株Al01,通过发酵培养制备褐藻酸酶.该酶作用的最适pH为7.0,最适温度为40℃,最适底物浓度为1%～2%;在离子浓度为0.5mmol/dm3时,Mn2+对酶促反应稍有促进作用,Ca2+、Hg2+则有明显的抑制作用.该酶用于裙带菜单细胞和原生质体解离时,以酶液组成为褐藻酸酶1%、纤维素酶1%,45×10-3的NaC1为渗透剂,酶解温度25℃,pH7.0,酶解3-4h效果最好.     

外源植物生长素对鳗草植株促生长作用的研究

实验室条件下,研究了5个不同吲哚乙酸(Indole-3-acetic acid,IAA)浓度处理(0(对照)、1、10、50、100μmol·L~(-1))对鳗草(Zostera marina)存活、生长、光合色素含量、过氧化物酶(POD)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的影响,分析了外源IAA对鳗草植株的促生长作用。研究显示,经25d培育实验,鳗草地上组织环境海水添加IAA(1~100μmol·L~(-1))显著提高了植株存活率(66%~69%),且植株的单株叶面积、地上组织绝对生长率、地上生产力和总生产力均在100μmol·L~(-1)处理组达到最大值,显著高于其他处理组(P0.05);鳗草地下组织环境海水添加IAA对植株生长的促进作用不显著,仅50μmol·L~(-1)处理组植株的根长高于对照组植株根长2倍左右;鳗草地上组织环境海水的IAA浓度为100μmol·L~(-1)或地下组织环境海水的IAA浓度为50μmol·L~(-1)时,植株的各光合色素含量达到最大值;IAA对植株POD和SOD活力无显著影响(P0.05),但高浓度IAA处理条件下植株的MDA含量显著降低。研究结果表明,IAA是一种有效促进鳗草植株生长的生长调节剂,叶片可能是鳗草吸收外源生长素的主要部位,在设定的4个IAA处理中,100μmol·L~(-1)IAA浓度对鳗草植株的促生长作用最显著。     

流沙湾冬、春季大型海藻的微量元素分析

采用微波消解法和AFA、ICP-MS对流沙湾2008年冬春季21种大型海藻的微量元素进行了分析。结果表明,As、Cu、Pb、Cr、Se、Fe、Mn在细江蓠体内含量最高,分别为8.90、34.35、24.26、68.12、12.04、26777.20、400.16mg/kg;Hg在海蕴体内含量最高,达6.90mg/kg;Zn在鼠尾藻体内含量最高,为277.37mg/kg;Cd在石花菜体内含量最高,为6.77mg/kg;Ba在海门冬体内含量最高,为127.02mg/kg。各藻类对各重金属元素的综合富集能力由强到弱依次为细江蓠拟刚毛藻水云海蕴鼠尾藻海门冬条浒苔小珊瑚肠浒苔蜈蚣藻礁膜大石花菜石花菜半盐生单歧藻团扇藻长石莼宽扁叉节藻穗状鱼浒苔喇叭菜海头红刚毛藻,显示出藻类对各重金属元素综合富集能力因藻而异。各元素被藻类富集的量从大到小依次为FeMnBaZnCrCuPbAsSeCdHg,显示出藻类对营养元素的富集要大于对毒性元素的富集。各藻类对各重金属的富集系数从几倍至几十万倍不等,最高是细江蓠对Fe的富集,其次为海蕴对Hg的富集,最差为刚毛藻对Se的富集,其富集系数分别为204875.29、13800.00、3.48。聚类分析结果显示细江篱的富集能力最强,是多种重金属污染海域修复的首选生态环境材料。但对重金属复合污染海域进行生物修复,应有针对性地选择数种富集能力较强的大型海藻组成修复生物群落。     

黄、渤海辽宁海区底栖海藻的研究

本文报告了黄、渤海在辽宁海区底栖海藻的种类组成，区系性质、群落结构扣季节性变化。经调查共有底栖海藻166种，分别隶属于蓝藻门、红藻门、褐藻门扣绿藻门，其中包括经济海藻75种。黄、渤海底栖海藻的温度性质以暖温带为主，带有一定的亚热带性，其群落成分的季节性变化非常明显。     

海藻中抗氧化、保湿功能活性物质的研究进展

<正>海藻是海洋生物资源的重要组成部分,是低等隐花植物,主要分为四大类——蓝藻(Cyanophyta)、绿藻(Chlorophyta)、红藻(Rhodophycea)和褐藻(Phaeophyceae),另外还包括硅藻(Diatom)、甲藻(Gymnodinium)、金藻(Chrysophyceae)等微藻[1],全世界海洋中生长约有30 000余种海藻。海藻中存在着许多结构新颖独特的化合物,例如:脂类、酚类、多糖类、萜类,含硫化合物等。这些化合物赋予海藻许多神奇功能,抗菌抗肿瘤、抗氧化、保湿功能等。海藻来源广泛,成本低廉,本身含水量高,具有良好的     

中国黄、渤海常见大型海藻的脂肪酸组成

对中国黄、渤海沿岸的17种红藻、12种褐藻、7种绿藻的脂肪酸组成进行了分析研究，结果表明，黄海和渤海的绝大多数红都富含二十碳高度不饱和脂肪酸（主要是二十碳五烯酸，EPA和二十碳四烯酸，AA），一般都占总脂肪酸的40％以上；仙菜目的松节藻、细枝软骨藻，隐丝藻目的亮管藻、海萝、海膜、蜈蚣藻中的EPA含量均超过40％，其中海萝达到58％；杉藻目扁江蓠中EPA含量很低，但花生四烯酸含量达到58％。裸藻中16：0、18：1（n-9)、20：4（n-6)和20：5（n-3)含量占绝对优势，十八碳高度不饱和脂肪酸（PUFAs)和二十碳PUFAs是主要的脂肪酸。在每种褐藻中还含有一定量的14：0、18：2（n-6)和18：4（n-3)。褐藻中的十八碳PUFAs含量比红藻高，而二十碳PUFAs比红藻低。绿藻中的主要脂肪酸是16：0、十六碳高度不饱和脂肪酸（主要是：16：4（n-3)和16：3（n-3)、18：1以及C18PUFAs（主要包括18：2（n-6),18:3(n-3)和18：4（n-3)，绿藻的C16、C18PUFAs含量较高。     

海藻硫酸多糖911对小鼠脾淋巴细胞增殖反应及对细胞产生IL—2作用的影响

本文以~3H—TdR掺入法观察911对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响并用CTLL细胞检测了其对IL—2的作用。体外实验结果表明,911对小鼠脾淋巴细胞增殖反应有明显的增强作用,以0.5μg/ml的浓度效果最为明显,相对增殖指数RPI可达200％;体内实验则以5mg/kg体重ip,连续7d效果最好,相对增殖指数RPI可达176％;911用药组小鼠IL—2的产生量均高于对照组,以5mg/kg和10mg/kg效果最好。以上实验证明,这一多糖是一种有希望的新免疫调节药物。     

细胞穿膜肽转导大型海藻及对其光合作用的影响

细胞穿膜肽能够介导外源物质进入细胞,是一种简单高效的分子运输手段。传统的大型海藻外源物质转导方法较为复杂,并且效率偏低。目前尚没有将细胞穿膜肽应用于大型海藻的报道。本实验利用细胞穿膜肽九聚精氨酸(R9)对浒苔、紫菜和海带这三种常见的大型海藻进行转入,观察其转导效果,并测定转导后藻体光合作用效率的变化。实验结果表明,细胞穿膜肽R9能够成功的转入三种大型海藻,转入的效率与藻体细胞壁结构有一定联系;转导后藻体的Fv/Fm、ETR(I)和ETR(II)没有明显变化,说明R9对大型海藻的光合作用没有负面影响。本实验建立了一种新型的大型海藻外源物质转导方法,为今后的大型海藻育种,分子转化以及外源物质转入机制等研究奠定了基础。