大黄鱼性早熟问题的研究—I.网箱养殖鱼性泉发育状况

用组织学方法研究了网箱养殖大黄鱼性腺发育的状况,结果表明,在所研究的１０个网箱（养殖期１ａ）中,其中６个网箱各有少数大黄鱼卵巢进入大生长期,卵母细胞胞质出现卵黄颗粒,其余网箱大黄鱼处于小生长期,在雄性,全部网箱大黄鱼精巢发育进入ＩＩＩ－ＩＶ期。根据这些结果,我们认为,在夏季７、８月间可能有５０％～６０％雌性和６０％～７０％雄性提早性腺成熟。     

大黄鱼性早熟问题的研究I.网箱养殖鱼性腺发育状况

用组织学方法研究了网箱养殖大黄鱼性腺发育的状况。结果表明 ,在所研究的 10个网箱 (养殖期 1a)中 ,其中 6个网箱各有少数大黄鱼卵巢进入大生长期 ,卵母细胞胞质出现卵黄颗粒 ,其余网箱大黄鱼处于小生长期。在雄性 ,全部网箱大黄鱼精巢发育进入Ⅲ～Ⅳ期。根据这些结果 ,我们认为 ,在夏季 7、8月间可能有50 %～ 60 %雌性和 60 %～ 70 %雄性提早性腺成熟。     

大黄鱼性早熟的机制:精巢中间质细胞和足细胞的显微与亚显微结构

本文应用组织学和电镜技术对性早熟与未成熟雄性大黄鱼精巢中间质细胞和足细胞进行显微与亚显微结构的研究。结果表明，这两种细胞在精巢不同发育时期的精细结构出现明显的差异。早熟精巢间质细胞和足细胞胞质中滑面内质网池和管状线粒体都十分发达，而未成熟鱼则发育较差。我们认为雄性大黄鱼性腺早熟的原因可能与间质细胞和足细胞提早发育成熟有关。     

菲律宾蛤仔GnRH基因沉默对其性激素合成酶基因表达的影响

为了探究菲律宾蛤仔(Ruditopes philippinarum)GnRH基因沉默对其性激素合成酶表达的调控作用,本研究首先根据菲律宾蛤仔GnRH cDNA序列,优化设计并合成了2条dsRNA,进行了作用时间、作用浓度的筛选。研究显示,30μg/50μL的GnRH-ds1干扰链注射到实验动物血腔后48 h,菲律宾蛤仔脏神经节中GnRH基因表达量较PBS组下降了73.3%,较阴性对照组下降了71.4%,达到了对菲律宾蛤仔体内GnRH基因表达的抑制作用。对性腺发育增殖期的菲律宾蛤仔进行dsRNA注射后48 h,采用荧光定量PCR测定了对照组和GnRH表达沉默组菲律宾蛤仔性腺中性激素合成相关基因CYP17、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和17β-HSD的mRNA表达量,发现在GnRH沉默组的菲律宾蛤仔性腺中3β-HSD的表达量与对照组相比无显著变化,而CYP17和17β-HSD的表达量与空白对照组和阴性对照组相比分别下降了86.3%和84.9%(p0.05)。实验结果初步说明菲律宾蛤仔体内GnRH可能通过调控其性腺中CYP17、17β-HSD的基因表达而影响性激素的合成并调控生殖发育。     

外源激素对花尾胡椒鲷血清性类固醇激素的影响

对花尾胡椒鲷(Plectorhynchus cinctus)雌鱼注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)和促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)。注射后6h，两种处理均能显增加血清睾酮(T)水平3注射后24h，两种处理睾酮水平均下降，与对照差异不显。注射后6h，HCG处理组血清T水平比LRH-A处理组更高，而注射后6—24h，LRH-A处理组血清事酮水平更为稳定。实验过程中，血清雌二醇(E2)水平没有显变化。     

牙鲆胃肠道及肝脏GnRH受体的免疫组织化学研究

利用免疫组织化学ABC法，对牙Ping胃肠道及肝脏促性腺激素释放激素（GnRH）受体的表达及分布特点进行了研究。结果显示：胃肠道粘膜上皮、腺上皮及肝细胞呈GnRH受体免疫反应阳性，阳性反应物分布在细胞膜和细胞质中，细胞核呈阴性反应。提示：牙Ping胃肠道上皮细胞及肝细胞能够表达GnRH受体，说明GnRH可能通过其受体影响牙Ping消化系统的功能。     

细胞外钙和钾离子对调节离体鲤脑垂体促性腺激素分泌的影响

作者于１９９０年９月－１９９１年１月采用离体灌流培育方法对鲤鱼脑垂体促性激素的分泌调节进行研究。结果表明，脑垂体基础促性腺激素（ＧｔＨ）分泌不依赖于细胞外钙离子（Ｃａ＾２＋）；但脉冲式鲑鱼促性腺激素释放激素（ｓＧｎＲＨ）刺激的ＧｔＨ分泌，则依赖于细胞外Ｃａ＾２＋且细胞外Ｃａ＾２＋的作用至少部分通过电位敏感性Ｃａ＾２＋通道。５０ｍｍｏｌ／Ｌ高浓度钾离子（Ｋ＾＋）显著刺激脑垂体基础ＧｔＨ分泌，Ｋ＾＋的     

17β-雌二醇对鲻鱼脑垂体促性腺激素细胞分泌活动的影响

本文用组织学方法研究了17β－雌二醇对鲻鱼脑垂体促性腺激素分泌细胞（gonadotropin cell,GtH)发育成熟和分泌活动的影响。结果表明，17β－雌二醇能够促使鲻鱼脑垂体GtH细胞发育成熟。表现在实验组（高和低剂量组）给药2个月后，脑垂体中外侧部多数GtH细胞胞质充满分泌颗粒，而对照组GtH细胞胞质尚未充满分泌颗粒。另外，给药5个月后，高剂量和低剂量实验组多数GtH细胞胞质出现空胞，而对照组空泡则很少。这说明17β－雌二醇有促进GtH细胞的分泌活动，并促使鲻鱼性腺提早发育。这些结果可为17β－雌二醇的作用机制提供科学依据。     

饥饿胁迫对大黄鱼激素敏感性脂肪酶和乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达及酶活性的影响

激素敏感性脂肪酶（hormone sensitive lipase,HSL）和乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase,ACC）是脂代谢的关键酶,肌肉和肝脏是鱼类脂代谢的主要场所。为研究饥饿过程中这两种酶的作用,本实验采用实时荧光定量PCR技术以及ELISA技术检测了在35 d饥饿过程中这两种酶在大黄鱼肌肉和肝组织中mRNA表达水平和酶活性的变化。结果显示,饥饿胁迫显著降低大黄鱼肌肉和肝组织中脂肪含量,以及脂肪合成关键酶ACC mRNA表达水平（P<0.05）;显著提高脂肪分解关键酶HSL mRNA表达水平（P<0.05）。饥饿胁迫对肌肉和肝组织中HSL和ACC酶活性均有显著影响（P<0.05）,肌肉和肝组织HSL （相关系数r分别为0.598 2和0.539 6）以及肌肉组织ACC酶活性（r=0.677 7）与对应mRNA表达水平呈中度正相关（0.5 < r < 0.8）,但ACC酶活性在肝组织与其对应的mRNA表达量呈负相关（r=-0.374 0）,提示饥饿胁迫对大黄鱼HSL和ACC的表达存在翻译前和翻译后两种水平的调控。本研究结果可为研究饥饿胁迫对大黄鱼脂类代谢分子层面的影响机制提供依据。     

曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)促性腺激素释放激素(GnRH)基因的鉴定、特征及成熟期的表达研究

促性腺激素释放激素（GnRH）在脊椎动物的繁殖过程中起着至关重要的作用,同时也存在于许多无脊椎动物中。利用cDNA末端快速扩增技术（RACE）克隆出曼氏无针乌贼（Sepiella japonica）促性腺激素释放激素（命名为SjGnRH,KP 982885.1）。SjGnRH基因的cDNA全长710 bp,开放阅读框（ORF）为273 bp,编码90个氨基酸,包括一条含有31个氨基酸的信号肽、12个氨基酸的GnRH多肽和44个氨基酸的GnRH相关肽（GAP）;SjGnRH与剑尖枪乌贼（Uroteuthis edulis）和真蛸（Octopus vulgaris）的同源性分别为86.7%和73.3%;SjGnRH高度保守的十二肽与剑尖枪乌贼和真蛸的octGnRH相似度达100%,其信号肽的相似性分别为66.7%和54.8%,GAP区的相似性分别为95.5%和77.3%;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）结果显示,SjGnRH基因在成熟期的表达具有特异性,在脑中表达量最高,且与其他组织差异显著（P<0.05）;采用原位杂交技术检测SjGnRH mRNA在脑内的表达模式,结果表明：SjGnRH在食道上神经团、食道下神经团和视叶的不同部位均有表达,暗示SjGnRH可能参与曼氏无针乌贼的生殖调控作用。     

环境因子对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)粘附大黄鱼(Pseudosciaena crocea)表皮粘液影响的研究

采用3H-TdR同位素示踪方法研究了环境因子对溶藻弧菌对大黄鱼表皮粘液粘附作用的影响。试验结果表明,溶藻弧菌能很好地粘附于大黄鱼表皮粘液,其粘附量在菌浓度不超过6.52×108cfu/ml情况下随菌浓度的升高而升高;粘附量在25℃下孵育180min趋于饱和,在180min以内与孵育时间呈正相关关系;粘附作用在温度25—30℃、pH值偏酸、盐度35条件下较强;在无Na (盐度为0)时,无粘附作用;Ca2 能显著加强溶藻弧菌的粘附作用,而Mg2 作用不明显。这些结果表明,溶藻弧菌对大黄鱼表皮粘液有较强的粘附作用,其粘附作用受温度、盐度、pH值等环境因子的影响。     

乳铁蛋白对大黄鱼仔鱼生长、存活和抗应激能力影响的研究

用不同水平(分别为T1组:0 mg/L;T2组:50 mg/L;T3组:100 mg/L;T4组:150 mg/L)乳铁蛋白(lactoferrin,简称LF)强化的卤虫(Artemia franciscana)幼体投喂9~23日龄大黄鱼(Pseudosciaena crocea)仔鱼。结果表明,摄食LF强化卤虫幼体的大黄鱼仔鱼其生长无明显改善(P0.05),但大黄鱼仔鱼的成活率和抗应激能力显著提高,T3(60%)和T4(80%)组的成活率显著高于T1(40%)和T2(30%)组(P0.05)。T4组大黄鱼仔鱼的耐干露能力最强,T4组和T3组的抗高盐度(65)应激能力明显的强于T1和T2组(P0.05),T4组和T3组之间无明显的差异(P0.05)。经4 h高温(32°C)曝露后,T1和T2组的仔鱼全部死亡,T4组和T3组的成活率分别为30%和23.3%。即仔鱼的成活率和抗应激能力受卤虫强化LF水平的影响显著,LF强化的有效剂量为不低于100 mg/L强化水体。     

海洋对热带气旋响应的研究 Ⅱ.不同海洋热力结构下的情形

利用中二层非线性原始方程海洋模式，研究海洋在自身不同热力结构下对热带气旋的响应。计算结果表明，初始混合层（ML）深度和层结强度对海表温（SST）和ML深度变化起着十分重要的作用。初始ML深度对海流量值影响较大，层结强度则较小。东海陆架区特殊的海洋热力结构，极易造成SST下降。海洋对7002号台风响应的模拟结果与观测资料较一致。     

长江冲淡水路径问题的初步研究——Ⅱ.风场对路径的作用

本文从理论上研究了局地风场对夏季长江冲淡水路径变化的效应,主要结果如下:(1)对于长江冲淡水路径变化来说,夏季本区平均风场的效应与底形效应相比可以忽略。(2)当平均风涡度场的效应与底形效应相当时,所得的近似解表明,底形效应将使长江冲淡水的路径向左转向,而局地风场效应只对该路径作微小的订正。     

牟氏角毛藻培养研究——Ⅱ.海泥提取液和不同氮肥对生长率的作用

采用海泥提取液和不同氮源的培养基对牟氏角毛藻进行培养研究的结果,表明海泥提取液对牟氏角毛藻的生长繁殖具有明显的促进作用,比施用维生素和生物素好,尤以2%浓度为佳.不同氮源的培养结果表现出牟氏角毛藻在短时间内,每小时每个细胞吸收NO₃-N1.6-4.4×10-8毫克,而吸收NH₄-N 4.9-5.9×10-8毫克;这证实了牟氏角毛藻吸收NH₄-N的能力强于NO₃-N,所以生长在NH₄-N培养基中胜过生长在NO₃-N培养基中.从培养利用出发,我们认为采用铵盐培养基为宜.     

紫菜和石莼对酸耐受力的研究 Ⅱ.不同pH对条斑紫菜和孔石莼光合作用和细胞结构的影响

用温度为20℃、pH值从2—8的自然海水处理藻体20分钟后放入正常的自然海水中,测其光合作用速率。两种藻体的净光合作用速率随海水的PH值降低而降低;条斑紫菜可耐受pH值为3的酸度,而孔石莼却受到严重伤害。用pH为3的海水处理藻体,其光合作用速率随处理时间的延长而降低,孔石莼在14℃条件下,30分钟降为负值,在20℃条件下,10分钟降为负值;不同时间和温度处理的条斑紫菜均未出现负值。用pH为3的海水处理过的条斑紫菜和孔石莼,藻体放入pH为8.2的自然海水中培养7天后,条斑紫菜细胞结构正常;而孔石莼的细胞结构受到严重伤害,细胞壁分离解体,色素体破坏。     

中国对虾生物能量学研究 Ⅱ.温度和体重对能量收支的影响

于１９９６年５月～９月,以日本刺沙蚕（Ｎｅａｎｔｈｅｓｊａｐｏｎｉｃａ）为饵料,测定３种规格（０．２７１±０．０４１ｇ;３．５０９±０．３０１ｇ;１１．０６２±１．０２７ｇ）池塘养殖中国对虾在２０℃、２５℃和３０℃水温下的能量收支。实验结果表明,温度和体重对摄食能有显著影响,不同规格中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）对摄食能的分配比例无显著差异,温度是影响能量分配的主要因素。在３个温度下生长能、排粪能、排泄能、蜕壳能和呼吸耗能的平均能量分配比例分别为：２９．０１％,４．５１％,４．１７％,８．０５％,５５．１６％,２５．３２％,２．７２％,８．７２％,３．５０％,５９．８５％和１５．５２％,２．３１％,９．５２％,２．９６％,６８．７１％。随温度升高呼吸耗能比例增大,生长能的比例减小源于呼吸能的增加。     

藻胆体稳定性的研究——Ⅱ.低温对藻胆体稳定性的影响

本文研究10以℃,4以℃,-4℃和-196℃对藻胆体的室温和液氮温度荧光发射光谱的影响。根据F686和F666,F686和F655相对荧光强度的比值和室温荧光峰的波长位置来判断藻胆体的解离程度和完整性。研究结果表明,在10——4℃温度范围内,藻胆体的解离随着温度的降低而加强;藻胆体在-196℃下很稳定;在8个月内未发生解离。     

中国对虾人工诱导雌核发育的研究 Ⅱ.紫外线辐射对精子顶体反应和受精能力的影响

研究了 36 5 nm波长紫外线辐射中国对虾精子对其顶体反应和受精能力的影响。结果表明 ,低剂量紫外线辐射促进精子发生顶体反应 ,大剂量辐射使精子丧失发生顶体反应的生理机能并死亡。 36 5 nm波长紫外线能够透过精荚和纳精囊盖 ,对其内精子起到杀伤作用。精液稀释液在紫外线下辐射 5～ 8s,仍有部分精子具有受精能力 ,但胚胎在早期阶段即死亡。人工诱导雌核发育的过程中 ,紫外线辐射精液稀释液 5～ 8s,可获得遗传物质失活的精子 (激活源 )。经透射电镜观察分析 ,紫外线对精子遗传物质的损伤是一种使染色质变性的化学作用。