珍珠贝多糖肽对合浦珠母贝非特异性免疫的影响

以不同浓度的珍珠贝多糖肽投喂合浦珠母贝15—75d后，实验合浦珠母贝(Rinctada marlensii）的血细胞的总量及各种血细胞的数量、吞噬细胞的吞噬能力、血清对细茸的凝集、抑菌和杀菌活力等都有不同程度的增加，表明该珍珠贝多糖肽可以增强合浦珠母贝非特异性免疫能力。     

合浦珠母贝三倍体死亡率观察

以染色体倍性鉴定方法检查合浦母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ三倍体处理组的４个不同发育生长期的三倍体比例，并将同一处理组培育出的贝苗经倍性鉴定后将二倍体和三倍体分开，在海上吊养１周年，分别检查其死亡率，观察比较三倍体合浦珠母贝的死亡状况。     

合浦珠母贝人工诱导四倍体的研究

用细胞松驰素Ｂ（ＣＢ）、聚乙二醇（ＰＥＧ）和静水压抑合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）制第１次卵裂以及ＣＢ抑制极体形成诱导四倍体。ＣＢ抑制第１次卵裂在早期胚胎２－４细胞阶段发现四倍体,但８细胞阶段以后四倍体胚胎消失。ＰＥＧ和ＰＥＧ＋ＣＢ能诱导细胞融合产生四倍体,但处理组幼虫在担轮期死亡。ＣＢ抑制极体形成能诱导出较高比例的四倍体,在胚胎初期和担轮幼虫期分别占４０％和３０％以上。处     

合浦珠母贝三倍体死亡率观察

以染色体倍性鉴定方法检查合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ三倍体处理组的４个不同发育生长期（即２—４细胞期、担轮幼虫期、６个月小苗及１４个月成员）的三倍体比例，并将同一处理组培育出的贝苗经倍性鉴定后将二倍体和三倍体分开，在海上吊养１周年，分别检查其死亡率，观察比较三倍体合浦珠母贝的死亡状况。结果表明，在胚胎发育期，三倍体和二倍体的死亡率差异不大；在直线铰合期至变态附着成为贝苗这段时期，三倍体死亡率明显高于二倍体；成贝的三倍体和二倍体死亡率没有显著差异。     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４－２８，胚胎染色体数目主要为２８－４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母     

合浦珠母贝遗传育种研究进展

随着生物技术在水产领域中的应用不断扩大,贝类遗传育种也日益受到人们的重视.自从六十年代合浦珠母贝(PinctadamartensiiDunker)人工育苗成功以来,人们对其遗传育种进行了多方面的研究,并取得了一定进展.现将其各个方面的现状作一简介.     

合浦珠母贝精子激活机制的初步研究

分别用氨海水、不同盐度的氨海水、Na~ ,K~ ,Ca~2 ,Mg~(2 )的氯化物及Na~ ,K~ 的硝酸盐和NH_4Cl,NH_4Cl,NH_4NO_3,（NH_4）_2SO_4和（NH_4）_2CO_4为激活剂,对人工解剖获得的合浦珠母贝Pinctadamartensii精子进行激活。实验结果表明,合浦珠母贝精子的细胞膜离子通道为闸门控制类型。其激活途径主要是通过NH~ _4或HCG类激素开启该闸门,发生Na~ 和Cl~-的交换,使精于细胞获得或释放能量而激活。pH太低则会影响它们的激活作用。     

合浦珠母贝精子的实验生物学初步研究

用光镜观测了海水盐度,ｐＨ温度和激素对合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｆｕｃａｔａ精子的激活及运动情况的影响,结果表明,在ｐＨ为８．０的自然海水（盐度为３０）中,精子不被激活,在ｐＨ为９．０－１１．５的范围内８０％,以上的精子能被激活,其中在ｐＨ为１０．０时的激活率最高,精子活力最强,ｐＨ为９．５的条件下,观察了精子在盐度为１０－４５范围内的精子活力,在盐度为１５－４５范围内精子都能被激活,其中在盐度为     

三倍体合浦珠母贝的生殖腺观察

通过对三倍体合浦珠母贝pinctada martensyy（D．）春、秋两个繁殖盛期的生殖腺发育状况和性经观察，发现大多数三倍体在外观上没有生殖腺或者只有发育不全的生殖腺。组织切片检查结果表明，多数三倍体的生殖腺停留在休止期和增殖期，少数发育到生长期。没有一个三倍体的生殖腺发育达到成熟期。三部体中，雌性占94．3％，雄性占5．7％。三倍体的生殖腺中，初期的生殖细胞占多数，没有出现成熟的卵母细胞和精子。有些滤泡和生殖细胞萎缩退化。因此，三倍体生殖腺发育异常，三倍体合浦珠母贝是不育的。     

合浦珠母贝四倍体诱导过程中非整倍体的产生

合浦珠母贝Pinctadamartensii (Dunker)三倍体的卵与二倍体的精子授精 ,以细胞松弛素B(CB)抑制第一极体释放诱导四倍体 ,得到胚胎期非整倍体占 (88.1 8± 6 .79) % ,1龄贝中非整倍体约占 2 8.70 %。成贝非整倍体染色体数目有 2 9,3 0 ,40 ,41 ,43条 5种类型。非整倍体作为一个群体其壳长和体重与二倍体无明显差异 (p >0 .1 0 ) ,但与三倍体有显著差异 (p<0 .0 1 ) ;二倍性水平的非整倍体的壳长和体重明显小于二倍体 (p <0 .0 1 ) ,而三倍性水平的非整倍体与二倍体无明显差异 (p >0 .1 0 )。研究结果表明 ,合浦珠母贝能耐受约单倍体染色体数目 7%— 1 4%的增加或减少 ,且表明合浦珠母贝非整倍体在一定条件下是可以存活的。     

合浦珠母贝精子的实验生物学初步研究

用光镜观测了海水盐度、pH、温度和激素对合浦珠母口Pinctadafucata精子的激活及运动情况的影响。结果表明,在pH为8．0的自然海水（盐度为30）中,精子不被激活,在pH为9．0—11．5的范围内80％以上的精子能被激活,其中在pH为10．0时的激活率最高,精子活力最强。在pH为9．5的条件下,观察了精子在盐度为10—45范围内的精子活力。在盐度为15—45范围内精子都能被激活,其中在盐度为30左右激活率最高,精子活力最强。同时发现,氢氧化钠没有激活作用。合浦珠母贝精子对温度的适应性很强,在15—40℃内精子激活率都很高。绒毛膜促性腺激素（HCG）也可激活,在浓度为500IU·ml~-1时激活率最高,而促黄体素释放激素A_2（LHRH-A_2）则没有激活作用。     

合浦珠母贝精子激活机制的初步研究

分别用氨海水、不同盐度的氨海水、Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋,Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋的氯化物及Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋的硝酸盐和ＮＨ４Ｃｌ,ＮＨ４ＮＯ３,（ＮＨ４）２ＳＯ４和（ＮＨ４）２ＣＯ４为激活剂,对人工解剖获得的合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａ ｍａｒｔｅｎｓｉｉ精子进行激活,实验结果表明,合浦珠母贝业郛的细胞膜离子通道这闸门控制类型,其激活途径主要是通过ＮＨ４或ＨＣＧ类激素开启该闸门,发生Ｎａ和Ｃｌ的交换,使精子细     

合浦珠母贝卵子电击脉冲参数的初步研究

运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数。实验中调制百分比：100％；脉冲间隔：1．0s：电极距离：2mm；脉冲个数：5个，参数保持不变。用不同的电脉冲参数组合（脉冲电压100-400V、脉冲持续时间0．5～3．0ms、脉冲频率10～50kHz，共28个组合）对卵子电击，然后加入精子进行授精，统计各组受精率和孵化率，以受精率和孵化率达到50％以上为衡量指标。结果表明，合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感，当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大。脉冲持续时间对其影响不大，适应范围较宽。优化的转基因电击脉冲参教组合为：脉冲电压1.0kV／cm，脉冲持续时间20ms，脉冲频率50kHz，或者脉冲电压1．5kV／cm，脉冲持续时间1．5ms，脉冲频率50kHz。     

合浦珠母贝两个野生种群的生化遗传变异

用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直平板电泳技术测定了大亚湾和北部湾合浦珠母贝Pinctadamartensi野生种群12种同工酶26个基因座位的遗传变异。结果表明,两个种群的平均杂合度分别为0.1243±0.0377和0.0999±0.0441,与已报道的珠母贝属的其他种很接近。两个种群的杂合子缺失系数分别为-0.278和-0.346;遗传相似度(I)和遗传距离(D)分别为0.9842和0.0159;基因分化系数GST为0.0253,表明2个种群之间有较强的基因流。     

三倍体合浦珠母贝不育性研究

对三倍体合浦珠母贝Ｐｉｎｃｔａｄａｍａｒｔｅｎｓｉｉ（Ｄ．）春、秋两繁殖盛期的生殖腺进行了组织学观察，并对其配子形成及受精、发育进行了研究。结果表明：合浦珠母贝三倍体的生殖腺发育差，生殖细胞数量少，极少个体能见到成熟卵母细胞和精子；三倍体的配子能完成受精作用，能发育至直线铰合期。配子多为非整倍体，其染色体数目多为１４—２８，胚胎染色体数目主要为２８—４２，故胚胎不能正常发育。因此，三倍体合浦珠母贝是不育的．