几种褐藻中褐藻多糖硫酸酯的分离及分析

分别从３种马尾藻及３份不同产地的海带中提取出褐藻多糖酸酯，并比较了它们的得率和化学组分。得率最高的在大连产海带，为５．５％。马尾藻褐藻多糖硫酸酯组成都很复杂，硫酸根含量都比较低。     

褐藻多糖硫酸酯的结构与生物活性研究

褐藻多糖硫酸酯（fucoidan,FPS）是所有褐藻中所固有的细胞间多糖,存在于细胞壁基质中。生长于潮间带、长时间与空气接触的褐藻种类中,如多年生的墨角藻（Fucus vesiculosus）类,其褐藻多糖硫酸酯的含量可高达20%;生长在较深处的海带（Saccharina japonica）类中含量较低,约为1%~2%。褐藻多糖硫酸酯是一类独特的结合有硫酸基的水溶性杂聚糖,其化学组成和结构非常复杂,以岩藻糖和硫酸基为主,随着褐藻的种类不同还含有半乳糖、木糖、糖醛酸等其他成分。褐藻多糖硫酸酯具有多种生物活性,目前针对墨角藻、泡叶藻（Ascophyllum nodosum）、鼠尾藻（Sargassum thunbergii）等褐藻中的褐藻多糖硫酸酯研究较多,发现其具有免疫调节、抗病毒、抗肿瘤、抗凝血、抗氧化等生物活性。本文主要就褐藻多糖硫酸酯的提取、纯化、结构及生物活性等方面研究进行综述。     

用GPC法测定硫酸多糖911的分子量和分子量分布

实验采用 GPC法测定了硫酸多糖 911的分子量及分子量分布 ,经测定硫酸多糖 911的重均分子量 Mw为 850 0± 50 0 ,其中 Mw<10 0 0 0的分子占总分子的百分比在 70 %以上 ,分子量分布宽度 Mw/ Mn为 1.30± 0 .0 2     

几种海藻多糖硫酸酯碱式铝盐的制备

本文以褐藻胶和κ-卡拉胶为原料通过酸水解分别获得了低聚的甘露糖醛酸、古罗糖醛酸和低聚 κ-卡拉胶 ,并采用 HPGPC法测定了这 3种低聚糖的重均分子量。在此基础上再经硫酸酯化和成盐修饰制备了各自的硫酸酯碱式铝盐。对制得的几种碱式铝盐进行了红外光谱 (IR)分析和有机硫含量 (S% )、铝含量 (Al% )及样品制酸力等部分理化性质的测定。测定结果初步显示出这几种海藻多糖硫酸酯碱式铝盐较好的抗消化性溃疡前景。     

转录组和蛋白组分析海带褐藻多糖硫酸酯对RAW 264.7细胞的免疫调节作用

海带(Saccharinajaponica)是我国的主要经济褐藻,从海带中制备的褐藻多糖硫酸酯具有免疫调节等多种生物活性,但鲜有基于组学的研究报道。本文采用RNA高通量测序(RNA-sequencing,RNA-seq)转录组学技术以及平行反应监测(ParallelReactionMonitoring,PRM)靶向定量蛋白组学方法,探究海带褐藻多糖硫酸酯作用于小鼠巨噬细胞RAW 264.7后对巨噬细胞功能和通路的影响。结果表明,褐藻多糖硫酸酯(100μg/mL)作用于RAW 264.7细胞后,差异表达基因主要富集在免疫反应、先天性免疫应答等生物过程以及TNF、NF-κB、Toll样受体等信号通路,也可促进RAW 264.7细胞膜蛋白A类清道夫受体(SR-A)中SCARA3和Toll样受体中TLR4的表达。采用流式细胞仪对褐藻多糖硫酸酯作用后SR-A和TLR4的表达量进行蛋白水平的验证, SR-A和TLR4的表达量均有升高,证实了组学结果的可靠性。本研究结果为利用褐藻多糖硫酸酯开发具有免疫调节作用的功能食品或药物提供依据。     

褐藻多糖硫酸酯对脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞NO产生量的影响

慢性肾衰的进程中伴随着肾脏炎症的发生,研究表明褐藻多糖硫酸酯具有抗炎作用,且对于慢性肾衰的早期治疗具有一定的作用。本文通过脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导,建立大鼠肾小球系膜细胞的炎症模型,用来源于海带的高分子质量褐藻多糖硫酸酯F1和低分子质量褐藻多糖硫酸酯F2对细胞进行处理,24 h后MTT法检测各组细胞活力,Griess法检测24 h及48 h后细胞培养液中NO的含量。结果表明,各组间细胞活力无明显差异;脂多糖可以诱导大鼠肾小球系膜细胞NO产量增加,F1和F2均可在一定程度上抑制脂多糖诱导的NO产量的增加,从而减轻细胞炎症反应。剂量为25μg/m L的F1和F2处理细胞48 h后,与模型组相比,F1和F2组细胞培养液中NO含量分别下降22.52%和38.65%,低分子质量褐藻多糖硫酸酯抗炎效果明显高于高分子质量褐藻多糖硫酸酯。     

海洋硫酸多糖几种脱硫方法的比较研究

以κ-卡拉胶(硫酸基含量25.1％,分子质量83.1 kD)为原料,研究了二甲基亚砜-甲醇法(DMSO法)、三甲基氯硅烷法(CTMS法)以及苯并四甲酸-三氧化二锑法(PMA法)对其脱硫后多糖样品的得率、硫酸基含量及分子质量的影响.结果表明,κ-卡拉胶经三种方法脱硫后,样品得率分别为45.3％、50.6％和62.0％,脱硫率分别为42.2％、48.6％和82.8％,分子质量分别为15.7、22.3和4.75 kD.通过红外光谱和硫酸基含量分析表明,PMA法脱硫效果优于DMSO和CTMS法.PMA法不仅对κ-卡拉胶有效,而且适合于l-卡拉胶、λ-卡拉胶和岩藻聚糖硫酸酯的脱硫.     

HPLC法测定金杏感冒止咳颗粒中绿原酸含量的研究

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定绿原酸含量的方法,为药品出厂质量控制提供可靠数据支持。方法：采用Inertsil C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.4%磷酸溶液（10∶90）为流动相,检测波长为327nm,流速为1.0mL/min。结果：绿原酸进样量在0.1012μg～0.3542μg范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率为99.78%,RSD为0.08%。结论：高效液相色谱法简便、灵敏、稳定、准确,无其他成分干扰,可作为金杏感冒止咳颗粒质量控制的有效方法。     

海带废渣中提取岩藻聚糖硫酸酯的工艺研究

采用响应曲面分析法研究了氯化钙水提法从海带废渣中提取岩藻聚糖硫酸酯的制备技术.在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,通过建立数学模型对提取温度、提取时间、料液比等因素进行显著性和交互性分析研究,获得了最佳提取制备参数.结果表明,提取温度68℃,提取时间6h,料液比1:80时,可以获得3.95％的岩藻聚糖硫酸酯.其中岩藻糖含量为17.47％,硫酸根含量为37.14％.     

海洋硫酸多糖DPS对肾血管性高血压大鼠血清NO和血浆 Ang II及 ET-1含量的影响(英文)

采用肾血管性高血压大鼠模型 (两肾一夹型 )观察海洋硫酸多糖 DPS对肾血管性高血压大鼠血清中一氧化氮 (NO)和血浆中血管紧张素 II(Ang II)及内皮素 - 1(ET- 1)含量的影响。 DPS在肾血管性高血压大鼠造模第二天起分别以 12 .50 ,2 5.0 0 ,50 .0 0 mg/ kg口服预防给药五周 ,每日给药一次。于给药前、给药后第三周和第六周分别测定动脉血压和心率。实验结束前 ,从每只大鼠取血 6 m L ,用试剂盒测定血清中 NO的含量 ;用放射免疫法测定血浆中 Ang II和 ET- 1的含量。血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利 (14mg/ kg)作为本实验阳性对照药。结果 :DPS口服预防给药五周 ,可显著增加血清中 NO的含量和降低血浆中 ET- 1的含量 ,且呈剂量依赖性 ;DPS亦能降低血浆中 Ang II的含量 ,但未见剂量依赖性。结论 :海洋硫酸多糖 DPS对肾血管性高血压大鼠的降压作用机制可能与其促进体内 NO生成或释放、降低 AngII和 ET- 1的含量有关     

腹泻性贝毒的高效液相色谱法测定条件改进及其运用

对腹泻性贝毒的高效液相色谱测定方法的条件进行改变，使原来对实验条件要求苛刻的方法更适宜于一般的实验室使用，使其有可能替代国内目前常用的小鼠生物方法。井成功地运用于冬季大连海域贝类腹泻性贝毒的检测，首次报道了大连地区海域贝类腹泻性贝毒的主要成分大田软海绵酸的含量，其结果是2000年1—3月大连地区海域贝类腹泻性贝毒除个别海区外一般都末检出。     

两种氨基酸衍生化方法的比较研究

氨基酸的衍生化过程是气相色谱-燃烧-同位素比值质谱法(GC/C/IRMS)测定单体氨基酸碳稳定同位素组成方法中的关键步骤之一。采用了2种氨基酸衍生化方法分别对17种标准氨基酸进行衍生化处理：一种是氨基酸N-乙酰基正丙酯(NAP)法,另一种是氨基酸N-三氟乙酰基异丙酯(TFAIP)法。通过测量17种氨基酸衍生化前后的稳定碳同位素组成,比较了每种方法的重复性及衍生化过程中的同位素分馏作用的大小。结果说明氨基酸N-三氟乙酰基异丙酯(TFAIP)法是一种较为理想的氨基酸衍生化方法。     

HPLC方法分析表层海水叶绿素a含量

以ODS-2 Spherisorb C18反相HPLC分析柱,流动相A(体积比为80：20的甲醇,pH=7．2的0．5mol／L乙酸氨水溶液,0.01％BHT W：V)、流动相B(87．5：12．5的乙腈：水,0.01％BHT W：V)和流动相C(乙酸乙酯),梯度洗脱,流速为1mL／min,紫外检测波长为436nm,HPLC方法分析辽东湾表层海水中的叶绿素a含量。该方法灵敏度高,检测限为10ng／L。对HPLC、荧光法和分光光度法的叶绿素a分析结果进行了比较。     

高效液相色谱法测定海力特胶囊含量及体外溶出度

本文建立了测定海力特胶囊含量和体外溶出度的高效液相色谱方法。采用 Aminex HPX-87H(30 0 mm× 7.8mm)柱 ,以 0 .0 0 2 5 mol· L-1H2 SO4 为流动相 ,柱温为 6 5℃ ,流速为 0 .5 m L·min-1,以示差检测器检测 ,外标法峰面积定量。本法测定线性范围为 1μg～ 4 0μg,方法平均回收率为96 .1% ,RSD为 0 .83% (n=5 ) ,体外溶出度测定结果为 96 %～ 99%。本法测定海力特胶囊含量和溶出度 ,具有方法简便、快捷 ,重复性好的特点 ,可作为制剂质量控制方法。     

HPLC法同步检测鲤鱼、对虾中喹乙醇与MQCA残留

建立了一种高效液相色谱法同时检测鲤鱼、对虾肌肉组织中喹乙醇（OLA）及其代谢物3-甲基-喹啉-2-羧酸（MQCA）的残留。采用0.3 mol/L 盐酸提取鲤鱼、对虾中的残留物, C18 固相萃取柱净化, 氮气吹干及流动相定容后, Waters2695 高效液相色谱仪在320 nm（MQCA）和372 nm（QLA）双波...     

滨海湿地典型耐盐植物盐地碱蓬的HPLC化学指纹图谱

建立药用耐盐植物盐地碱蓬(Suaeda salsa)的HPLC指纹图谱。运用DAD-Agilent 1100高效液相色谱仪,色谱条件:Agilent Zorbax XDB C18柱(4.6 mm×250 mm;5.0μm)色谱柱,1.0 mL.min-1流速,320 nm检测波长,360 nm参比波长,10μL进样量,30℃柱温,乙腈(A)-0.1%磷酸水(B)梯度洗脱。建立了盐地碱蓬的HPLC指纹图谱,包含16个共有峰,指纹图谱特征明显,化学信息完整。方法的系统适应性测定结果符合指纹图谱的技术规范。结论:首次建立的盐地碱蓬HPLC参考指纹图谱可用于盐地碱蓬的快速真伪鉴别。     

反相色谱法测定调味品中过氧化苯甲酰及苯甲酸含量

调味品中含有过量的过氧化苯甲酰及苯甲酸,超出了食品添加标准,会对人体健康产生危害。研究运用反相色谱法对上述两种物质进行了定性、定量测定,两组分测定结果（１） 相关系数为Ｒ（１） ＝ ０ ．９９９５ ,浓度范围为１６６ ．７ｍｌ／Ｌ至３３３．３３ｍｇ／Ｌ之间;（２）Ｒ（２） ＝ ０．９９９７,浓度范围在１６６ ．７ｍｇ／Ｌ至３３３ ．３３ｍｇ／Ｌ之间,回收率分别为,（１）１００ ．００％ ,回收率（２）９９．９８ ％ ,测定方法迅速、准确。     

中性糖对古糖酯含量测定的影响

采用硫酸-苯酚法、硫酸-咔唑法和硫酸-间羟联苯3种方法分别对古糖酯的含量测定进行了研究，并考察了3种方法中加入8种单糖即阿拉伯糖(Ara)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、果糖(Fru)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)和岩藻糖(Fuc)后对古糖酯含量测定的影响。结果表明3种方法测定古糖酯含量时，其吸收值与古糖酯浓度(在0.1～0.5mg／mL范围内)都呈良好的线性关系，不同的中性糖对3种测定方法影响不同。样品回收率亦不相同。     

高效液相色谱法测量青海湖浮游植物色素浓度

2003年8月，我们利用高效液相色谱法(HPLC)对浮游植物色素进行分类定量分析。结果表明青海湖的叶绿素类以叶绿素a和b为主，叶绿素a浓度最高；光合作用类胡萝卜素种类极少，浓度很低；光保护色素种类较多，浓度较高，其中以Zea，Diadino，β．β-Car和Viola为主。     

甲壳胺寡糖的液相色谱及薄层层析分析

为了解低分子甲壳胺多糖的抗肿瘤辅助疗效,作者利用高效液相色谱法(HPLC)结合薄层色谱法(TLC),探讨了SUGAR-KS-802寡糖分析柱分析甲壳胺寡糖的条件,并尝试了几种薄层层析展开剂对甲壳胺寡糖组分的展层条件。结果表明,在HPLC流动相为0．001mol／L NaOH溶液,流速0．2mL／min时,可将混合的标准甲壳胺寡糖成分很好地分离;采用乙酸乙脂：甲醇：水：氨水=5：9：1：1．5混合液作为硅胶薄板展开剂时,可将不同聚合度的甲壳胺寡糖很好地分开,且层析重现性高,糖残基数目和Rf值具有很好的线性关系。2种分析方法结合可以作为1种可靠的甲壳胺寡糖分析方法。