丽文蛤血清中外源凝集素的凝集性能

丽丽文文蛤蛤（（ＭＭｅｅｒｒｅｅｔｔｒｒｉｉｘｘｌｌｕｕｓｓｏｏｒｒｉｉａａ））属属瓣瓣鳃鳃纲纲 ,,帘帘蛤蛤科科 ,,文文蛤蛤属属。。是是沿沿海海滩滩涂涂养养殖殖的的主主要要品品种种之之一一 ,,内内含含丰丰富富的的蛋蛋白白质质。。具具有有高高营营养养、、易易养养殖殖的的优优势势。。但但随随着着丽丽文文蛤蛤养养殖殖的的连连年年持持续续 ,,其其病病害害的的发发生生率率正正逐逐年年提提高高。。而而凝凝集集素素作作为为软软体体动动物物体体内内参参与与体体液液免免疫疫的的重重要要免免疫疫因因子子 ,,其其在在免免…     

甲壳动物血清中凝集素对微生物细胞的凝集性能

用12种甲壳动物血清凝集素提取液，对10种微生物细胞进行凝集试验，发现每种甲壳动物血清至少能凝集3种微生物细胞，酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞对凝集素反应最为敏感。7种甲壳动物血清凝集素对酿酒酵母细胞的凝集可被2种以上的糖所抑制，12种甲壳动物血清凝集素的温度和pH适应范围表现不一，但它们的凝集活性都被EDTA所抑制。     

绒螯蟹凝集素的红细胞凝集活性分析

利用血凝试验及糖抑制试验测定一种绒螯蟹的血清及肌肉提取液的凝血活性及糖抑制专一性,同时进行热稳定性、pH及Ca^2 影响试验。结果显示：血清只能凝集9种红细胞,肌肉提取液能凝集12种红细胞。血清对鹌鹁红细胞的凝集可被乳糖、D-甘露糖、D-果糖、D-半乳糖4种糖所抑制,最小抑制浓度均为200mmol／L,其凝集活性均依赖于Ca^2 ,在pH为6．0～7.0范围内较稳定,经50℃保温10min后活性完全消失。肌肉提取液只被D-甘露糖抑制,在pH为4．0～10．0、温度为4℃～90℃范围内均具活性,说明有很强的耐热性,其凝集活性不依赖于Ca。以上结果表明：血清与肌肉提取液均含有凝集素,且凝集素的种类不同。     

双壳贝类血清中凝集素凝集性能初步研究——对脊椎动物血细胞的凝集作用

在多种贝类血清中发现有可凝集脊椎动物血细胞的因子——凝集素。栉孔扇贝（Ｃｈｌａｍｙｓｆａｒｅｒｉ）血清中的凝集素可凝集鸡、鹌鹑、小鼠等多种动物血细胞,但对鳝鱼血细胞不发生作用。该凝集素具有较强的热稳定性,１００℃处理４５ｍｉｎ仍具活性;并具有广泛的ｐＨ范围,可在ｐＨ３～１１进行凝集作用。但其活性可被ＥＤＴＡ强烈抑制,Ｄ－甘露糖和Ｌ－鼠李糖对其活性有明显抑制作用,Ｄ－木糖和蕈糖也有轻微抑制作用。在栉孔扇贝血细胞的细胞膜上未发现有凝集鸡血细胞的活性物质。另外,用大肠杆菌和副溶血弧菌刺激栉孔扇贝后,血清的凝集作用不变。     

脊条褶虾蛄血清及肌肉提取液凝集活性的比较

利用血凝试验及糖抑制试验测定脊条褶虾蛄的血清及肌肉提取液的凝血活性及糖抑制专一性，同时进行热稳定性、pH及Ca^2 影响试验。结果显示：其血清能凝集12种红细胞，且其凝集效价高于肌肉提取液（兔、蛇、鲫鱼除外）。血清对鹌鹑红细胞的凝集可被D－果糖、D－半乳糖和蔗糖所抑制，最小抑制浓度均为200mmol/dm^3，其凝集活性均依赖于Ca^2 ，在pH值为5.0-9.0范围内较稳定，经40℃保温10min后活性完全消失；肌肉提取液不被7种糖抑制，在pH值为4.0-10.0、温度为40－90℃范围内均具活性，说明有很强的耐热性，其凝集性不依赖于Ca^2 。以上结果表明：脊条褶虾蛄血清与肌肉提取液均含有凝集素，且凝集素的种类不同。     

经酶修饰和未经酶修饰的鹌鹑红细胞对甲壳动物血清凝集素凝集活性的差异研究

为寻找凝集素作为分子探针提供基础资料,用12种甲壳动物血清抽提液对天然的或经酶修饰的鹌鹑红细胞进行凝集试验。实验结果表明,经蜗牛酶修饰后的鹌鹑红细胞的凝集作用发生了变化,与未经酶处理的鹌鹑红细胞相比,凝集活性提高的有日本沼虾（Macrobrachium nipponense）等7种,凝集活性下降的有罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergi）等2种。凝集素对动物红细胞的凝集可看作是与这些细胞表面的多糖或糖蛋白——即受体的识别性鲒合,这表明鹌鹑红细胞表面具有12种凝集素的受体,且大多数受体都受到酶修饰的影响,从而在凝集活性上表现出差异。     

草鱼血清中一种新的凝集素免疫因子

于1998年5月－2000年3月，在浙江省杭州市采集草鱼，采用硫酸铵盐析和梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，从血清中分离出一种自然凝集素，对其理化和生物学性质进行研究。结果表明，该凝集素能够识别和凝集多种不同的红细胞、细菌和酵母，具有100000g离心不沉降，不被透析，耐热、耐酸、耐碱，抗DNase、RNase、SDS和乙醚，对胰蛋白酶、糖苷酶、糖氧化剂NaIO4和β－巯基乙醇敏感等特性，是一种分子量为67kD、等电点为6．2的糖蛋白分子。其活性能被半乳糖、乳糖、甘露糖和N－乙酰葡糖胺所抑制，其抗原特异性不同于草鱼凝集集抗IgM，表明两者是不同的物质。草鱼凝集素显著地促进巨噬细胞的吞噬、杀菌能力，说明是一种重要的免疫活性因子。     

毛蚶(Arca subcrenata)体液来克丁的凝集作用

用甲状腺球蛋白琼脂糖４Ｂ亲和层析毛蚶（ Ａｒｃａ ｓｕｂｃｒｅｎａｔａ ）体液来克丁（ＡＳＬ）。试验了ＡＳＬ对９ 属３３ 株来自不同生境的细菌、安哥拉兔血细胞和人的Ａ,Ｂ,Ｏ 型血红细胞的凝集作用。结果表明ＡＳＬ对２４．２×１０－ ２的参试菌株具凝集活性（ＢＡ）。被凝者主要是来自南极及毛蚶和对虾体的细菌。对所试红细胞则显示了效价不一的凝集活动（ＨＡ）。ＡＳＬ的凝血活性受半乳糖、乳糖的一定抑制。文章讨论了ＡＳＬ在毛蚶的防御活动中可能起的作用。     

毛蚶的性腺发育和生殖周期

根据毛蚶性腺的组织学和外部形态特征，可将其性腺发育分为：增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期五个时期。根据肥满度的周年变化规律并结合性腺组织切片的观察结果，认为在连云港海区的毛蚶性腺发育为一年一个周期，排放期为7月至9月，繁殖盛期在7月中旬至8月中旬。毛蚶为分批产卵类型，集中排放需要满足一定的水温、盐度等理化因子的刺激。雌、雄性腺发育基本同步，雄性发育略快，雌雄比为1．2：1。     

两种微藻凝集素对几种不同类型细胞的凝集作用

经离子交换和分子筛层析从紫球藻（Porphyridium cruentum）和海水小球藻（Chlorella sp．）中分离纯化得到2种凝集素,研究它们对几种不同类型细胞即动物和人血红细胞、海洋和淡水微藻、细菌和真菌的凝集活性。研究结果表明,2种微藻凝集素对它们当中一些类型的细胞或种类具有不同程度的凝集活性,其中对水生聚胞藻（Synechocystis aquetilis）的凝集活性最强,最低质量浓度只需0．0313g／L。     

毛蚶血浆中抗菌蛋白的纯化及抗菌活性研究

采用硫酸铵分级盐析、Sephadex G-25柱脱盐和Bio—gel P-10柱层析等方法,从毛蚶(Scapharca subcrenata)血浆中分离纯化出了抗菌作用较强的蛋白组分。结果表明,该抗菌蛋白组分对供试革兰氏阳性细菌即金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)和四联微球菌(Micrococcus tetragenus)具有较强的抑菌活性,而对供试革兰氏阴性细菌即大肠杆菌(Escherichia coli)、普通变形菌(Proteus vulgaris)和副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)无抑菌活性;对供试真菌尖镰孢(Fusarium oxysporum)、细链格孢(Alternaria tenuis)、黑曲霉(Aspergillus niger)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的菌丝生长有一定的抑制作用,对柑桔青霉(Penicillium citrinum)和松球壳孢菌(Sphaeropsis sapinea)无抑菌作用。性质试验表明,该抗菌蛋白组分具有很好的热稳定性,120℃处理30min其抑菌活性仍保持85％以上,对胰蛋白酶和蛋白酶K不敏感。     

基于线粒体COI 基因的毛蚶群体遗传多样性

采用PCR技术,扩增了大连、乳山、烟台、舟山4个毛蚶(Scapharca subcrenata)地理群体共38个个体的线粒体COI基因部分序列,并分析了4个毛蚶群体的遗传多样性和系统发育关系。研究结果显示:38个毛蚶COI部分序列经处理得到长度均为625bp的基因片段,共分为30种单倍型;基于COI部分序列的分析结果,毛蚶4个地理群体总的变异位点为301个,多样性指数Pi为0.15048,平均核苷酸差异数为92.242,单倍型多样性指数S为241。聚类分析显示毛蚶大连群体、乳山群体和烟台群体具有高度的遗传多样性,3个群体交叉聚在一起,没有明显的群体分化;舟山群体单独聚为一支,与其他3个群体分化明显。研究表明,线粒体COI基因不能单独做为毛蚶大连、乳山和烟台群体的遗传标记,但可以作为毛蚶舟山群体的有效群体遗传标记,为线粒体COI基因在群体遗传学的应用提供了基础资料。     

Ficolin在毛蚶抗弧菌感染中的作用

Ficolin是一类含FBG结构域的蛋白,在动物免疫防御中发挥重要作用。无脊椎动物中,Ficolin主要作为模式识别受体和免疫效应分子发挥免疫功能。本研究从毛蚶中克隆获得一条Ficolin基因(命名为SsFic1),该基因编码区序列长度为897 bp,编码298个氨基酸,推测的蛋白含有典型的FBG结构域和Coiled coil结构域,但未发现胶原样结构域。SsFic1的mRNA在毛蚶各组织中广泛分布,其中在肝胰腺和鳃中表达丰度较高,但SsFic1转录产物在卵细胞和四细胞期未检测到,说明该基因不是母源性免疫基因。副溶血弧菌和脂多糖、葡聚糖等免疫刺激物均可诱导SsFic1显著上调表达。利用RNAi技术抑制SsFic1基因表达,酚氧化酶激活因子PAF和补体相关基因(C1qDC、补体C3和Fic3)的表达量及CAT、SOD和PO的酶活力均显著下降,而TEP、C1q2和Fic2等基因的表达显著上调。敲降SsFic1表达后,感染副溶血弧菌后毛蚶血细胞数量和吞噬能力均显著低于对照组,这也是RNAi实验组毛蚶死亡率和血细胞凋亡率显著升高的原因。综上,SsFic1可能通过调控补体通路和酚氧化酶原激活通路参与毛蚶免疫防御反应,这对贝类免疫学研究及抗病新品系的选育具有重要意义。     

凡纳滨对虾血清凝集素、溶血素的特性研究

对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的血清凝集素和溶血素部分特性的研究结果表明,凡纳滨对虾血清凝集素热稳定性较差,温度高于50℃时,活性呈明显减弱至无活性,其最适温度为25~45℃;最适pH为8~9;盐度为24~48时,凝集活性最强,当盐度超过48或者低于6时,凝集活性较差;凝集素活性能被浓度高于16 mmol/L(包括16 mmol/L)EDTA-Na2,D-葡萄糖,D-果糖及D-半乳糖完全抑制。Cu2 使凝集素的活性完全丧失,而Ca2 和Mg2 能使凝集活性明显增强。45~60℃时,溶血素活性逐渐增强,60℃时达到最高;当pH 6~9时,溶血素的活性较强;盐度为18~36时,能增强溶血素的活性;EDTA-Na2对溶血素的活性几乎无影响;Cu2 使溶血素丧失活性,Mg2 能增强溶血活性,Mn2 对溶血素的活性没有影响,而Ca2 和Ba2 对溶血素有轻微的抑制作用。     

不同贝龄毛蚶壳形态性状对体质量的影响

选取毛蚶(Scapharca subcrenata Lischke)1龄、2龄和3龄个体各100粒,分别测量壳长、壳高和壳宽等壳形态性状,并称其体质量,采用多元分析的方法分析了各表型性状间的相关性,以及壳形态性状对体质量的影响效果。结果表明,各性状间呈正相关,且达到极显著水平(P0.001);通径分析与决定程度分析的结果相似,不同贝龄期影响毛蚶体质量的主要因素是不同的,壳长是影响1龄毛蚶体质量的主要因素,壳长和壳宽是影响2龄毛蚶体质量的主要因素,且两者的共同决定系数最大(0.244),壳宽是影响3龄毛蚶体质量的主要因素,其与壳高的共同决定系数最大(0.230)。     

小黑山岛潮下水生层生境适宜性分析-以毛蚶为例

以小黑山岛潮下水生层为研究区域,利用生境适宜性指数（habitat suitability index,HSI）模型,同时结合GIS空间分析,选划出适宜毛蚶的增殖修复区域。综合文献查阅和咨询专家咨询的方式,确定影响毛蚶生存的7个重要影响因子,分别为：底质类型,水温,盐度,溶解氧,水深,pH和氨氮。结合专家赋值法和层次分析法确定每个评价因子的权重,利用GIS空间分析模块将现状调查数据进行插值、重分类和栅格计算,绘制研究区域目标种群生境适宜性地图。结果表明：对于刺参和紫贻贝,研究区域均适宜其生长繁殖,同一物种,相同季节在空间上无站位差异,但各季节的生境适宜性分区变化明显;对于魁蚶来说,东北部海域较适宜增殖,其次为西部海域,四季均以较适宜生境为主,仅冬季出现基本适宜生境。水温是造成季节差异的主要因素,底质类型则是引起生境站位差异的重要原因。可为后续的生物多样性保育和生态修复提供基础资料参考。     

不同附着基对毛蚶幼虫附着变态影响的研究

研究对比了5种不同类型的附着基对毛蚶(Scapharca subcrenata)幼虫附着变态的影响。研究发现,聚乙烯网片、红棕帘、波纹板附着基的附苗量显著优于尼龙窗纱和棉布附着基。竖直放置的附着基上附苗量优于水平放置,竖直放置的附着基上、中、下三层苗种附着量也有显著差异,下层苗种附着量显著优于上层和中层。此外,通过比较三种不同颜色的附着基上毛蚶幼虫的附着量,表明深颜色的聚乙烯网片(黑色)较浅颜色的网片(绿色和白色)吸引更多的幼虫附着。因此,在生产过程中通过使用深颜色的聚乙烯网片,并将其放置于水体的中下部将会提高幼虫的附着量,从而获得稳定高效的育苗效果。     

大港原油对毛蚶部分抗氧化酶和代谢酶的影响研究

为研究港原油对毛蚶部分抗氧化酶和代谢酶的影响,设置0.01、0.1、1、3mg/L大港原油水溶液性成分(WSF),采用暴露法研究毛蚶天津群体的鳃、斧足中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)抗氧化酶等抗氧化酶及酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、钠/钾泵(Na⁺/K⁺ATPase)、钙泵(Ga²⁺/Mg²⁺ATPase)等代谢相关酶的活性变化,测定丙二醛(MDA)含量,采用整合生物标志物(Integratedbiomarkerresponse,IBR)进行分析。结果表明,毛蚶鳃和斧足中SOD、CAT、GPX表现出一定的剂量-效应关系, MDA含量呈先升高后降低的趋势, 3 mg/L组表现出MDA累积; ACP、AKP、Na⁺/K⁺ATPase、Ga²⁺/Mg²⁺ATPase表现出一定剂量-效应关系,酸性磷酸酶较碱性磷酸酶响应更迅速, Na⁺/K<...     

魁蚶雌核发育的人工诱导

研究了魁蚶（Scapharca broughtonii）雌核发育的人工诱导条件。用强度为2561uw／（cm2．s）的紫外线（254nm）照射不同时间的精子与正常卵子受精,发现随照射时间的增加,卵裂率、早期胚胎存活率和D形幼虫发生率总体呈下降趋势,遗传失活的精子与正常卵子受精后其胚胎发育至D形幼虫前期停止。经紫外线照射...     

SsC1qDC基因在毛蚶免疫防御中的作用

含C1q结构域蛋白(C1qDCs)在无脊椎动物免疫应答中发挥重要作用,但目前有关毛蚶(Scapharca subcrenata)C1qDCs免疫功能的研究鲜有报道。本研究从毛蚶中鉴定出一个含有典型C1q结构域的基因(命名为SsC1qDC),并分析了其对主要病原感染的响应特征。SsC1qDC的cDNA全长序列为711bp,编码含有N端信号肽和199个氨基酸的蛋白,系统进化分析显示SsC1qDC与双壳贝类的C1qDCs聚在一起。SsC1qDC在毛蚶卵细胞到眼点幼虫时期的表达量随发育阶段显著增加,且该基因在成体毛蚶各组织中均有表达,其中在肝胰腺和闭壳肌中表达水平较高。副溶血弧菌刺激可显著诱导SsC1qDC基因高表达,敲降SsC1qDC基因表达后毛蚶死亡率和血细胞凋亡水平显著升高,且导致毛蚶血细胞总数和吞噬活力显著下降。同时,敲降SsC1qDC基因的表达可显著抑制母源免疫相关基因Vg、LSZ、Dscam、TEP和SsC1qDC-3的表达,而C3、PAF3、SsC1qDC-1和SsC1qDC-2等基因的表达显著上调。本研究结果表明, SsC1qDC在毛蚶抗弧菌响应中发挥重要作用,对贝类免疫学和抗...