长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究（II）

用化学修饰剂ｐＣＭＢ、ＮＢＳ、Ｋ试剂修饰长毛对虾Ｐｅｎａｅｕｓ ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔｕｓ Ａｌｃｏｃｋ酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ，ＥＣ３．１．３．２），在修饰剂作用下，酶活力明显下降，健康虾酶对修饰剂的敏感性（ＮＢＳ除外）大都在于病虾酶。修饰酶的紫外２８０ｎｍ吸收光谱以及荧光３４０ｎｍ发射光谱的变化，表明酶活力下降的同时酶构象也产生相应的变化。结果表明，酶分子的半胱氨酸残基、色氨酸残基以及门冬氨酸、     

长毛对虾酸性磷酸酶功能基因的研究（I）

采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾酸性磷酸酶的活性功能基因。结果表明，精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团，当酶活力下降时，伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化，显示酶活力与构象密切相关。健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。     

金属离子对长毛对虾酸性磷酸酶的影响

本文研究几种金属离子分别对健康虾和病虾酸性磷酸酶ＡＣＰａｓｅ（ＥＣ３．１．３．２）活性的影响。结果表明,Ｎｉ＾２＋、Ｍｇ＾２＋、Ｃｄ＾２＋对酶无明显抑制作用,Ｚｎ＾２＋、Ｃｕ＾２＋、Ｈｇ＾２＋对酶活力抑制明显。当Ｈｇ＾２＋离子浓度达０．５ｍｍｏｌ／ｄｍ＾２时,酶活力被抑制９６％和９５％;各金属离子对酶的抑制强度依次为Ｈｇ＾２＋〉Ｃｕ＾２＋〉Ｚｎ＾２＋〉Ｐｂ＾２＋〉Ｃｄ＾２＋、Ｍｇ＾２＋〉Ｎｉ＾２＋     

长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅰ)

采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾（Penaeuspenicillatus）酸性磷酸酶的活性功能基团。结果表明，精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团，当酶活力下降时，伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化，显示酶活力与构系密切相关健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。     

长毛对虾酸性磷酸酶功能基团的研究(Ⅱ)

用化学修饰剂pCMB、NBS、K试剂修饰长毛对虾Penaeuspenicilla－tusAlcock酸性磷酸酶（ACPase，EC3．1．3．2），在修饰剂作用下，酶活力明显下降，健康虾酶对修饰剂的敏感性（NBS除外）大都稍大于病虾酶。修饰酶的紫外280um吸收光谱以及荧光340um发射光谱的变化，表明酶活力下降的同时酶构象也产生相应的变化。结果表明，酶分子的半胱氨酸残基、色氨酸残基以及门冬氨酸、谷氨酸β或γ验基与酶活力有关，是酶的催化功能基团。     

中国两性生殖卤虫各品系碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法 ,对中国两性生殖卤虫 Artemia sinica的 1 4个品系的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征进行了分析 ,并与 Artemia urmiana的碱性磷酸酶、酸性磷酸酶同工酶基因的表达特征进行了比较研究。结果表明 :中国两性生殖卤虫各品系的 ALP、 ACP同工酶的酶谱相同 ,均为单体酶。 ALP、 ACP同工酶分别由 ALP - 1、 ACP- 1 ,ALP- 2、ACP- 2 ,ALP- 3、ACP- 3三个基因座位编码 ,ALP- 1、ACP- 1座位存在a、 b两个共显性等位基因 ,ALP- 2、ACP- 2存在 a、b、c三个等位基因 ,ALP- 3、ACP- 3座位存在 a、b两个等位基因。共发现 7种基因型 :1 .0 / cc/ bb,2 .0 / bb/ bb,3.0 / aa/ aa,4.0 /ab/ aa,5.0 / ac/ ab,6.0 / ac/ aa,7.ab/ ab/ aa。仅在 A.urmiana中发现 0 / cc/ bb、 0 / bb/ bb基因型 ,而 A.sinica的主要基因型为 :0 / ac/ aa、 0 / ab/ aa、 0 / aa/ aa。仅 GN品系的 ALP - 1、 ACP- 1有基因座位表达。     

乙二醇对长毛对虾酸性磷酸酶活力与构象的影响

应用荧光光谱、紫外差示光谱及园二色性光谱等生物物理技术研究长毛对虾酸性磷酸酶经乙二醇微扰后的分子构象变化情况,结果表明乙二醇对酶分子构象有显著的影响。酶的内源荧光强度随乙二醇浓度增大而增强,Ｔｙｒ、Ｔｒｐ残基的微环境发生明显的变化;紫外差示光谱在２２０和２７５ｎｍ出现２个负峰,而２３６ｎｍ出现正峰,２２０和２３６ｎｍ的差吸收与酶分子主链去折叠有关,而２７５ｎｍ主要与Ｔｒｐ残在微环境变化有关;乙二醇     

免疫多糖对栉孔扇贝酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的影响

在栉孔扇贝的血清、血细胞和肝脏提取液中均发现有酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性,其中,ＡＣＰ和ＡＬＰ在肝脏中的活性最高。采用１．０％的虫草多糖或海藻多糖作为免疫药物,对栉孔扇贝进行注射刺激后,发现血清中的ＡＣＰ、ＡＬＰ和ＳＯＤ活性有显著提高,血细胞中的ＡＣＰ和ＳＯＤ活性也有所增加,而肝脏提取液的这三种酶活性的变化不很明显。研究认为这两种多糖具有增强栉孔扇贝免疫活性的作用,在水产养殖业中有一定的开发价值。     

中国对虾血细胞酶细胞化学的初步研究

运用电镜酶细胞化学技术 ,对中国对虾 (Penaeus chinensis)的血细胞和血清中的酚氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和过氧化物酶的酶活性部位进行标记。实验结果显示 :酚氧化酶主要以酶原形式存在于大颗粒细胞的颗粒体中 ,酸性磷酸酶和碱性磷酸酶以酶原形式存在于小颗粒细胞的颗粒体中。健康虾和患病虾血细胞中酶活性的表现形式不尽相同 ,在病理情况下 ,颗粒细胞能以细胞解体的方式 ,排出细胞内的颗粒 ,转化成有活性的酶 ,以此提高血淋巴中这几种酶的活性。透明细胞可以吞噬排放颗粒后的颗粒细胞 ,透明细胞中由高尔基体合成的酸性磷酸酶等溶酶体酶主要用于透明细胞的细胞内消化作用。研究认为 :3种血细胞因含有不同的免疫酶以及酶的作用方式不同而具有不同的免疫功能     

免疫多糖对中国对虾血清溶菌酶、磷酸酶和过氧化物酶的作用

于１９９７年９月在青岛红鸟养殖场采集中国对虾,给对虾腹腔注射不同剂量的海藻多糖和北虫草我糖后,用生化法测定其血清中的溶菌酶,碱性磷酸酶,酸性磷酸酶和过氧化物酶活性的动力学变化。结果表明,注射１．０％北虫草多糖及１．０％海藻多糖４８ｈ后,对虾血清中的ＬＳＺ活性由对照组的０．２５Ｕ／ｍｌ分别增至０．８８Ｕ／ｍｌ和０．７５Ｕ／ｍｌＰＯＤ活性由对照组的０．１１Ｕ／ｍｇ分别增至２．２Ｕ／ｍｇ和１．９６Ｕ／ｍ     

中国对虾(Penaeus chinensis)四倍体诱导研究

利用光控和行为学原理,控制中国对虾在适当时候产卵,在一定的时刻以温度休克和细胞松弛素的方法诱导受精卵发育成为四倍体。作者发展了对虾染色体制备技术,以中肠和触角腺、精巢为材料,从后期幼体直到8～9cm左右次成虾均获得较好的分裂中相。染色体倍性检测结果表明,最好的四倍体诱导成功率达66.7％。共获得10cm左右的实验对虾几千尾。初步观察表明,四倍体中国对虾具有一定的生长优势。     

中国对虾血淋巴中的抗菌、溶菌活力与酚氧化酶活力的测定及其特性研究

以海捕中国对虾亲虾为材料，对其血淋巴中的抗菌、溶菌活力及酚氧化酶活力进行测定，并研究经注射大肠杆菌、海洋弧 菌及酵母聚糖等糖等刺激物以后，其活性的变化规律等。结果表明，适当的免疫刺激可提高对虾自身的抗病能力、为免疫药物的研究制造等提供依据。     

中国对虾微卫星DNA的筛选

于2000年2月以中国科学院海洋研究所水族楼暂养的中国虾对材料，采用常规方法从尾部肌肉中提取DNA，构建小片段部分基因组文章，采用人工设计合成的（CT）7，（AT）7重复征段作引物，利用RCR法对中国对虾小片段部分基因组文库进行筛,一实验首冼 对中国对虾中获得31个微卫星序列，分别分析于18个阳性重组克隆中，其中perfect共23个，占74％，imperfect2个，占7％，compound perfect1个，占3％，compound imperfect5个，占16％，结果还表明，在中国对虾基因组DNA中，（CT）n,(AT)n)形式的微卫星序列的含量非常丰富。     

中国对虾雌虾的心率及有关影响因素的研究

１９９６年４月初在青岛近海捕成熟中国对虾雌虾,观察其在产卵期间的心率变化以及惊扰、温度、光照等条件对其心率的影响。结果表明,成熟雌虾的心率在静态时约为３８－７５次／ｍｉｎ,且与温度呈正相关;在受到惊扰时,心率急剧升至为静态水平的１．５倍,约３０ｍｉｎ后回落到静态水平,产有２－４ｈ,雌虾心率开始逐渐升高,产卵时达到１３０－１５０次／ｍｉｎ,约为静态心率的２－３倍,产卵后２－４ｈ回落到静态水平,光心率     

饵料添加包膜维生素C和维生素C磷酸酯镁对中国对虾幼体的影响

于１９９６年４－５月,在山东即墨市田横镇对虾育苗场,以包膜维生素Ｃ和维生素Ｃ磷酸酯镁两种类型的维生素Ｃ添加饵料饲喂中国对虾蚤状幼体和糠虾幼体,以便研究在饵料中添加不同类型的维生素Ｃ对中国对虾早期幼体生长与存活的影响以及适宜的添加量。结果表明,添加包膜维生素Ｃ饲喂蚤状幼体的效果优于维生素Ｃ磷酸酯镁,其最适添加量为２ｍｇ／ｇ饵料;添加维生素Ｃ磷酸酯镁饲喂糠虾幼体的效果优于包膜维生素Ｃ,添加量为１－５ｍ     

甜菜渣对中国对虾消化酶的影响研究

于１９９６年１０月在中国科学院海洋研究所选取人工养殖中国对虾（平均体长９．０２ｃｍ），以双缩脲法测定消化器官的蛋白含量；福林一酚试剂法测定蛋白酶活力；Ｓｏｍｏｇｙｉ比色法糖法测定淀粉酶和纤维素酶活力，同时研究中国对虾配合饵料中添加１０％的甜菜渣或１０％经不同方法处理的甜菜渣时，对消化器官蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶活力变化的影响。结果表明，在饵料中添加１０％甜菜渣 经不同方法处理的甜菜渣饲喂中国对虾，     

中国对虾血淋巴蛋白质、葡萄糖含量的研究

于１９９２－１９９３年５月和１０月，在胶州湾捕捞中国对虾亲虾，９月在莱州和胶南采集的人工养殖中国对虾，采用双缩脲法测定其血淋巴中的血清总蛋白含量，用０－ＴＢ法测定血清葡萄糖含量，并研究注射灭菌海水、海洋弧菌后，对中国对虾血清总蛋白含量和血清葡萄糖含量的影响规律。     

中国对虾育苗期球形病毒的感染及垂直传播途径的初步探讨

１９９４－１９９５年山东文登市高岛盐厂对虾育苗池和养虾池,随机和定点采集中国对虾的卵,无节幼体,蚤状幼体,糠虾幼体,仔虾及幼虾,成虾样品,利用透射电子显微镜对其进行病毒的检测。结果表明,卵细胞中含有大量的卵黄,没有明显的细胞分化,卵细胞质中有球形病毒感染;无节幼体的肝胰腺和上皮细胞的分化程度较低,有大量球形病毒分布;糠虾幼体已有明显的肝胰腺和上皮细胞的分化,肝胰腺上皮细胞的胞质中发现有球形病毒包涵     

中国对虾血细胞及其免疫研究

于１９９１年３月－１９９２年４月青岛近海及一养虾场捕集中国对虾亲虾和越冬亲虾，以扫描电镜和透射电镜观察中国虾的血细胞形态及其亚显微结构；研究定量测定细胞吞噬活性的方法。结果表明，中国对虾血细胞分３种：无颗粒细胞，呈球形或梭形，胞质不含颗粒粒；小颗粒细胞及颗粒细胞，卵球形或椭球球形，胞质含有电子致密颗粒，颗粒可分均匀、非均匀的；小颗粒细胞质富含线粒体，可能与它对异物敏感易发生胞吐作用有关，该细胞是识     

中国对虾复合疫苗的初步研究

于１９９６年１１月－１９９７年５月,运用差异离心,蔗糖梯度离心、柱层析等方法从发病中国对虾分离出杆状病毒并纯化;分别用冷乙酸处理法、十二烷基硫酸钠－苯酚法提取纯化该病毒的结构蛋白与核酸、λＤＮＡ;分别用十二烷基硫酸钠煮沸法、三氯乙酸法纯化孤菌的肽菊聚糖和鸡卵粘蛋白;配制出小牛血清白蛋白、蜗牛凝集素两溶液。然后从超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力和溶菌活力两种免疫指标分析灭活病毒和以上提取、纯化的７种大分