健脾消癌方对人结肠癌细胞中Wnt信号分子β-catenin、Axin及靶基因MMP-7、CD44的影响

目的：观察健脾消癌方对Wnt信号分子β-连环蛋白（β-catenin）、Axin及靶基因基质金属蛋白酶-7（MMP-7）、CD44的影响,探讨其抗结直肠癌复发转移的作用机制。方法：将对数生长期的HCT116细胞分为空白组,0.9%氯化钠注射液组,5-Fu组及健脾消癌方低、中、高剂量组,分别干预48h后,收集细胞,PCR检测β-catenin、Axin及MMP-7、CD44表达。结果：健脾消癌方含药血清可以降低人结肠癌HCT116细胞中β-catenin mRNA表达水平,上调Axin mRNA表达水平,明显抑制MMP-7 mRNA及CD44 mRNA的表达。结论：健脾消癌方抗结直肠癌转移侵袭的药理作用可能与其下调Wnt/β-catenin信号通路的信号分子β-catenin及上调Axin的表达水平并有效降低靶基因MMP-7、CD44的表达水平有关,这可能是健脾消癌方抗结直肠癌复发转移的重要分子机制之一。     

益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松大鼠骨组织Wnt/β-catenin通路的影响

目的：探讨益肾健骨颗粒对绝经后骨质疏松（PMO）大鼠骨组织Wnt通路LRP5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达的影响。方法：将40只大鼠随机分为假手术组、模型组、实验组、阳性对照组,每组各10只。假手术组摘除卵巢周围少量脂肪组织,其余组均切除双侧卵巢以建立PMO模型。12周后测定大鼠双侧股骨骨密度以及骨质疏松骨组织LRP5、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平。结果：与假手术组比较,其余3组骨密度值均下降（P＜0.05）,说明造模成功;与模型组比较,实验组、阳性对照组骨密度值和LRP5、Wnt3a、β-catenin的蛋白表达水平均升高（P＜0.05）。结论：益肾健骨颗粒通过Wnt信号通路促进去卵巢大鼠成骨细胞增殖而改善PMO,效果明显。     

边天羽运用经方治疗皮肌炎的临床经验撷要

介绍边天羽教授治疗皮肌炎的临床经验。边教授认为皮肌炎与中医学中的“肌痹”和“痿证”颇为相似,从整体辨证论治,认为脾胃功能障碍是皮肌炎的核心病机,吸取“治痿独取阳明”的经验,采用甘麦大枣汤治疗。急性期合用小柴胡汤治疗,恢复期合用十全大补丸、健步丸治疗,取得了显著的疗效。     

咳喘宁对RSV诱发哮喘豚鼠GSK-3β和β-catenin信号通路表达的影响

目的：探讨咳喘宁防治呼吸道合胞病毒（RSV）诱发支气管哮喘的作用机制。方法：将60只2月龄豚鼠（雌雄各半）随机分为空白对照组,咳喘宁低、中、高剂量组,西药组,每组各10只（雌雄各半）。用RSV悬液滴鼻吸入后,卵清蛋白雾化豚鼠诱发哮喘模型,以地塞米松联合利巴韦林为阳性对照药,观察咳喘宁低、中、高剂量干预后糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、β-连环蛋白（β-catenin）的蛋白表达情况。结果：在RSV诱发的哮喘豚鼠肺组织中,与空白对照组比较,模型组肺组织中GSK-3β表达明显减少,β-catenin蛋白表达明显增加,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组比较,咳喘宁低、中、高剂量组及西药组豚鼠肺组织中GSK-3β表达增加,β-catenin表达减少,差异具有统计学意义（P＜P＜0.05）;西药组与咳喘宁低、中、高剂量组各项指标比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：咳喘宁对RSV诱导的哮喘豚鼠具有抑制作用,其机制可能与WNT/β-catenin信号通路有关。     

王彦巧用增味五痹汤治疗缓慢性心律失常经验

介绍王彦主任医师巧用增味五痹汤治疗缓慢性心律失常的经验。王师认为本病病位以心肾为主,病机总属本虚标实、虚实夹杂,临床尤以虚证为主,实证较少。本虚表现为心阳不足、气阴两虚、心肾阳虚等气血阴阳亏损而无以濡养心脉;标实表现为痰浊、血瘀、水饮等实邪痹阻心脉。其提出以通痹为治疗之轴,行温补心肾、活血通络之法,并根据患者实际情况从虚证、实证、虚实夹杂证辨治,巧用增味五痹汤为主方加减化裁,取得显著疗效。     

仇湘中从肝论治肩关节周围炎经验

介绍仇湘中教授从肝论治肩关节周围炎的经验。仇教授认为肩关节周围炎病位在肩,为本虚标实之疾,其病机主要以肝血不足,肝肾虚损为本,风寒湿邪痹阻经络为标,治以补肝养血、调补肝肾、祛风散寒除湿为法,结合具体病证特点,辨证选用补肝舒筋汤、柔筋壮骨汤、蠲痹汤加减,疗效显著。附验案1则,以资佐证。     

董克芳治疗膝骨关节炎经验

介绍董克芳教授治疗膝骨关节炎（KOA）的经验。董教授认为KOA病机为本虚标实,以肝肾亏虚为本,风寒湿邪侵袭、痰瘀痹阻经络为标,针对本病病机,董教授立培补肝肾为治疗大法,治疗上遵循分期论治、内外同治、筋骨并重、中西医结合、预防为主的法则,取得了较好的临床效果。并附验案1则,以资佐证。     

吴官保治疗项痹经验

介绍吴官保教授辨治项痹的经验。吴教授认为,项痹多因肾虚血瘀、肝失疏泄、脾虚湿阻、体虚外感相兼为病,其关键在于脏腑本虚、筋骨失养,病理因素包括毒热和瘀血,病机总属本虚标实,“虚、毒、瘀”合而为病。吴教授主张治疗项痹应中西医结合,其从督脉和肾、肝、脾三脏入手,升督补肾、疏肝健脾、壮脊通络,同时不忘清热解毒、活血化瘀,以消除两大病理因素,从而达到标本同治的目的。并附验案1则,以资佐证。     

肖长江运用理脾祛瘀法治疗胸痹心痛经验

介绍肖长江教授运用理脾祛瘀法治疗胸痹心痛临床经验。肖教授认为,胸痹心痛多与饮食不当、作息不规律、情志不舒等因素有关,病机为诸因损脾、脾虚致痹,病性为本虚标实,脾胃为发病中枢环节,治疗主张心病从脾论治,首当健运脾胃,次当行气化湿醒脾,兼以活血祛瘀,方用理脾祛瘀通络汤随症加减,临床疗效颇佳。并附验案1则,以资佐证。     

刘华从肺痿论治老年晚期肺鳞癌经验

介绍刘华教授从肺痿论治老年晚期肺鳞癌的经验。刘教授继承仲景之学术思想,结合临床之经验,认为老年晚期肺鳞癌与肺痿在临床症状、病理形态、病因病机方面颇为相似。刘教授认为,老年晚期肺鳞癌即为仲景所述之“虚热肺痿”,老年患者气阴本虚,又受烟毒久扰,肺之气阴亏虚为其本,痰凝、血瘀、毒结为其标,虚实夹杂,遂成癌瘤,肺痿不用。其从肺痿论治老年晚期肺鳞癌,补虚专主肺脾肾,攻伐不外痰瘀毒。临床用药攻补襄赞,润肺燥,生胃津,健中州,滋肾水,以蓄养气阴;开痰积,行瘀血,解癌毒,起辅弼之功,获效显著。并附验案1则,以资佐证。     

益气活血化痰法对动脉粥样硬化大鼠NF-κB信号通路影响的实验研究

目的：通过观察益气活血化痰法对动脉粥样硬化（AS）模型大鼠核因子κB（NF-κB）信号通路表达的影响,阐明护心康片抗动脉粥样硬化的部分作用机制。方法：采用注射大剂量维生素D3注射液及喂养高脂饲料法制备大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为护心康片高、中、低（1.64g/kg、0.82g/kg、0.41g/kg）剂量组,阳性对照组（阿托伐他汀钙片,2mg/kg）,模型组（蒸馏水,10ml/kg）和空白组。治疗12周后处死,采用双抗体夹心酶联免疫分析法（ELISA）检测血清炎症因子白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的表达水平;取动脉组织采用蛋白免疫印记法（Western blotting）检测NF-κB信号通路的蛋白表达量,用图像分析系统分析其灰度值,以目的蛋白与β-acting内参蛋白的比值来表示组织蛋白中NF-κB的表达量。结果：与模型组比较,护心康片中、高剂量组及阳性对照组的血清内炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平与NF-κB信号通路蛋白的表达水平均显著降低（P<0.01）。结论：益气活血化痰法通过下调NF-κB信号通路蛋白的表达水平,阻断该信号通路的活化,从而抑制模型大鼠炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的释放,达到抗动脉粥样硬化的作用。     

基于网络药理学与体外细胞实验探讨复方清痹片治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的：基于网络药理学与体外细胞实验探讨复方清痹片治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机制。方法：基于TCMID、TCMSP和DrugBank数据库筛选复方清痹片的活性成分并预测潜在活性成分靶点;基于GeneCard、OMIM等数据库筛选RA疾病靶点;明确复方清痹片活性成分与RA的共同潜在靶标;利用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,并通过DAVID数据库进行基因本体（GO）功能及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,RT-PCR检测复方清痹片对肿瘤坏死因子（TNF-α）诱导的人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞（HFLS-RA）模型白介素6（IL-6）、TNF-α、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1（AKT1）和血管内皮生长因子A（VEGFA）mRNA表达的影响。结果：筛选出217种潜在活性成分以及158个潜在靶点;IL-6、TNF、AKT1、白蛋白（ALB）、VEGFA等是复方清痹片治疗RA的关键靶点;复方清痹片主要通过炎性因子、趋化因子、免疫调控等信号通路来发挥治疗RA的作用。复方清痹片能够抑制HFLS-RA增殖,下调IL-6、TNF、AKT1和VEGFA mRNA的表达,这与网络药理学预测的结果相一致。结论：本研究揭示了复方清痹片治疗RA“活性成分-靶点-通路”的复杂关系,为后续该药的临床应用提供了研究基础。     

冷文飞应用四步联合疗法治疗膝骨关节炎经验

介绍冷文飞教授治疗膝骨关节炎(KOA)的经验。冷教授认为本病以肝脾肾亏损为内因,风寒湿侵袭为外因;病机属本虚标实,以肝血不足、脾气虚弱、肾元亏虚为本,外邪侵袭、痰瘀内阻为标,以致筋骨不坚、骨失所养、经脉痹阻。其临床采用内外合治的四步联合法,由关节腔灌洗、正清风痛宁关节腔注射,配合小针刀局部松解、中药热敷四步组成,治疗KOA可通痹止痛,改善膝关节功能,延缓病情进展。     

胡学军从痰瘀论治晚期慢性阻塞性肺疾病经验

介绍胡学军教授运用加味桂枝茯苓丸从痰瘀论治晚期慢性阻塞性肺疾病的经验。慢性阻塞性肺疾病是常见的呼吸系统疾病,胡教授总结多年临床经验,认为该病晚期病机多为本虚标实,本虚先为肺气虚,渐及脾肾心诸脏,标实多为痰瘀互结,故胡教授从痰瘀论治,拟方加味桂枝茯苓丸治疗,临床疗效显著。     

利用大肠杆菌表达系统制备具有O-GlcNAc修饰的p120ctn蛋白的研究

p120-连环蛋白(p120-catenin,p120ctn)是一个多功能蛋白,其在E-钙黏蛋白(E-cadherin)粘附复合体形成、Rho GTP酶信号通路和基因转录调节等过程中发挥重要作用。前期研究发现p120ctn蛋白具有O-连接的β-N-乙酰葡糖胺(Olinked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰,然而O-GlcNAc修饰对于p120ctn功能的调节作用及其机制还未阐明。本研究中构建了p120ctn的重组表达质粒,并将其与O-GlcNAc糖基转移酶(O-GlcNAc transferase,OGT)的表达质粒共同转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中。利用该菌株,实现了将p120ctn蛋白与OGT蛋白在大肠杆菌中共表达。通过免疫印迹检测发现与OGT蛋白共表达的p120ctn蛋白具有O-GlcNAc修饰。具有O-GlcNAc修饰的p120ctn蛋白的获得为后续在体外实验中对O-GlcNAc修饰调节p120ctn的作用和机制的深入研究奠定了基础。     

焦安钦治疗糖尿病肾病经验

介绍焦安钦教授治疗糖尿病肾病的经验。焦教授认为,糖尿病肾病证属本虚标实,本虚以肺脾肾三脏之气虚、阳虚、阴虚为主,标实以痰、瘀、湿、热为主,其病机核心为肾虚、血脉涩滞、瘀血痹阻。焦教授主张通过整体辨证结合临床及病理分期论治该病,治以补虚泄实,并随症调整虚实侧重,注重补肾祛瘀,以益气、温阳通阳、滋阴、祛痰、化湿、化瘀通络、清热为具体治则。     

牛春兰从浊毒论治慢性肾衰竭经验

介绍牛春兰教授从浊毒论治慢性肾衰竭的经验。牛教授认为,慢性肾衰竭属本虚标实之证,肾虚为本,水湿、湿浊、湿热、瘀血、溺毒等为标,虚实互为因果,夹杂致病。水湿、湿热、瘀血等标实之邪均属“浊毒”之邪,主要指内浊、内毒,基本病机是脾肾气阴亏虚、浊毒内蕴。临床治疗强调辨病与辨证相结合、依疾病分期论治,采用芳香化浊解毒及升清降浊法、通腑泄浊解毒法、淡渗利湿解毒法、通络化瘀解毒法、发汗散浊排毒法、清热化湿解毒法等,并附验案1则,以资佐证。     

基于网络药理学和分子对接探析养心活血通脉汤治疗稳定性冠心病的作用机制

目的：运用网络药理学和分子对接技术探析养心活血通脉汤治疗稳定性冠心病的作用机制。方法：应用TCMSP、Herb、TCMID平台检索养心活血通脉汤成分及作用靶点;经GeneCards、OMIM、DisGeNET平台获取稳定性冠心病靶点;运用Cytoscape 3.9.1建立“药物-活性成分-靶点”网络及蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,筛选核心靶点。由Metascape平台进行基因本体（GO）功能和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。利用Auto Dock Tools软件进行有效成分与和核心靶点分子对接。结果：养心活血通脉汤治疗稳定性冠心病主要成分为槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、芒柄花黄素、黄芩素、丹参酮ⅡA,关键靶点为肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素-6（IL-6）、丝氨酸/苏氨酸激酶1（AKT1）、白细胞介素-1β（IL-1β）、血管内皮生长因子（VEGFA）,关键通路为脂质和动脉粥样硬化（Lipid and atherosclerosis）、磷脂酰肌醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1信号通路（PI3K-Akt信号通路）、肿瘤坏死因子信号通路（TNF信号通路）、丝裂原活化蛋白激酶信号通路（MAPK信号通路）、糖基化终产物/受体信号通路（AGE-RAGE信号通路）等。分子对接结果显示各有效成分与各核心靶点结合活性较好。结论：养心活血通脉汤治疗稳定性冠心病作用机制主要为降脂、抗动脉粥样硬化、抗炎、抗心肌损伤。     

刘瑞芬治疗卵巢储备功能低下性不孕症经验

介绍刘瑞芬教授治疗卵巢储备功能低下性不孕症的经验。刘教授认为卵巢储备功能低下性不孕症的病机以肾虚为本,血瘀为标,与心肝脾三脏关系密切。临床上中西医结合诊断,以补肾活血、疏肝、健脾、养心等法治疗,获得显著疗效。