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牙鲆RAG2 基因的质粒构建和体外原核表达
作者姓名:王先磊  谭训刚  张培军  徐永立
作者单位:1.中国科学院 海洋研究所, 实验海洋生物学重点实验室;2.青岛国家海洋科学研究中心
基金项目:国家863 计划资助项目(2012AA092203); 国家自然科学基金项目(30800838); 山东省自然科学基金项目(Y2008E12)
摘    要:将牙鲆(Paralichthysolivaceus)RAG2cDNA序列插入到体外表达质粒pProEXTMHT,在大肠杆菌(Escherichiacoli)BL-21中进行体外表达,分析了诱导时间和IPTG浓度对重组蛋白产生量的影响,确定了最佳诱导条件为:诱导时间为3h,IPTG诱导浓度0.2mmol/L。本研究同时对RAG2重组蛋白的可溶性进行确认,并利用BDTALONTM金属亲和柱纯化了RAG2蛋白。本研究结果为进一步深入研究RAG2蛋白的生物学功能奠定了良好的基础。

关 键 词:牙鲆(Paralichthys olivaceus)  RAG2  重组  纯化
收稿时间:2011-11-04
修稿时间:2012-02-17
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