| 凡纳滨对虾野田村病毒RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 雷燕,肖洋,王娟,张文文,胡芳源,唐绍林.凡纳滨对虾野田村病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J].广东海洋大学学报,2019(2). |
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| 作者姓名： | 雷燕 肖洋 王娟 张文文 胡芳源 唐绍林 |
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| 作者单位： | 广州利洋水产科技股份有限公司;广州金水动物保健品有限公司 |
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| 摘 要： | 【目的】建立快速检测凡纳滨对虾野田村病毒的RT-PCR方法。【方法】根据GenBank中获得的凡纳滨对虾野田村病毒的基因序列,应用Oligo6.0软件设计合成1对特异性扩增引物,对反应条件和反应体系进行优化,建立快速检测凡纳滨对虾野田村病毒的RT-PCR方法。用该方法对感染野田村病毒的凡纳滨对虾进行RT-PCR检测。【结果】RT-PCR可扩增出与设计相符的413 bp的特异性目的条带,而对白斑症病毒(WSSV)阳性虾、对虾杆状病毒(BP)阳性虾、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)阳性虾、肝胰腺细小病毒(HPV)阳性虾、黄头病毒(YHV)阳性虾、传染性肌肉坏死病毒(IMNV)阳性虾、桃拉病毒(TSV)阳性虾和健康虾的扩增结果均为阴性。测序比对结果表明,该方法检测结果准确,最低可检测出约100 fg/mL的野田村病毒重组质粒DNA;用该方法对从福建、广东、海南、广西、江苏、浙江、山东等地的386份临床样品进行RT-PCR检测,共检出野田村病毒阳性样品64份。【结论】该方法可用于凡纳滨对虾野田村病毒的快速检测。
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| 关 键 词： | 凡纳滨对虾 野田村病毒 RT-PCR 快速检测 |
Development and Application of a RT-PCR Assay of Litopenaeus vannamei Nodavirus |
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