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对虾病毒IHHNV衣壳蛋白的克隆表达及新型双抗夹心ELISA的高效检测
引用本文:于 衬,刘国胜,杨茗涵,杨丽容,陈明谅.对虾病毒IHHNV衣壳蛋白的克隆表达及新型双抗夹心ELISA的高效检测[J].应用海洋学学报,2018,37(3):418-425.
作者姓名:于 衬  刘国胜  杨茗涵  杨丽容  陈明谅
作者单位:宁波大学海洋学院;国家海洋局第三海洋研究所国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室
基金项目:国家海洋局第三海洋研究所基本科研业务费资助项目(海三科2017005);江苏省水产三新项目资助项目(D2015-11-5)
摘    要:通过利用分子生物学手段克隆IHHNV衣壳蛋白基因并构建原核表达载体,筛选抗原特性好的多肽免疫兔以制备高效的特异性IHHNV多克隆抗体,最终建立高效的检测对虾IHHNV的新型双抗夹心ELISA方法.实验结果表明该方法成功表达了对虾病毒IHHNV衣壳蛋白基因的抗原多肽,并制备出了高灵敏性的多克隆抗体.将抗原多肽及多克隆抗体用于ELISA的检测,抗体的效价在1∶12 800以上,最低可检测到1 pg的抗原蛋白,表明已成功建立高效的双抗夹心ELISA方法,对于对虾的海水养殖及IHHNV病毒性疾病的防控具有重要的参考价值.

关 键 词:海洋生物学  传染性皮下及造血组织坏死病毒  原核表达  衣壳蛋白  多克隆抗体  ELISA

Cloning and expression of IHHNV capsid protein and efficient detection of IHHNV through a new type of double antibody sandwich ELISA
YU Chen,LIU Guo-sheng,YANG Ming-han,YANG Li-rong and CHEN Ming-liang.Cloning and expression of IHHNV capsid protein and efficient detection of IHHNV through a new type of double antibody sandwich ELISA[J].Journal of Applied of Oceanography,2018,37(3):418-425.
Authors:YU Chen  LIU Guo-sheng  YANG Ming-han  YANG Li-rong and CHEN Ming-liang
Institution:School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China; Key Laboratory of Marine Biogenetic Resources, Third Institute of Oceanography, SOA, Xiamen 361005, China,Key Laboratory of Marine Biogenetic Resources, Third Institute of Oceanography, SOA, Xiamen 361005, China,Key Laboratory of Marine Biogenetic Resources, Third Institute of Oceanography, SOA, Xiamen 361005, China,Key Laboratory of Marine Biogenetic Resources, Third Institute of Oceanography, SOA, Xiamen 361005, China and Key Laboratory of Marine Biogenetic Resources, Third Institute of Oceanography, SOA, Xiamen 361005, China
Abstract:
Keywords:
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