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香鱼(Plecoglossus altivelis) JNK1基因克隆及其在成熟卵过熟进程中的表达变化
引用本文:杜静雅,苗亮,李明云,汤先念,李双,王昆.香鱼(Plecoglossus altivelis) JNK1基因克隆及其在成熟卵过熟进程中的表达变化[J].海洋与湖沼,2019,50(4):921-929.
作者姓名:杜静雅  苗亮  李明云  汤先念  李双  王昆
作者单位:宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室 宁波315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室 宁波315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室 宁波315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室 宁波315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室 宁波315211;宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室 宁波315211
基金项目:国家自然科学基金项目,41406154号;宁波市自然科学基金项目,2015A610271号;浙江省教育厅(理)科研计划,Y201430860号;浙江省“水产”重中之重学科开放基金,xkzsc1514号。
摘    要:c-Jun氨基端激酶(c-JunN-terminalkinases,JNKs)是丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)蛋白超家族成员之一,参与细胞骨架构建、细胞凋亡等多种细胞活动。本研究克隆了香鱼(Plecoglossusaltivelis)JNK1基因cDNA序列,并检测了其成熟卵在排入体腔保存不同时间(0—96h)的过熟过程中JNK1基因的表达变化。结果显示,香鱼JNK1基因cDNA序列全长1670bp,含一个长度1155bp的开放读码框,编码384个氨基酸,预测蛋白分子质量约44.2kDa、理论等电点6.61。氨基酸序列多重比对显示硬骨鱼类中JNK1氨基酸序列高度保守,香鱼与黄鳝的JNK1序列相似性最高(97.6%)。系统进化树分析显示各种脊椎动物的JNK1、JNK2、JNK3分别聚为一簇;本研究获得的香鱼JNK1位于JNK1大簇中并与黄鳝JNK1优先相聚,表明二者进化关系较近。RT-PCR检测结果显示健康香鱼JNK1基因在脑和性腺中高表达,肝和鳃中无表达。实时荧光定量PCR检测显示香鱼成熟卵JNK1基因的表达变化与卵的受精率、孵化率随保存时间延长而降低之间存在相关性:成熟卵随保存时间的延长JNK1表达量逐渐升高、在48h时达到峰值(24h、48h时的表达量分别为0h时的1.49倍和2.55倍),在此期间卵有较高的受精率和孵化率(48h时分别为88.99%和67.32%);保存时间继续延长时卵内JNK1基因都处于高表达水平,72h和96h时的表达量分别为0h时的2.32倍和1.53倍,而卵的质量也在保存超过48h后急剧下降(72h时受精率和孵化率分别为50.2%和25.54%)直至基本失去受精、孵化能力(96h时受精率和孵化率分别为10.83%和0.54%)。综上,香鱼JNK1基因表达上调与香鱼成熟卵的过熟凋亡过程密切相关,为深入研究香鱼JNK1基因的功能及卵过熟机制提供了基础资料。

关 键 词:香鱼  卵过熟  JNK1基因  表达变化
收稿时间:2019/1/25 0:00:00
修稿时间:2019/3/20 0:00:00

CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF SWEETFISH (PLECOGLOSSUS ALTIVELIS) JNK1 GENE DURING THE POST-OVULATORY AGEING OF EGGS
DU Jing-Y,MIAO Liang,LI Ming-Yun,TANG Xian-Nian,LI Shuang and WANG Kun.CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF SWEETFISH (PLECOGLOSSUS ALTIVELIS) JNK1 GENE DURING THE POST-OVULATORY AGEING OF EGGS[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2019,50(4):921-929.
Authors:DU Jing-Y  MIAO Liang  LI Ming-Yun  TANG Xian-Nian  LI Shuang and WANG Kun
Institution:Key laboratory of Applied Marine Biotechnology of Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Key laboratory of Applied Marine Biotechnology of Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Key laboratory of Applied Marine Biotechnology of Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Key laboratory of Applied Marine Biotechnology of Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Key laboratory of Applied Marine Biotechnology of Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China and Key laboratory of Applied Marine Biotechnology of Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China
Abstract:
Keywords:Plecoglossus altivelis  egg post-ovulatory ageing  JNK1 gene  expression change
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