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| 花鲈PPARα基因实时荧光定量PCR质粒标准品的构建 | |
| 作者姓名： | 方雯 钱云霞 |
| 作者单位： | 宁波大学生命科学与生物工程学院,浙江,宁波,315211 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，宁波市科技局资助项目 |
| 摘 要： | 利用SYBR荧光定量PCR技术，制备用于花鲈（Lateolabrax japonicus）PPARα基因实时荧光定量PCR检测的质粒标准品．通过PCR扩增出目的片断344-bp，纯化后连接至pMDI8-T载体，转化宿主菌E．coli DH5α．通过PCR鉴定、双酶切鉴定和测序分析后抽提重组质粒，测定其拷贝浓度，10倍梯度稀释成标准品模板10^8～10^4 copy／mm^3，进行荧光定量PCR分析．结果显示，循环阈值（Ct）与起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系． |
| 关 键 词： | 海洋生物学 花鲈 PPARα基因 实时荧光定量PCR 重组质粒 标准品 |
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