| 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)生长激素体外重组表达及活性分析 |
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| 作者姓名： | 柳学周 刘芝亮 徐永江 王妍妍 李春广 |
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| 作者单位： | 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071; 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071;绍兴市鸿港农业开发有限公司 绍兴 312000 |
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| 基金项目： | 国家鲆鲽类现代产业技术体系项目, CARS-50 号; 国家863 计划项目, 2012AA10A413 号; 中央级公益性事业单位基本科研业务费项目, 20603022012022 号; 山东省自然科学基金项目, ZR2012CQ025 号 |
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| 摘 要： | 根据半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)生长激素(GH)基因的c DNA全长序列设计引物克隆得到其全长552个碱基成熟肽序列。利用RT-PCR方法将扩增片段克隆到原核表达载体p ET-28a上,实现了GH成熟肽在大肠杆菌BL21(DE3)中的融合表达。融合蛋白分子量为26 k Da,在IPTG诱导4h时目的蛋白表达量最高,占细菌总蛋白的41.5%,主要以包涵体形式存在。Western-blotting分析表明GH融合蛋白可特异性地被6×His抗体识别。诱导表达后的菌液沉淀经纯化和复性后,获得大小为26 k Da的纯化GH融合蛋白。以ELISA方法检测纯化后的GH融合蛋白显示其具有免疫学活性。本研究为认识半滑舌鳎生长轴的调控机制提供了基础资料。
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| 关 键 词： | 半滑舌鳎 GH 原核表达 活性分析 |
| 收稿时间： | 2013-11-04 |
| 修稿时间： | 2014-02-26 |
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