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| 淋巴囊肿病毒实时定量PCR检测方法的建立和应用 | |
| 引用本文： | 孙颖杰,周优,岳志芹,陈晓,梁成珠,应骏,王哲,汪东风.淋巴囊肿病毒实时定量PCR检测方法的建立和应用[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2009,39(2). |
| 作者姓名： | 孙颖杰 周优 岳志芹 陈晓 梁成珠 应骏 王哲 汪东风 |
| 作者单位： | 1. 吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林,长春,130062;辽宁出入境检验检疫局,辽宁,大连,116001 2. 山东出入境检验检疫局,山东,青岛,266002;中国海洋大学,山东,青岛,266003 3. 山东出入境检验检疫局,山东,青岛,266002 4. 吉林大学农学部畜牧兽医学院,吉林,长春,130062 5. 中国海洋大学,山东,青岛,266003 |
| 基金项目： | 国家质量监督检验检疫总局科研项目，山东出入境检验检疫局科研项目 |
| 摘 要： | 选取淋巴囊肿病毒(Lymphocystis disease virus,LCDV)主衣壳蛋白(MCP)基因保守序列,利用Primer Express2.0软件设计引物,通过优化反应条件,建立了SYBR GreenⅠ实时定量PCR的检测方法,并进行了敏感性、特异性分析.SYBR GreenⅠ实时定量PCR反应体系的最佳引物浓度为0.5 μmol/L,方法的检测限为30个病毒拷贝,扩增产物的Tm值为74.5 ℃.该方法对淋巴囊肿病毒有特异性,不能扩增流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、虎纹蛙病毒(TFV)、蛙虹彩病毒(BIV)、新加坡石斑虹彩病毒(SGIV)、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)及真鲷虹彩病毒(RSIV).对12份发病牙鲆鱼样品进行检测,均感染淋巴囊肿病毒;20份无临床症状的牙鲆经检测不含淋巴囊肿病毒.建立的LCDV的SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法,具有成本低、特异、灵敏、快速等优点,可用于淋巴囊肿病毒的早期诊断. |
| 关 键 词： | 淋巴囊肿病毒 实时定量PCR SYBR GreenⅠ 检测 |
Detection of Lymphocystis Disease Virus Using SYBR Green Ⅰ Real-Time Quantitative PCR Assay |
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| SUN Ying-Jie,ZHOU You,YUE Zhi-Qin,CHEN Xiao,LIANG Cheng-Zhu,YING Jun,WANG Zhe,WANG Dong-Feng.Detection of Lymphocystis Disease Virus Using SYBR Green Ⅰ Real-Time Quantitative PCR Assay[J].Periodical of Ocean University of China,2009,39(2). | |
| Authors: | SUN Ying-Jie ZHOU You YUE Zhi-Qin CHEN Xiao LIANG Cheng-Zhu YING Jun WANG Zhe WANG Dong-Feng |
| Institution: | 1. College of Animal Science and Veterinary Medicine;Department of Agrigulture;Jilin University;Changchun 130062;China;2. Liaoning Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;Dalian 116001;3. Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;Qingdao 266002;4. Ocean University of China;Qingdao 266003;China |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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