| 溶藻弧菌dtd基因的克隆及原核表达条件优化 |
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| 作者姓名： | 陈立明, 庞欢瑛, 简纪常, 吴灶和 |
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| 作者单位： | [1]广东海洋大学水产学院,广东湛江524088; [2]广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524088; [3]广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东湛江524088; [4]仲恺农业工程学院,广东广州510225 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划（2012BAD17802）;广东省自然科学基金（B12121） |
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| 摘 要： | 根据NCBI数据库中已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列合成一对特异性引物,应用聚合酶链式反应(PCR技术)扩增溶藻弧菌HY9001菌株dtd基因,将其定向克隆到原核表达载体pET-32a构建重组表达质粒pET-DTD,并对其进行诱导温度、诱导时间、诱导IPTG浓度等条件的优化,最后探究其纯化时最佳咪唑洗脱浓度。结果表明:DTD蛋白成功表达,且其以包涵体的形式存在,在诱导温度37℃、IPTG浓度0.1 mmol/L条件下诱导5 h表达量最高,纯化最佳咪唑洗脱浓度为150 mmol/L。
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| 关 键 词： | 溶藻弧菌 dtd 基因克隆 原核表达 条件优化 |
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