| 海带磷酸甘露糖变位酶(PMM)基因的克隆与表达分析 |
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| 作者姓名： | 张朋艳 于雪 姚建亭 段德麟 |
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| 作者单位： | 中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室;青岛海洋科学与技术国家实验室实验海洋生物学与生物技术实验室;中国科学院大学,中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室;青岛海洋科学与技术国家实验室实验海洋生物学与生物技术实验室;中国科学院大学,中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室;青岛海洋科学与技术国家实验室实验海洋生物学与生物技术实验室,中国科学院海洋研究所实验海洋生物学重点实验室;青岛海洋科学与技术国家实验室实验海洋生物学与生物技术实验室 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目 (2013BAB01B01); 国家海洋公益性行业科研专项 (201405040) |
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| 摘 要： | 磷酸甘露糖变位酶(PMM)是褐藻胶和岩藻聚糖合成过程中的关键酶之一。本研究利用c DNA末端快速克隆(RACE)技术,获得2条海带PMM基因(Sjpmm1,Sjpmm2)序列。其中,Sjpmm1的开放阅读框(ORF)长759 bp,其编码的Sj PMM1为卤酸脱卤酶(HAD)超家族成员,含252个氨基酸,分子量约为28.51 k Da;而Sjpmm2的ORF长1866 bp,其编码的Sj PMM2属于磷酸己糖变位酶超家族的成员,含621个氨基酸,分子量约为66.49 k Da。海带PMM的二级结构均以?-螺旋为主。进化分析表明,Sjpmm1来自于原始真核生物,而Sjpmm2来源于质体的第一次内共生作用。实时定量PCR分析发现,海带受到高温或低温胁迫时,Sjpmm1和Sjpmm2转录水平上升,以合成岩藻聚糖抵抗环境影响。此外,利用p MAL-c5X载体对Sj PMM1进行体外表达,得到高浓度的可溶性融合蛋白,为后续的Sj PMM功能分析提供基础。
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| 关 键 词： | 海带 磷酸甘露糖变位酶 岩藻聚糖 褐藻胶 实时定量PCR 分析 |
| 收稿时间： | 2015-01-13 |
| 修稿时间： | 2015-03-10 |
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