地黄活血汤调控IL-6表达治疗子宫平滑肌瘤活性成分的筛选和测定

目的：筛选并准确测定地黄活血汤调控白细胞介素（IL）-6表达治疗子宫平滑肌瘤的活性成分,作为其基于功效的质量评价指标。方法：活性筛选采用酶联免疫吸附（ELISA）法,分别加入地黄活血汤中所含各成分单体,测定其对IL-6表达的影响,将产生显著影响者列入候选;以上述候选成分为指标,进行高效液相色谱法（HPLC）含量测定研究,使用Waters Xbridge C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,乙腈-0.2%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量10 μl;选择毛蕊花糖苷、木通皂苷D为指标性成分,共测定10批药材制备的供试品溶液。结果：ELISA法检测出毛蕊花糖苷、木通皂苷D、川续断皂苷乙、表儿茶素、芍药苷具有较为显著的IL-6表达调控活性;含量测定结果表明,毛蕊花糖苷、木通皂苷D在地黄活血汤中含量分别为0.0370～0.0534 mg/ml和0.0419～0.0590 mg/ml。结论：地黄活血汤中的毛蕊花糖苷、木通皂苷D能体外抑制IL-6的表达,建议列为该方基于功效主治的质量控制指标成分。