| 可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)酵母双杂交文库和铁结合蛋白真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 张云云,周 君,李 晔,张春丹,蔡江佳,陈丽萍,李太武,苏秀榕.可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)酵母双杂交文库和铁结合蛋白真核表达载体的构建[J].海洋与湖沼,2013,44(6):1506-1511. |
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| 作者姓名： | 张云云 周 君 李 晔 张春丹 蔡江佳 陈丽萍 李太武 苏秀榕 |
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| 作者单位： | 宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波大学海洋学院;宁波城市职业技术学院;宁波大学海洋学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目, 40776075号, 41176123号; 海洋公益性行业科研专项经费资助项目, 201005016号; 宁波市科技局资助项目, 2008C50027 号。 |
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| 摘 要： | 构建了可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)的酵母双杂文库, 总克隆数为6.09×106CFU, 重组率100%, 平均插入片段长度>1kb。随机挑取200个克隆子测序, 结果1个空载, 67 个无法对应的基因类型, 已知的132个基因中线粒体蛋白占29.54%, 蚯蚓血红蛋白15.9%, 核糖体蛋白10.6%, 铁结合蛋白8.3%, 肌动蛋白6.1%, 其它基因29.56%。这些基因分别为: 5-氨基乙酰丙酸合成酶、类博莱霉素水解酶、纤溶蛋白、谷氨酰胺合成酶、热休克蛋白、非特性类碱性磷酸酶、脂肪酶、金属蛋白、线粒体、硫氧还蛋白、蛋白磷酸酶、肌钙蛋白C、泛素。根据已获得的可口革囊星虫铁结合蛋白基因, 以EcoRⅠ和KpnⅠ为双酶切位点设计引物, 构建了可口革囊星虫铁结合蛋白真核表达载体pPink-HC-fer, 经PCR 及测序检验, 序列完全正确, 然后电转化至酵母细胞中诱导表达, 经SDS-PAGE检验其融合蛋白分子量大小约为23kDa。
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| 关 键 词： | 可口革囊星虫 铁结合蛋白 酵母双杂交文库 真核表达 |
| 收稿时间： | 2012/4/19 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/7/13 0:00:00 |
CONSTRUCTION OF cDNA LIBRARY BY YEAST TWO-HYBRID AND RECOMBINANT EUKARYOTIC EXPRESSION PLASMID OF PHASCOLOSOMA ESCULENTA |
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| ZHANG Yun-Yun,ZHOU Jun,LI Ye,ZHANG Chun-Dan,CAI Jiang-Ji,CHEN Li-Ping,LI Tai-Wu and SU Xiu-Rong.CONSTRUCTION OF cDNA LIBRARY BY YEAST TWO-HYBRID AND RECOMBINANT EUKARYOTIC EXPRESSION PLASMID OF PHASCOLOSOMA ESCULENTA[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2013,44(6):1506-1511. |
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| Authors: | ZHANG Yun-Yun ZHOU Jun LI Ye ZHANG Chun-Dan CAI Jiang-Ji CHEN Li-Ping LI Tai-Wu and SU Xiu-Rong |
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| Institution: | School of Marine Science, Ningbo University;School of Marine Science, Ningbo University;School of Marine Science, Ningbo University;School of Marine Science, Ningbo University;School of Marine Science, Ningbo University;School of Marine Science, Ningbo University;Ningbo City College of Vocational Technology;School of Marine Science, Ningbo University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Phascolosoma esculenta ferritin yeast two-hybrid library eukaryotic expression |
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