| 缢蛏(Sinonovacula constricta)耐氨氮关联SNP验证及相关基因NKA在氨氮胁迫下的表达特征分析 |
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| 引用本文： | 胡晨馨,吕丽媛,孙改改,姚韩韩,林志华,董迎辉.缢蛏(Sinonovacula constricta)耐氨氮关联SNP验证及相关基因NKA在氨氮胁迫下的表达特征分析[J].海洋与湖沼,2023,54(5):1413-1423. |
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| 作者姓名： | 胡晨馨 吕丽媛 孙改改 姚韩韩 林志华 董迎辉 |
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| 作者单位： | 浙江万里学院生物与环境学院 浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室 浙江宁波 315100;浙江万里学院宁海海洋生物种业研究院 浙江宁波 315604;浙江万里学院生物与环境学院 浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室 浙江宁波 315100;宁波大学海洋学院 浙江宁波 315832 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目,32202918号;浙江省水产新品种选育重大科技专项课题,2021C02069-7号;宁波市“科技创新2025”重大专项,2021Z114号,2019B10005号。 |
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| 摘 要： | 为筛查和验证缢蛏(Sinonovacula constricta)耐氨氮相关单核苷酸多态性(SNP)和基因, 为分子标记辅助育种提供参考, 通过竞争性等位基因特异性PCR (KASP)对位于缢蛏NKA基因(Sc-NKA)下游的SNP (g.21062868T＞A)进行验证, 采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测高氨氮胁迫下Sc-NKA基因的表达水平, 用免疫荧光技术对Sc-NKA蛋白进行组织细胞定位, 通过RNA干扰探究Sc-NKA基因在氨氮排泄中的作用。结果显示, SNP位点(g.21062868T＞A)与氨氮耐受性状显著相关(P＜0.05); Sc-NKA基因在氨氮胁迫后的mRNA和蛋白表达量均显著增加(P＜0.05); 缢蛏鳃中的柱状细胞和扁平细胞是Sc-NKA蛋白分泌的主要部位, 且在氨氮胁迫后细胞中的蛋白丰度增加; 干扰Sc-NKA基因6~48 h后, 缢蛏血淋巴中氨含量显著升高(P＜0.05),且Na+-K+-2Cl共转运蛋白1 (NKCC1)的mRNA表达水平显著降低(P＜0.05)。这些研究结果表明, Sc-NKA参与氨氮的排泄过程, 且与NKCC1在氨氮转运中具有协同作用。
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| 关 键 词： | 缢蛏 Na+/K+-ATPase 氨氮排泄 基因表达 RNA干扰 |
| 收稿时间： | 2023/2/15 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2023/4/20 0:00:00 |
VERIFICATION OF SNP ASSOCIATED WITH AMMONIA TOLERANCE AND EXPRESSION OF SNP-RELATED NKA GENE RESPONDING TO AMMONIA STRESS IN RAZOR CLAM (SINONOVACULA CONSTRICTA) |
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| HU Chen-Xin,LYU Li-Yuan,SUN Gai-Gai,YAO Han-Han,LIN Zhi-Hu,DONG Ying-Hui.VERIFICATION OF SNP ASSOCIATED WITH AMMONIA TOLERANCE AND EXPRESSION OF SNP-RELATED NKA GENE RESPONDING TO AMMONIA STRESS IN RAZOR CLAM (SINONOVACULA CONSTRICTA)[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2023,54(5):1413-1423. |
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| Authors: | HU Chen-Xin LYU Li-Yuan SUN Gai-Gai YAO Han-Han LIN Zhi-Hu DONG Ying-Hui |
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| Institution: | Key Laboratory of Aquatic Germplasm Resource of Zhejiang, College of Biological and Environmental Sciences, Zhejiang Wanli University, Ningbo 315100, China;Ninghai Marine Biological Seed Industry Research Institute, Zhejiang Wanli University, Ningbo 315604, China;Key Laboratory of Aquatic Germplasm Resource of Zhejiang, College of Biological and Environmental Sciences, Zhejiang Wanli University, Ningbo 315100, China;College of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315832, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sinonovacula constricta Na+/K+-ATPase ammonia excretion gene expression RNA interference |
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