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小黄鱼(Larimichthys polyactis)精子的生理特性及超低温冷冻保存研究
引用本文:郑学斌,杜晨,王景倩,詹炜,谢庆平,楼宝,竺俊全.小黄鱼(Larimichthys polyactis)精子的生理特性及超低温冷冻保存研究[J].海洋与湖沼,2020,51(1):193-205.
作者姓名:郑学斌  杜晨  王景倩  詹炜  谢庆平  楼宝  竺俊全
作者单位:宁波大学教育部应用海洋生物技术重点实验室 宁波315211;浙江省农业科学院 杭州 310016
基金项目:浙江省科技计划项目,2017C02013号。
摘    要:为了解养殖小黄鱼精子的生理特性及超低温冷冻保存效果,用计算机辅助精子分析系统(CASA)检测了小黄鱼精子的运动参数及盐度、pH、葡萄糖、离子等环境因子的变化对其精子活力的影响;探究了稀释液、抗冻剂、稀释比及降温高度等对精子冷冻保存效果的影响。结果显示:小黄鱼精液的精子密度为(6.92±1.20)×109/mL。精子经自然海水激活后,运动率、运动时间及寿命分别为(59.31±4.85)%、8.44±0.87min及12.20±0.50min,直线运动速率(VSL)、曲线运动速率(VCL)及平均路径运动速率(VAP)分别为11.96±5.21、25.38±7.19和22.33±6.88μm/s。精子运动适宜的盐度范围为25—30、适宜的pH范围为7.5—8.5,精子在盐度25或pH8.0的海水中活力较好。精子激活效果较好的葡萄糖浓度为0.7—0.9mol/L;浓度0.9mol/L时,精子活力较好。精子激活效果较好的KCl、NaCl、MgCl2及CaCl2溶液浓度分别为0.4—0.5、0.4—0.6、0.7—1.0和0.2—0.3mol/L;精子在KCl及CaCl2溶液中活力相对较差,运动率等参数显著低于对照组;精子在不同人工海水中的运动率显著低于自然海水中的运动率,但精子在单一离子缺陷型人工海水及全人工海水中的运动率无显著差异。以0.25mL麦细管为冻存管, 6种稀释液、不同浓度的4种抗冻剂、5种稀释比及5种降温高度对小黄鱼精子冷冻保存效果的影响试验发现,以HBSS液1︰3稀释精液,添加10%DMSO及15%PG为抗冻剂,液氮面上3.5cm处降温5min后投入液氮中保存效果较好,冻精解冻后运动率达(43.57±2.59)%及(43.06±6.77)%。

关 键 词:小黄鱼  CASA  生理特性  精子冷冻
收稿时间:2019/10/29 0:00:00
修稿时间:2019/11/25 0:00:00

PHYSIOLOGICAL CHARACTERISTICS AND CRYOPRESERVATION EFFECT OF LARIMICHTHYS POLYACTIS SPERM
ZHENG Xue-Bin,DU Chen,WANG Jing-Qian,ZHAN Wei,XIE Qing-Ping,LOU Bao and ZHU Jun-Quan.PHYSIOLOGICAL CHARACTERISTICS AND CRYOPRESERVATION EFFECT OF LARIMICHTHYS POLYACTIS SPERM[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2020,51(1):193-205.
Authors:ZHENG Xue-Bin  DU Chen  WANG Jing-Qian  ZHAN Wei  XIE Qing-Ping  LOU Bao and ZHU Jun-Quan
Institution:Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310016, China,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310016, China,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou 310016, China and Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology Ministry of Education, Ningbo University, Ningbo 315211, China
Abstract:
Keywords:Larimichthys polyactis  CASA  physiological characteristics  sperm cryopreservation
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