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副溶血弧菌感染的九孔鲍血细胞均一化全长cDNA文库的构建
引用本文:王淑红,ZOU Zhi-hua,张子平,SHI Yong-chun,王艺磊.副溶血弧菌感染的九孔鲍血细胞均一化全长cDNA文库的构建[J].台湾海峡,2008,27(3).
作者姓名:王淑红  ZOU Zhi-hua  张子平  SHI Yong-chun  王艺磊
作者单位:1. 集美大学水产学院、水产生物技术研究所、福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,福建 厦门,361021
2. 德克萨斯州立大学化学和生化系,美国 TX 78666
基金项目:福建省自然科学基金资助项目 , 福建省教育厅基金资助项目 , 福建省科技重点资助项目 , 集美大学优秀青年骨干教师基金资助项目
摘    要:采用Trizol试剂提取副溶血弧菌感染的九孔鲍血细胞的总RNA,经Oligotex纯化得到mRNA.根据SMART技术原理合成双链cDNA.双链cDNA采用双链特异核酸酶进行cDNA的均一化,构建成九孔鲍血细胞的均一化全长cDNA文库.原始文库的库容为3.4×106 cfu/cm3,重组率为92.3%,扩增后文库的滴度为2.6×1011 cfu/cm3以上.从文库中随机挑取897个克隆,测序获得高质量ESTs814条,其中有23条Contigs; 762条Singlets,Unigenes共785条,冗余率只有3.56%.以上结果说明所构建的文库质量好,完全可以满足后续基因克隆和表达序列标签测序工作的需要.

关 键 词:cDNA文库  均一化  九孔鲍  副溶血弧菌  血细胞

Construction a normalized full-length cDNA library of haemocytes from Haliotis diversicolor supertexta infected with Vibrio parahaemolyticus
WANG Shu-hong,ZOU Zhi-hua,ZHANG Zi-ping,SHI Yong-chun,WANG Yi-lei.Construction a normalized full-length cDNA library of haemocytes from Haliotis diversicolor supertexta infected with Vibrio parahaemolyticus[J].Journal of Oceanography In Taiwan Strait,2008,27(3).
Authors:WANG Shu-hong  ZOU Zhi-hua  ZHANG Zi-ping  SHI Yong-chun  WANG Yi-lei
Abstract:
Keywords:
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