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玻璃质壳类底栖有孔虫卷转虫属Ammonia spp.的DNA保存方式和提取效能比较研究
引用本文:吕曼,类彦立,李铁刚.玻璃质壳类底栖有孔虫卷转虫属Ammonia spp.的DNA保存方式和提取效能比较研究[J].海洋与湖沼,2016,47(2):346-353.
作者姓名:吕曼  类彦立  李铁刚
作者单位:中国科学院海洋研究所海洋生物分类与系统演化实验室 青岛 266071;中国科学院大学 北京 100049,中国科学院海洋研究所海洋生物分类与系统演化实验室 青岛 266071,中国科学院海洋研究所海洋生物分类与系统演化实验室 青岛 266071;国家海洋局第一海洋研究所海洋沉积与环境地质国家海洋局重点实验室 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋地质过程与环境功能实验室 青岛 266061
基金项目:国家自然科学基金项目, 41476043号, 41230959号, 41176132号; 中国科学院战略性先导科技专项(A类)项目, XDA11030104号; 大陆架科学钻探项目, GZH201100202号; 国家海洋局全球变化与海气相互作用专项项目, GASI-03-01-03-01号, DOMEP(MEA)-01-01-E号; 中华人民共和国科学技术部项目, 2014FY110500号。
摘    要:对有孔虫的DNA进行有效保存及提取是开展有孔虫分子鉴定工作的前提。本研究以探索适合玻璃质壳类底栖有孔虫的DNA保存及提取方法为目的,以中国近海优势属——玻璃质类底栖有孔虫卷转虫属(Ammonia spp.)为模式生物,考察不同温度(20—120°C,间隔10°C)烘干、冷冻(–20°C、–80°C,有水、无水)以及脱氧胆酸钠裂解液(Na deoxycholate,简称DOC)处理(含和不含EDTA)保存有孔虫DNA方法,同时进行了DOC裂解液法和Guanidine裂解液法对Ammonia spp.DNA提取效能的比较。结果显示,烘干保存法中20°C组和30°C组显著优于40°C组(P0.05);冷冻保存法中无水组显著优于有水组(P0.05);DOC裂解液保存法各组间无显著差异(P0.05)。三种保存方法综合效果表现为冷冻组显著优于烘干组和裂解液组(P0.05);两种DNA提取方法的提取效果都很好,但DOC法更廉价且操作简便。本文给出了一套适用于玻璃质壳类有孔虫的DNA保存和提取的优化方案。

关 键 词:玻璃质壳  底栖有孔虫  分子生物学  Ammonia  DNA提取  保存
收稿时间:4/3/2015 12:00:00 AM
修稿时间:2015/4/21 0:00:00

EFFICIENCY OF DNA PRESERVATION AND EXTRACTION FROM BENTHIC HYALINE FORAMINIFERA OF AMMONIA SPP.: A METHODOLOGICAL COMPARISON
LYU Man,LEI Yan-Li and LI Tie-Gang.EFFICIENCY OF DNA PRESERVATION AND EXTRACTION FROM BENTHIC HYALINE FORAMINIFERA OF AMMONIA SPP.: A METHODOLOGICAL COMPARISON[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2016,47(2):346-353.
Authors:LYU Man  LEI Yan-Li and LI Tie-Gang
Institution:Department of Marine Organism Taxonomy & Phylogeny, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071, China;University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China,Department of Marine Organism Taxonomy & Phylogeny, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071, China and Department of Marine Organism Taxonomy & Phylogeny, Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 266071, China;Key Laboratory of Marine Sedimentology and Environmental Geology, First Institute of Oceanography, SOA, Laboratory for Marine Geology, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Qingdao 266061, China
Abstract:
Keywords:hyaline  benthic foraminifera  molecular biology  Ammonia  genomic DNA extraction  preservation
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