| 一种检测近缘物种混合样品的新方法 |
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| 引用本文： | 贾秀双,王静,梁兴国.一种检测近缘物种混合样品的新方法[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2015(4):46-52. |
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| 作者姓名： | 贾秀双 王静 梁兴国 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学食品科学与工程学院 |
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| 基金项目： | 山东省自然科学杰出青年基金项目(JQ201204);长江学者和创新团队发展计划项目(IRT1188)资助 |
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| 摘 要： | 结合双重PCR(Duplex PCR,dPCR)和扩增产物熔点的测定,建立了一种定量分析近缘物种混合样品中各物种相对含量的新方法。即针对混合样品中2种物种的DNA序列,各自设计高特异性引物,使2种物种的DNA同时进行PCR扩增而互不干扰,且扩增产物的熔点有足够的差别(1℃);然后进行PCR扩增并测得不同温度下PCR产物同荧光染料结合后的荧光值;该荧光值对温度进行微分所得微分曲线上会产生2个峰(在两物种各自PCR产物熔点温度处),根据这2个峰的峰高比值同其相对含量的关系,即可完成对各物种含量的定量分析。本研究以长鳍和黄鳍金枪鱼的混合样品为例,对此方法的可行性进行了验证。结果表明,2种成分的含量比与对应峰值比之间线性关系良好;当混合样品中含有10%以上长鳍金枪鱼或5%以上黄鳍金枪鱼时,能够进行较准确的定量检测,证明了本方法切实可行。这一新方法解决了在混合样品中难以准确定量物种的难题,在食品安全和基因诊断领域有广泛的应用前景。
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| 关 键 词： | 双重特异性PCR 熔点 混合样品 定量分析 物种鉴定 |
A Novel Method of Identifying Close-Related Species in Mixed Species |
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| JIA Xiu-Shuang;WANG Jing;LIANG Xing-Guo.A Novel Method of Identifying Close-Related Species in Mixed Species[J].Periodical of Ocean University of China,2015(4):46-52. |
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| Authors: | JIA Xiu-Shuang;WANG Jing;LIANG Xing-Guo |
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| Institution: | JIA Xiu-Shuang;WANG Jing;LIANG Xing-Guo;College of Food Science and Engineering,Ocean University of China; |
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