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| 副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测 | |
| 引用本文： | 赵永刚,战文斌,萨仁高娃,王君玮,王志亮. 副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测[J]. 海洋科学, 2010, 34(9): 10-14 |
| 作者姓名： | 赵永刚 战文斌 萨仁高娃 王君玮 王志亮 |
| 作者单位： | 1. 中国海洋大学教育部,海水养殖重点实验室,山东青岛,266003;中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛,266032 2. 中国海洋大学教育部,海水养殖重点实验室,山东青岛,266003 3. 中国科学院海洋研究所,海洋地质与环境重点实验室,山东青岛,266071 4. 中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛,266032 |
| 基金项目： | 国家863 计划项目(2006AA100306; 2006AA100307) |
| 摘 要： | 通过PCR技术从副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus,VP)基因组DNA上扩增耐热溶血素基因tdh,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建重组表达质粒pPICZaA-tdh,经限制性内切酶SacI线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris,P.pastoris)GS115,经PCR和测序鉴定耐热溶血素基因成功整合到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行tdh的表达,SDS-PAGE分析证明重组TDH(thermostable direct hemolysin,TDH)的分子质量约为23ku,经Western blotting鉴定VP抗体能与表达的TDH发生特异反应,说明tdh基因在毕赤酵母中的表达是准确的。溶血实验证明了表达的TDH具有溶血活性。本研究首次应用毕赤酵母表达耐热溶血素基因tdh,在培养基中获得分泌表达的耐热溶血素,为研究tdh基因的功能奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 耐热溶血素 分泌表达 毕赤酵母 溶血活性 |
| 收稿时间： | 2010-04-22 |
| 修稿时间： | 2010-06-25 |
Expressing the tdh gene of Vibrio parahaemolyticus in Pichia pastoris and its hemolysis activity |
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| ZHAO Yong-gang,ZHAN Wen-bin,SAREN Gao-w,WANG Jun-wei and WANG Zhi-liang. Expressing the tdh gene of Vibrio parahaemolyticus in Pichia pastoris and its hemolysis activity[J]. Marine Sciences, 2010, 34(9): 10-14 | |
| Authors: | ZHAO Yong-gang ZHAN Wen-bin SAREN Gao-w WANG Jun-wei WANG Zhi-liang |
| Abstract: | |
| Keywords: | Thenmostable direct hemolysin Secretory expression Pichia pastoris Hemolysis |
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