Phaeocystis globosa与Phaeocystis antarctica叶绿体psbA基因的比较

测定了2株球形棕囊藻Phaeocystis globosa P1、P2的psbA基因序列。发现得到的2个序列完全相同。以P2序列对比分析了P．globosa和P．antarctica的psbA基因在DNA序列、氮基酸序列和RNA二级结构上的差异性，发现2种棕囊藻psbA基因DNA序列和氨基酸序列非常保守，无插入／缺失，其核苷酸和氨基酸变异率分别为1．88％和1．13％。与核基因核苷酸的碱基替换不同，psbA基因核苷酸的碱基替换主要发生在密码子的第1位上。且不引起氨基酸的变化，引起氨基酸变化的碱基替换都发生在密码子的第2位和第3位上。在RNA二级结构上两序列的1～4茎环结构完全相同，表现出明显的棕囊藻属的特异性，其它结构区域差异较大。种间差异表现明显。由于psbA基因DNA序列和氨基酸序列非常保守，可能不适宜棕囊藻属的系统发育分析。但其RNA二级结构可能对于棕囊藻的分子分类有一定的参考价值。     

斑节对虾虾苗白斑综合症杆状病毒的检测和养殖跟踪

利用２步ＰＣＲ检测技术对湛江和阳西地区的虾苗进行白斑综合病杆状病毒（ＷＳＳＶ）检测。在仔虾２日龄最早检测得到病毒，有２５％的虾苗带有ＷＳＳＶ病毒。带病毒虾苗和不带病毒虾苗分别在不同养殖模式的养殖过程中跟踪。前者在湛江湖光镇普通虾塘跟踪养殖，它们在变化的环境中容易发病，ｐＨ、盐度和温度是重要的诱发因子，在养殖５０～６０ｄ时发病死亡；后者在高位池和普通池养殖跟踪，它们对变化的环境有较大的适应性，养殖时间为８０～１１０ｄ，在相对优良的养殖技术条件下大部分可望养殖成功。环境中有ＷＳＳＶ病原传入，不带病毒虾苗在养殖后期可以带有ＷＳＳＶ病毒，出现白斑虾。跟踪有普通池有爆发病害，但是时间延后，跟踪的高位池没有爆发病害。     

柳珊瑚4种不同DNA提取方法的比较研究

通过2种样品前处理方式和4种不同的DNA提取方法相结合,提取橘色刺柳珊瑚(Echinogoria aurantiaca)基因组DNA,并对其18S rRNA基因进行了克隆和测序。实验结果表明,对于2种样品前处理方式,采用纯酒精进行样品前处理比PBS(磷酸缓冲液)进行样品前处理效果要好。在4种不同的DNA提取方法中,以CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)法提取基因组DNA效果最好,其余3种方法如PVP(聚乙烯基吡咯烷酮)法、高盐法和酚/氯仿法的提取效果较差。并且不同样品的钙质沉淀对DNA都有一定程度的吸附。最后,通过PCR扩增、克隆测序得到橘色刺柳珊瑚18S rRNA基因序列(AY962532)。BLAST软件进行序列比对表明橘色刺柳珊瑚与弱柳珊瑚(Leptogorgia chilensis)的18S rRNA基因(AF052928)同源性最高,为98.79%。     

4种对虾血细胞的分类和形态比较

凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）、斑节对虾（Penaeus monodon）、日本对虾（Penaeus japonicus）和刀额新对虾（Metapenaeus ensis）是我国主要对虾养殖品种，具有重要经济价值。对虾，不具有特异性的免疫系统，其非特异性免疫主要通过血细胞吞噬、包囊和形成结节等功能来完成。近年来，国内外学者应用电镜、     

几种理化因子对斑节对虾白斑杆状病毒(WSBV)感染力的影响

将部分纯化的ＷＳＢＶ暴露于不同理化条件下,通过人工感染的方法测定ＷＳＢＶ的感染力。结果表明,病毒在纯水中１ｈ能保持感染活性,全在３ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ的高盐溶液中１ｈ失去感染力;ＷＳＢＶ在３０℃中４ｈ感染活性丧失,在７０～９０℃中１０ｍｉｎ均失去感染力;当环境ｐＨ值为５以下或１２．６以上时,ＷＳＢＶ在１ｈ后丧失感染活性;ＮＰ０－４０,Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ－１００,ＣｌＯ２或甲醛等均能灭活ＷＳＢＶ。     

对虾白斑症病毒(WSSV)部分克隆片段的序列测定及PCR扩增

对克隆的 WSSV基因组 Xba 1.8kb片段进行序列测定 ,根据所测定的核酸序列 ,通过计算机软件分析 ,设计出一对 PCR引物。所设计的 PCR引物能从纯化 WSSV及患白斑症的对虾组织中扩增出长为 92 1bp的目的 DNA片段 ,并且能检测出 0 .2～ 0 .4μg病虾肌肉组织中的 WSSV。健康对虾、感染MBV的斑节对虾仔虾及 SINPV的扩增结果均为阴性。表明所建立的 WSSV PCR检测法灵敏而且特异。     

4种对虾血细胞的分类和形态比较

凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(Penaeus monodon)、日本对虾(Penaeus japonicus)和刀额新对虾(Metapenaeus ensis)是我国主要对虾养殖品种,具有重要经济价值.对虾,不具有特异性的免疫系统,其非特异性免疫主要通过血细胞吞噬、包囊和形成结节等功能来完成.     

斑节对虾虾苗白斑综合症杆状病毒的检测和养殖跟踪

利用 2步 PCR检测技术对湛江和阳西地区的虾苗进行白斑综合病杆状病毒 ( WSSV)检测。在仔虾 2日龄最早检测到病毒 ,有 2 5%的虾苗带有 WSSV病毒。带病毒虾苗和不带病毒虾苗分别在不同养殖模式的养殖过程中跟踪。前者在湛江湖光镇普通虾塘跟踪养殖 ,它们在变化的环境中容易发病 ,p H、盐度和温度是重要的诱发因子 ,在养殖 50～ 60 d时发病死亡 ;后者在高位池和普通池养殖跟踪 ,它们对变化的环境有较大的适应性 ,养殖时间为 80～ 1 1 0 d,在相对优良的养殖技术条件下大部分可望养殖成功。环境中有 WSSV病原传入 ,不带病毒虾苗在养殖后期可以带有 WSSV病毒 ,出现白斑虾。跟踪的普通池有爆发病害 ,但是时间延后 ,跟踪的高位池没有爆发病害。     

三种海水蟹类血淋巴细胞的比较

采用Wright’s-Geimsa混合染料对三疣梭子蟹、锈斑蟳和锯缘青蟹的血淋巴细胞进行染色,光镜下对这三种海水蟹的血淋巴细胞进行了观察和比较。根据血淋巴细胞的核质比、细胞整体着色特点、细胞质中颗粒的存在与否、颗粒的数量和分布等,三种海水蟹的血淋巴细胞均可分为颗粒细胞、半颗粒细胞和透明细胞三种主要类型,三种蟹的同类血淋巴细胞在染色形态上稍有差别。三种蟹的颗粒细胞大小差异较大,而半颗粒细胞和透明细胞大小相近。三种蟹的血淋巴细胞均以半颗粒细胞为主,透明细胞在血淋巴细胞中所占比例最小。三种蟹的血淋巴细胞密度均存在明显的雌雄差异,锈斑蟳和锯缘青蟹血淋巴细胞分类计数也存在明显的雌雄差异。     

对虾白斑症病毒（WSSV）部分克隆片段的序列测定及PCR扩增

对克隆的ＷＳＳＶ基因组Ｖａｂ Ｉ １．８ｋｂ片段进行序列测定，根据所测定的核酸序列，通过计算机软件分析，设计出一对ＰＣＲ引物。所设计的ＰＣＲ引物能从纯化ＷＳＳＶ及患白斑症的对虾组织中扩增出长为９２１ｂｐ的目的ＤＮＡ片段，并且能检测出０．２～０．４μｇ病虾肌肉组织中的ＷＳＳＶ。健康对虾、感染ＭＢＶ的斑节对虾仔及ＳＩＮＰＶ的扩增结果均为阴性。表明所建立的ＷＳＳＶ ＰＣＲ检测法灵敏而且特异。