单环刺螠GATA B2的基因克隆及表达分析

GATA家族是经典的转录因子家族,因其能特异性的与核苷酸序列T/A(GATA)A/G结合而得名。前期研究在单环刺螠(Urechis unicinctus)中筛选到GATA家族成员GATA B2与硫代谢关键酶硫醌氧化还原酶(Sulfide quinone oxidoreductase,sqr)启动子高转录活性区相互作用。为了进一步研究其是否参与硫化物代谢过程,本文鉴定了单环刺螠GATA B2基因(UuGATA B2),并分析其在成体各组织和硫化物暴露后的表达特征。结果显示:单环刺螠GATA B2的ORF全长为1788 bp,编码585个氨基酸;该氨基酸序列包含2个GATA家族保守的锌指结构域;系统进化分析显示UuGATA B2先与小头虫的GATA B2聚类,再与其它GATA4/5/6亚家族成员聚类。随后制备UuGATA B2多克隆抗体,利用Western blotting检测其在单环刺螠成体不同组织中的表达水平,结果显示其在体壁中的蛋白表达水平最高,中肠次之,后肠和肛门囊表达量较低,体腔液最低。由于sqr在硫化物暴露后的后肠中表达量最高,进一步对单环刺螠暴露在150μmol/L硫化物环境时后肠中UuGATA B2的表达进行了检测,发现其显著的响应硫化物胁迫,并在暴露12 h时含量达到最高,是对照组的2.32倍,表明UuGATA B2参与了单环刺螠硫化物应激过程。本文首次报道了GATA B2在硫化物应激中的表达特征,为后续深入探讨GATA家族在硫化物应激中的作用提供了基础数据。     

新亚欧大陆桥(中国段)沿线的资源环境与可持续发展

本文论述了新亚欧大陆桥(中国段)沿线200公里宽,4131公里长,面积89万平方公里区域内的矿产资源、土地资源、植被资源、旅游资源、地质灾害、生态环境等状况。并以大陆桥区域经济可持续发展观点,在一些重点问题上提出了建设性意见。     

单环刺螠中肠和后肠交替氧化酶对硫化物的应激反应

外源性硫化物可通过抑制或阻断线粒体电子传递经典途径而对生物体产生损伤甚至致死,交替氧化酶(Alternative Oxidase,AOX)是线粒体硫化物氧化电子传递分支途径中的1个关键酶。为了研究硫化物环境中单环刺螠的生存对策,本文利用间接竞争性ELISA和酶活性分析等技术检测了单环刺螠在硫化物应激前后中肠和后肠中AOX的蛋白含量以及活性的变化。结果显示:在未处理的单环刺螠中,后肠的AOX蛋白含量和酶活性均高于中肠。当单环刺螠暴露在硫化物(50和150μmol·L-1)环境中时,2个器官的AOX含量和酶活性水平均随着硫化物浓度的提高和暴露时间的延长而提高,并且150μmol·L-1硫化物处理组的单环刺螠2个器官AOX蛋白含量和酶活性普遍高于相同处理时间下的50μmol·L-1组。结合已报道的单环刺螠硫化物应激下细胞色素c氧化酶活性的变化,提出单环刺螠体内存在线粒体电子传递分支途径;提高组织线粒体中AOX活性是其应对环境硫化物毒性的对策之一。     

基因foxl2的结构及表达调控

叉头框转录因子L2基因(foxl2)是参与多个靶基因转录调控的重要转录因子基因。目前研究认为该基因主要参与脊椎动物的卵巢分化、发育及其功能维持,但在无脊椎动物中的研究很少。本文结合作者已有的研究成果概述了foxl2基因结构特点,提出该亚家族主要以叉头框的6个特殊氨基酸序列与其它亚家族区分开来;总结了该基因自身的表达调控,认为可能在转录、转录后及翻译后等不同水平都存在调控;进一步对该基因在不同动物中的空间表达特征及功能等方面进行概述,推测foxl2基因在低等动物中具有的表达多样性可能与其功能多样性有关。     

卤虫杂交品系生化特性的初步研究

选择两性生殖品系（我国山西运城两性生殖品系）的雌体卤虫与孤雌生殖品系（天津塘沽品系）的雄体卤虫，于实验室内获得杂交品系，并对此杂交品系和其亲本品系进行生化特性的比较分析。①同工酶分析的结果表明：杂交F1代雌、雄个体和双亲品系雌、雄个体间的过氧化物酶表现基本相同；F1代的葡萄糖－6－磷酸脱氢酶表现出双亲间的过渡状态；F1代的肌浆蛋白酶带的数量、活性都高于亲本。②进一步对杂交F1代、山西运城两性生殖品系的氨基酸种类和含量做了比较分析，结果表明：杂交品系的氨基酸总含量明显高于其亲本，且含有单一亲本所不具有的氨基酸（如胱氨酸）组成。本实验结果显示，通过杂交手段可显著提高卤虫遗传变异水平，并且是选择高卤虫营养品系的手段之一。     

单环刺螠硫醌氧化还原酶间接竞争ELISA检测方法的建立

硫醌氧化还原酶(Sulfide:quinone oxidoreductase,SQR),是线粒体硫化物代谢的关键酶。本研究以生活在潮间带下区及潮下带中的底栖生物—单环刺螠SQR重组蛋白为材料,建立了单环刺螠SQR间接竞争ELISA检测方法,为定量分析SQR蛋白水平表达奠定了基础。将SQR重组蛋白免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,检测效价高达1:64 000。采用免疫印迹实验,将该抗体与重组蛋白和体壁总蛋白杂交,均得到了单一的条带,表明该抗体特异性好。优化SQR间接竞争ELISA检测条件,得出最佳的抗原包被浓度为250ng/mL,一抗浓度为1∶20 000,二抗浓度为1∶12 000,此条件下建立的标准曲线检测范围为2.5～1 000ng/mL。精确度检测结果显示,批内差异在0.42%～7.27%、批间差异在2.58%～7.78%范围内,表明该条件下精确度具有良好的准确性和重复性。以上结果表明,已成功建立单环刺螠SQR间接竞争ELISA检测方法。     

Acute toxicity and biodegradation of endosulfan by the polychaeta Perinereis aibuhitensis in an indoor culture

The polychaete Perinereis aibuhitensis, a key species in estuarine ecosystems, can improve the culture condition of sediment. Endosulfan is an organochlorine pesticide used globally to control insects and mites; however, it is a source of pollution in aquaculture as a result of runoff or accidental release. In this study, we evaluated the toxicity of endosulfan to polychaeta and its ability to improve polluted sediment. Specifically, the effects of a series of endosulfan concentrations (0, 1.25, 2.5, 5, 10, 15, and 20 mg/L) were investigated, and the results indicated that the 24-h median lethal concentration (24-h LC₅₀) was 55.57 mg/L, while the 48-h median lethal concentration (48-h LC₅₀) was 15.56 mg/L, and the safe concentration was about 1.556 mg/L. In a 30-d exposure experiment, the animal specimen could decompose endosulfan effectively while improving endosulfan-polluted aquatic sediment.     

中国对虾幼体消化系统的组织化学研究

本文采用组织化学方法对中国对虾幼体消化系统中几种酶的变化进行了研究。比较分析了饱食和饥饿状态下,消化系统的结构和组织化学变化。前肠仅呈现ＰＡＳ阳性反应。中肠和中肠腺除呈现ＰＡＳ阳性反应外,其酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＫＰ）、酯酶（ＥＳＴ）和磷旨酸Ａ（ＥＣ）等均呈阳性。随着幼体发育,除ＥＣ阳性反应逐渐减弱外,其它均呈逐渐增强的趋势。另外在饥饿状态下,其酶活性均较饱食状态下的要弱。     

中国对虾幼体中肠的超微结构

１９９５年４月,在山东日照市涛雒对虾育苗场采集中国对虾各期幼体,采用超薄切片和电观察的方法,对其中肠结构进行观察研究,结果表明,中国对虾幼体的中肠肠壁由３部分组成,即肠上皮、基膜和肌层。中肠上皮细胞具发达的微绒毛,胞质中富含线粒体、内质网、高尔基复合体及酶原颗粒等,它由两类细胞组成。第一类细胞在发育早期占多数,随着幼体的发育逐渐减少,至仔虾期后,肠上波完全由第二类细胞组成,基膜分为内、外两层,且在