低渗诱导凡纳滨对虾肝胰腺消减文库的构建及其表达序列标签分析

初始体重(0.27±0.01)g的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)分别于盐度2和30中饲养56 d,采用抑制性消减杂交技术构建低渗胁迫诱导的凡纳滨对虾肝胰脏差异表达基因消减cDNA文库。消减杂交效率分析显示,正反向消减文库差异表达的基因各富集大约25和25~10倍。从正反向两个文库中随机挑选200个阳性克隆进行测序(正向文库80个,反向文库120个),共获得179条序列长度大于100 bp的ESTs序列,经CAP3在线拼接程序得到73条Unigenes(19条contigs和54条singlets)。生物学信息分析表明,这些Unigenes所代表的相应基因的功能包括免疫相关蛋白、代谢相关蛋白、核蛋白、细胞凋亡和转移蛋白。这些基因信息表明,凡纳滨对虾在低盐胁迫诱导所导致的生理变化非常复杂,构建的差异表达cDNA文库可较好地反映低盐胁迫对凡纳滨对虾影响的基因信息。     

低盐胁迫下凡纳滨对虾鳃丝抑制性消减杂交cDNA文库构建及差异ESTs分析

本研究以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)为对象,分别以低盐度胁迫下(4 ppt)凡纳滨对虾鳃丝cDNA为检测子,正常海水中凡纳滨对虾鳃丝cDNA为驱动予,采用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建了急性低盐胁迫诱导下凡纳滨对虾鳃丝消减cDNA文库。文库的重组率均高于95%,插入片段集中在250~750 bp之间,随机测序后在线拼接得到15组片段重叠群和37个单一序列共52个非重复序列。同源检索发现30个非重复序列与GenBank中的已知基因序列有较高的相似性。按差异表达基因编码的蛋白具体功能可分为6小类,依次为:(1)离子通道及转运蛋白;(2)蛋白合成翻译及转录因子;(3)应激抗氧化因子;(4)能量代谢;(5)信号受体和转导;(6)细胞纤维及骨架蛋白,所占比例分别为23.3%、20.0%、20.0%、16.7%、10.0%和10.0%。经功能聚类分析发现文库中含有大量离子通道蛋白及功能转运酶、胞内信号传导分子、细胞骨架蛋白等渗透调节和应激适应性相关基因,表明急性低盐胁迫诱导凡纳滨鳃丝抑制性消减杂交cDNA文库构建成功。     

Effects of supplemental coated or crystalline methionine in low-fishmeal diet on the growth performance and body composition of juvenile cobia Rachycentron canadum （Linnaeus）

We evaluated the effects of supplemental coated and crystalline methionine （Met） on the growth performance and feed utilization of juvenile cobia （Rachycentron canadum Linnaeus） in a 60-d feeding trial. Fish groups were fed one of six isonitrogenous and isolipidic diets： 1） fishmeal control; 2） un- supplemented experimental （low-fish-meal diet deficient in Met）; or 3） one of four Met diets supplemented with crystalline L-Met, cellulose-acetate-phthalate coated L-Met, acrylic-resin coated L-Met, or tripalmitin- polyvinyl alcohol coated L-Met. The test diets were fed to triplicate groups of cobia （initial body weight 5.40-4-0.07 g） twice a day. The weight gain and specific growth rate of the fish fed the RES diet were highest among the Met-supplemented groups and were 23.64% and 7.99%, respectively, higher than those of the fish fed with the un-supplemented experimental diet （P〈0.05）. The protein efficiency ratio of the fish fed the MET diet was significantly higher than that of the fish fed the un-supplemented experimental diet and the fish in the other methionine supplementation groups （P〈0.05）. Our results suggest that supplementation of crystalline Met in low-fish-meal diets promotes the growth performance of juvenile cobia.     

谷胱甘肽酵母水解物对干露胁迫下凡纳滨对虾肝胰腺糖代谢相关基因的影响

【目的】探究富含谷胱甘肽的酵母水解物对干露胁迫下的凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）肝胰腺糖代谢相关基因的影响,为谷胱甘肽酵母水解物在水产养殖中的应用提供参考。【方法】在基础饲料（鱼粉质量分数17.7%）中分别按质量分数0%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%、1.1%的比例添加谷胱甘肽酵母水解物,配制等氮等脂饲料6组（分别记为G0、G0.3、G0.5、G0.7、G0.9、G1.1）,饲喂初始体质量（0.24±0.01）g凡纳滨对虾4周,测定对虾生长性能指标;对对虾进行干露胁迫30 min,测定对虾肝胰腺相关基因的相对表达。【结果】各处理组对虾增重率、特定生长率和饲料系数无显著差异（P> 0.05）。干露胁迫后,G0组凡纳滨对虾肝胰腺缺氧诱导因子（HIF-1α）、果糖磷酸激酶（PFK）和乳酸脱氢酶（LDH）基因的表达显著上调（P <0.05）,琥珀酸脱氢酶（SDH）、苹果酸脱氢酶（MDH）和细胞色素氧化酶（CCO）基因显著下调（P <0.05）,葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、己糖激酶（HK）和丙酮酸激酶（PK）基因的表达无显著变化（P>...     

植酸对牙鲆生长和消化酶活性的影响

以鱼粉为主要蛋白源,在基础饲料中分别添加不同含量的植酸纳使植酸水平分别达到0.04%(对照组)、0.21%、0.44%和0.81%,研究不同含量植酸对牙鲆(Paralichthys olivaceus)(2.58 g±0.01 g)摄食、生长和消化酶活性的影响.实验在室内循环水养殖系统中进行,为期10周.结果表明,植酸处理组牙鲆摄食率(2.4%、2.5%和2.4%)显著高于对照组(2.1%)(P＜0.05),但植酸处理组之间差异不显著(P＞0.05).植酸处理组(59.47、61.27和64.82 U/mg蛋白)胃蛋白酶比活力显著低于对照组(79.34 U/mg蛋白),但植酸处理组之间差异不显著.各处理组之间牙鲆肝脏、肠和胃中淀粉酶比活力及肝脏和肠中蛋白酶比活力均无显著差异.随着饲料中植酸含量的增加,干物质和蛋白质表观消化率显著下降.同时,牙鲆特定生长率、饲料转化率、蛋白质效率和净蛋白质利用率随着饲料中植酸含量的升高均呈下降趋势,其中各处理组之间牙鲆特定生长率无显著差异,而植酸处理组饲料转化率(74.0%、73.7%和69.2%)则显著低于对照组(84.0%),0.81%植酸处理组蛋白质效率(1.37)和净蛋白质利用率(25.0%)显著低于对照组(1.64和30.6%).本实验结果表明,随着饲料中植酸含量的增加,牙鲆生长性能和胃蛋白酶比活力呈下降趋势.植酸对牙鲆生长的抑制作用将随着其含量的升高或实验周期的延长突现出来.