外源化学物质对鱼类生长和GH/IGF-I轴的影响

生长激素/胰岛素样生长因子-I轴(Growth hormone/insulin-like growth factor-I axis,GH/IGF-I轴)是调控鱼类生长的主要内分泌轴线,许多外源化学物质能够影响鱼类的生长,并且能够干扰GH/IGF-I轴。本文介绍了鱼类GH/IGF-I轴的组成、功能及其对鱼类生长的调控模式,并从GH/IGF-I轴角度探究外源化学物质影响鱼类生长的内分泌作用机制,展望了该领域的发展方向。     

鱼类甲状腺轴对胚胎发育、仔鱼变态及性别分化的调控作用研究进展

鱼类甲状腺轴由下丘脑、垂体、甲状腺组成,下丘脑通过分泌促甲状腺激素释放激素、促肾上腺皮质激素释放激素调节垂体促甲状腺激素的合成和分泌,促甲状腺激素促进甲状腺滤泡合成并释放甲状腺激素(主要为甲状腺素—T4),T4运输至肝脏等外周组织中,经过脱碘转化形成生物活性更强的三碘甲腺原氨酸(T3),T3主要通过同核受体结合发挥生物学功能。甲状腺激素对鱼类胚胎发育、仔鱼变态及性别分化等早期生长发育过程具有重要调控作用:甲状腺激素为鱼类胚胎发育期所必须,外加适量甲状腺激素能够提高胚胎或仔鱼存活率;仔鱼变态过程中,某些外部形态变化及相关组织分化依赖甲状腺激素的调控,牙鲆等仔鱼变态期体内甲状腺激素水平及其受体表达量会显著升高;性腺发育期,甲状腺激素对调控鱼类性别分化方向可能具有一定作用。     

真鲷(Pagrosomus major)杆状病毒超微结构与细胞病理学初步研究

1995年电镜检测患病真鲷肠上皮组织,在细胞质中发现了一种新的病毒粒子及其发生基质.病毒呈杆状外形为(130～200)×(360～400)nm,具囊膜,囊膜与核心间有10～12nm低密度间隔.病毒以溶酶体为载体形成病毒包涵体并进行病毒粒子装配;形态学上暂定为真鲷杆状病毒(Pagrosomus major Baculovirus,PMBV).细胞病理变化呈现粗面内质网核糖体脱落,部分线粒体溶解,溶酶体膨大,有大量包涵物,核膜有轻微膨胀变形等病变.     

中国对虾淋巴器官中球形病毒的电镜观察

应用光镜和电镜对中国对虾淋巴器官的显微结构和超微结构进行观察,结果表明,淋巴器官的盲管主要由内皮细胞和基质细胞构成,细胞间隙内充满着大量的以颗粒细胞为主的血细胞,     

金鱼卵黄原蛋白单抗夹心ELISA的开发及其在环境雌激素检测中的应用

利用Western blot和ELISA方法,从实验室现有的斑马鱼(Danio rerio)卵黄脂磷蛋白(Lipovitellin,Lv)单克隆抗体库中筛选出了对金鱼(Carassius auratus)卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vtg)具有高特异性、高亲和力的单抗H3A8。以纯化的单抗H3A8、金鱼Lv与HRP标记的Lv多克隆抗体建立了夹心ELISA,其工作范围为15.6~1 000ng·mL-1,检出限为9.6ng·mL-1,组内差异与组间差异分别为1.30%~4.99%和2.30%~4.37%,并且金鱼Vtg与Lv的标准曲线几乎重合,表明建立的夹心ELISA可以准确定量金鱼Vtg,并利用建立的ELISA测定了10、100、1 000ng/L 17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)暴露3和21d后雄性金鱼血浆与体表粘液中的Vtg含量,发现1 000ng·L-1 E2暴露3d、100与1 000ng·L-1 E2暴露21d均能显著升高雄鱼血浆和体表粘液中的Vtg含量,E2暴露21d后雄鱼血浆与体表粘液中的Vtg含量较为接近,建议将取样简便且对鱼体无伤害的体表粘液用作今后金鱼Vtg的检测样品。     

Effects of dietary genistein on GH/IGF-I axis of Nile tilapia <Emphasis Type="Italic">Oreochromis niloticus</Emphasis>

There is considerable concern that isoflavones, such as genistein in fish feed composed of soybean protein, aff ects somatic growth in fish. Our previous works demonstrated that 30 and 300 μg/g dietary genistein had no significant eff ect on growth performance in Nile tilapia (Oreochromis niloticus), but the higher level of genistein (3 000 μg/g) significantly depressed growth. This study was conducted to further examine the eff ects of dietary genistein on the endocrine disruption on growth hormone/insulin-like growth factor-I (GH/IGF-I) axis in Nile tilapia (O. niloticus). Juvenile fish were fed by hand twice daily to satiation with one of four isonitrogenous and isoenergetic diets, each containing either 0, 30, 300 or 3 000 μg/g genistein. Following an 8-week feeding period, plasma GH and IGF-I levels were investigated by radioimmunoassay and gene expression levels of gh, ghrelin, gnrhs, ghr, npy, npyrs, pacap, ghrs, igf-I, igf-Ir, and igfbp3 were examined by real-time PCR. The results show that no significant change in plasma GH and IGF-I levels in fish fed with diets containing 30 μg/g and 300 μg/g genistein. mRNA expression of genes along the GH/IGF-I axis remained unaff ected, except for igf-Ir, which was stimulated by the 300 μg/g genistein diet. While in fish fed the 3 000 μg/g genistein diet, the plasma GH and IGF-I levels decreased, and mRNA expression of gh, ghr2, npyr1, igf-I, and igf-Ir were also significantly depressed. In contrast, npy and igfbp3 mRNA expression were enhanced. This study provides convincing evidence for growth impediment by genistein by disturbing the GH/IGF-I axis in Nile tilapia O. niloticus.     

蔬菜农药残留GC-MS分析方法改进与基质效应探讨

改进了国家标准GB/T5009.20-2003和农业部标准NY/T761-2004中的2种样品前处理方法,适用于GC-MS多农药残留检测,并探讨了基质效应的影响。使用GC-MS-SIM检测,做到了快速准确地检测多种农药残留、排除假阳性;采用基质标准结合单点校正进行定量分析,解决了保留时间的漂移,基质增强效应和个别有机磷农药拖尾的问题。建议使用农业部标准的改进方法进行多种农药的检测,而在甲胺磷或乙酰甲胺磷的单项检测中使用国标改进方法。采用2次脱水的国标改进方法,加标回收率在70%~105%;采用丙酮 正己烷混合溶剂溶样的农业部标准改进方法,加标回收率在90%~105%(甲胺磷和乙酰甲胺磷在65%左右),2种方法的相对标准偏差均在15%以内。     

中国对虾（Penaeuschinensis）核包涵体型杆状病毒装配的电镜观察

９４－９５斫养殖对虾病毒爆发流行期间，对患病中国对虾肝胰上皮细胞和胃肌细胞进行了电镜检测，发现一种核包涵体型杆状病毒（１４０－１６０ｎｍ×２８０－３３０ｎｍ），对其装配机质的超微结构研究表明，核包涵 体型杆状病毒以核内装配为主，部分病毒基质转入胞质进行了装配。     

久效磷对真鲷鳃、肝和肾细胞超微结构的影响

0.5mg/L的久效磷处理真鲷4d和10d后，利用电子显微镜观察真鲷鳃氯细胞，肝细胞和肾小管细胞的超微结构变化。结果表明；鳃氯细胞微小管严重水肿；肝细胞核膜水肿，溶解，部分线粒体外膜和嵴溶解，内质网明显水肿；肾小管细胞内质网和刷状缘严重水肿。并且这三种组织细胞器的超微结构变化呈时间效应关系。     

大泷六线鱼卵黄原蛋白的纯化鉴定及其ELISA检测方法的建立

海洋环境雌激素污染日益加剧,亟需建立可靠的生物检测技术,鱼类卵黄原蛋白(vitellogenin, Vtg)是国际上推荐的环境雌激素生物标志物。本研究采用凝胶过滤与离子交换层析技术从17β-雌二醇(E_2)肌肉注射后的雄性大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)血浆中纯化获得Vtg。经鉴定大泷六线鱼Vtg是分子量约为340 kDa的糖磷脂蛋白,SDS-PAGE显示其亚基分子量约为170 kDa。利用纯化的Vtg免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗血清,并且Western blot结果证实抗血清对Vtg具有很好的特异性。以纯化的Vtg与兔抗Vtg多克隆抗体建立了检测大泷六线鱼血浆Vtg的间接竞争酶联免疫吸附反应(ELISA)。该检测方法的工作范围为15.62～1 000 ng/mL,组内与组间差异分别为6.85%与6.79%,可用于大泷六线鱼血浆Vtg的准确定量。本研究建立的大泷六线鱼Vtg ELISA具有较高的敏感度、特异性与精确度,为中国海洋环境雌激素的生物监测提供了可靠工具。