阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)抗氧化功能的影响

以草鱼为实验对象,采用不同浓度的十二烷基硫酸钠(SDS)进行10天暴露实验,研究阴离子表面活性剂对鱼类抗氧化酶的影响。急性毒性实验表明,SDS对草鱼的96hLC50为5·2mg/L。亚致死浓度SDS暴露可导致草鱼超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性发生变化。在所有受检组织中,SOD和GSH-Px活性在暴露初期均受到不同程度的诱导,但随着SDS浓度升高和暴露时间延长,酶活性均呈明显的下降趋势,提示SDS暴露所引起的酶活性变化与暴露浓度和暴露时间有一定的相关性。此外,实验还显示两种抗氧化酶在草鱼各组织中的分布均存在明显差异。其中,肝脏SOD和红细胞GSH-Px活性较高,易于检测,且对SDS胁迫敏感。这些结果表明,SDS暴露对草鱼具有一定毒性,对抗氧化酶活性亦有明显的负面影响。     

三疣梭子蟹含硒谷胱甘肽过氧化物酶基因克隆及其表达分析

为探究三疣梭子蟹的免疫机制以及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)在甲壳动物响应寄生虫感染免疫过程中的作用,本研究采用RACE方法从三疣梭子蟹中克隆获得硒半胱氨酸-谷胱甘肽过氧化物酶基因的全长cDNA序列,其cDNA序列全长为696bp,5′-UTR长度为102bp,3′-UTR长度为87bp,开放阅读框长度为507bp,编码168个氨基酸,其中含有一个典型的由蛋白石终止密码子(220TGA222)编码的硒半胱氨酸(40U)。预测了该基因编码的氨基酸序列及其中的保守结构域,包括GPx家族签名序列(64LAFPCNQF71)、活性位点序列(152WNFEKF157)以及与酶催化活性相关的氨基酸位点包括谷氨酰胺(74Q)、精氨酸(90R和168R)和色氨酸(142W)。相似性比对和系统发育分析结果表明,三疣梭子蟹硒半胱氨酸-谷胱甘肽过氧化物酶(SeGPx)与甲壳动物中的SeGPxs相似性较高,其中与拟穴青蟹SeGPx相似性最高,并与其在系统发育树中聚为一支。经血卵涡鞭虫侵染后(0—192h),SeGPx基因在三疣梭子蟹的血细胞、肝胰腺和鳃组织中的转录水平均发生显著性升高。该结果表明,SeGPx在三疣梭子蟹应对血卵涡鞭虫的免疫反应中发挥重要作用,可通过调控甲壳宿主体内被病原扰乱的氧化还原状态进而起到宿主组织保护作用。     

渤海沉积环境中细菌汞还原酶基因merA的多样性分析

细菌汞还原酶MerA对环境中的汞具有潜在的还原和解毒作用。本研究对2011-2012年采自渤海湾天津滨海新区大沽河排污河口、渤海湾近岸及莱州湾垦利养殖区的表层沉积物,进行了放线菌门、厚壁菌门、α-变形菌纲和β/γ-变形菌纲汞还原酶基因merA克隆文库的构建和序列测定,并对merA基因序列编码的MerA蛋白序列进行分析。结果表明:渤海沉积环境中发育多样性丰富的MerA,排污河口和养殖区中厚壁菌门、α-变形菌纲和α/β/γ-变形菌纲的MerA多样性均高于渤海湾近岸的。3个区域具有不同的MerA组成特征,厚壁菌门中与Bacillus sp.MB2021亲缘关系最近的MerA的总丰度在养殖区最高(24.3%),与Paenisporosarcinasp.TG20亲缘关系最近的MerA的总丰度在排污河口最高(46.3%)。不同环境背景、外源merA基因输入、汞等重金属污染物的联合选择可能导致了渤海沉积环境中MerA多样性和组成的变化。     

低盐胁迫对脊尾白虾过氧化氢酶和硒谷胱甘肽过氧化物酶基因表达的影响

过氧化氢酶(CAT)和硒谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GPx)在抗氧化防御体系中扮演重要的角色,在清除多余的活性氧自由基(ROS)防止机体氧化损伤方面具有重要的作用.本文利用RACE-PCR方法首次从脊尾白虾肝胰腺组织中克隆获得了CAT cDNA全长序列,该基因全长2649 bp,包括5′非编码区(UTR) 78 bp、开放阅读框(ORF)1554 bp和3′非编码区(UTR) 1017 bp,共编码517个氨基酸,预测分子量为58.46 kDa,理论等电点为6.64,利用PROSITE tools预测CAT基因的功能位点,发现该氨基酸序列包括酶活性中心序列“FDRERIPERVVHAKGAG”,亚铁血红素结合信号序列“RLFSYPDTH”和 3个催化位点残基His⁷¹,Asn¹⁴⁴和Tyr³⁵⁴.同源性分析表明,脊尾白虾CAT氨基酸序列与其他物种的相似性为68%-92%.荧光定量PCR分析结果表明,CAT基因在肝胰腺、血细胞、心脏、肌肉、卵巢、鳃、胃和眼柄均有表达,其中在肝胰腺中表达量最高.低盐胁迫后脊尾白虾鳃和肝胰腺中CAT和GPx基因分别在48 h和6 h达到最大值,且与对照组差异显著(P< 0.05),表明CAT和GPx基因参与了低盐胁迫反应,并表现出一定时间效应关系.综合分析结果指出脊尾白虾CAT基因是CAT家族主要成员之一,可能在低盐环境胁迫过程中具有重要的作用.     

南极硅藻GJ01(Berkeleya rutilans)产谷胱甘肽条件的优化

以南极硅藻GJ01(Berkeleya rutilans)为对象,分别采用紫外、可见和荧光分光光度法,研究了营养条件等因子对GJ01生长和胞内谷胱甘肽含量的影响,并对培养的GJ01细胞合成谷胱甘肽的条件进行了优化。结果表明,在单因子影响条件下,1.2g/L的碳酸氢钠对南极硅藻GJ01的生长最好,且最有利于谷胱甘肽的积累;0.8mmol/L氯化钙对GJ01的生长最为有利,而0.2mmol/L氯化钙对谷胱甘肽的产生是适宜的;维生素B_(12)和生物素对GJ01胞内谷胱甘肽的产生影响较小。正交试验表明,GJ01细胞产生谷胱甘肽的最优条件是:光照周期为16h/8h、NaHCO_3为1.6g/L、Ca~(2 )为0.4mmol/L、Cys为10mmol/L。该结果为利用南极硅藻GJ01生产谷胱甘肽提供了参考和依据。     

Effects of benzo（a）pyrene exposure on the antioxidant enzyme activity of scallop Chlamysfarreri

Scallop Chlamys farreri was exposed to different concentrations of benzo(a)pyrene (BaP) (0.5 μg/L, 1.0 μg/L, 10.0 μg/L and 50.0 μg/L) for 30 days in seawater. The 7-ethoxyresorufin O-deethylase (EROD) activity was significantly induced, and increased with the increasing BaP concentration. The glutathione-S-transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), Glutathione peroxidase (GPx) activities increased in short time at low concentration of BaP, and was significantly depressed at high concentr...     

Effects of mercuric chloride on antioxidant system and DNA integrity of the crab Charybdis japonica

Mercury (Hg) is one of the commonly encountered heavy metals, which is widespread in inshore sediments of China. In order to investigate the toxicity of Hg on marine invertebrates, we studied the effects of the divalent mercuricion (Hg²⁺) (at two final concentrations of 0.0025 and 0.0050 mg L⁻¹, prepared with HgCl₂) on metallothionein (MT) content, DNA integrity (DNA strand breaks) and catalase (CAT) in the gills and hepatopancreas, antioxidant enzyme activities of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione peroxidase (GPx), in the hemolymph, gills and hepatopancreas of the portunid crab Charybdis japonica for an experiment period up to 15 d. The results indicated that MT was significantly induced after 3 d, with a positive correlation with Hg²⁺ dose and time in the hepatopancreas and a negative correlation with Hg²⁺ dose and time in the gills. While CAT in the hemolymph was not detected, it increased in the hepatopancreas during the entire experiment; SOD and GPx in the three tissues were stimulated after 12 h, both attained peak value and then reduced during the experimental period. Meanwhile, DNA strand breaks were all induced significantly after 12 h. These results suggested the detoxification strategies against Hg²⁺ in three tissues of C. japonica.     

硫氧还蛋白及其相关蛋白的研究进展

细胞的氧化还原状态随细胞内各种生理过程发生变化，例如，正在增殖的细胞与分化细胞相比，更需要处于还原状态；细胞内氧化还原环境的变化对于细胞周期或细胞凋亡都十分重要。细胞内的氧化还原状态主要由细胞内氧化还原型辅酶如NAD（P）H—NAD（P）和还原型谷胱甘肽-氧化型谷胱甘肽（GSHGSSG）浓度决定。另外，硫氧还蛋白及其相关蛋白也是维持细胞内氧化还原状态的二硫键还原酶。     

汞对南极细菌Pseudoalteromonas sp. NJ62抗氧化酶活性的影响

因为污染毒害会引起生物体内活性氧的增加,所以生物体抗氧化系统的变化可以作为污染毒害引起的氧化胁迫程度的标记.南极细菌优势菌株Pseudoalteromonas sp. NJ62在用氯化汞处理后的抗氧化酶和汞还原酶的活性变化实验结果表明,Pseudoalteromonas sp. NJ62的超氧化物酶主要为Mn-SOD,当用5μmol/L和10 μmol/LHg2+处理时,其活性增加;在用Hg2+处理后,谷胱苷肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶和汞还原酶的活性也显著增加.这些抗氧化反应可以用来作为南极生态系统汞污染引起的氧化胁迫的生物标记.     

富硒螺旋藻的抑癌及抗辐射作用

螺旋藻(Spirulina)作为人类天然食品和药品资源具有较大的开发利用价值[1]。微量元素硒(Se)在体内的功能形式主要为30余种硒蛋白(selenoprotein),特别是十几种硒酶(selenoenzyme)[2,3],如谷胱苷肽过氧化物酶(Glutathione peroxdiase,GPx)家族、脱碘酶(Iodothyronine deiodinases,ID)家族、硫氧还蛋白还原酶家族(Thioredoxin reductases,TDR)等,它们参与机体重要的生命代谢活动。富硒螺旋藻中有机硒含量高,并从中分离纯化到多种含硒活性物质如含硒藻蓝蛋白、硒多糖等[4]。进一步研究发现,硒的掺入可增强藻蓝蛋白及多糖等天然活性物质的…