肾安汤联合激素及免疫抑制剂治疗狼疮性肾炎30例

目的：探讨肾安汤联合激素及免疫抑制剂治疗狼疮性肾炎（LN）的临床疗效。方法：将60例LN患者采用随机按数字表法随机分为治疗组和对照组，每组各30例。对照组采用口服醋酸泼尼松片和静脉滴注环磷酰胺治疗，治疗组在对照组的基础上加服肾安汤治疗，2组疗程均为6个月。观察比较2组治疗前及治疗后2、4、6个月的SLEDAI评分，24h尿蛋白定量，血尿素氮（BUN)、血清肌酐（SCr）、血沉及免疫相关指标（IgG、C3、C4）情况。结果：总有效率治疗组为96.67%，对照组为76.67%，2组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后治疗组24h尿蛋白定量、BUN和SCr水平均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后2、4、6个月2组SLEDAI评分均逐渐下降（P<0.01），在治疗后4、6个月，治疗组SLEDAI评分低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗后治疗组血沉及免疫指标IgG均低于对照组（P<0.05）；2组补体C3、C4水平均比治疗前高，治疗后治疗组补体C3、C4水平均高于对照组（P<0.05）。结论：肾安汤联合激素及免疫抑制剂治疗狼疮性肾炎可以有效改善患者的症状，控制病情，减轻不良反应。     

鱼类疫苗浸泡免疫策略优化的研究现状

疫苗是一种针对特定疾病并改善免疫者免疫力的生物制剂。疫苗能刺激免疫者的免疫系统产生特异性免疫反应和非特异性免疫反应，提高免疫者的抗病能力，达到免疫保护的效果。浸泡免疫是鱼类特有的免疫接种方法，该方法能简化人工操作、减少工作强度、降低鱼体应激、刺激鱼体的黏膜系统，可在短时间内完成大量的免疫工作。正确的疫苗使用有助于提高疫苗的效果。作者对鱼类黏膜免疫机制、鱼类疫苗浸泡免疫方式、浸泡免疫策略优化的方法、浸泡免疫面临的问题以及浸泡免疫的发展趋势等进行综述，以期为鱼类病害防治和鱼体免疫增强的研究提供新思路和新策略。     

牙鲆FEL1基因的表达及功能分析

凝集素(Lectin)是一类能与糖进行非共价可逆结合的蛋白质,具有凝集细胞和聚糖的作用。在牙鲆的集约化养殖过程中,会面临许多病原微生物的入侵,造成大量的经济损失,研究表明鱼卵凝集素(Fish egg lectin)是凝集素超家族中的一员,在硬骨鱼的抗菌免疫反应中发挥作用。在本研究中,克隆验证了牙鲆FEL1基因(Fish egg lectin 1,PoFEL1),其中开放阅读框(Open reading frame, ORF)为675 bp,编码224个氨基酸,蛋白分子量为24.8 kDa。PoFEL1组织表达分析显示,PoFEL1在卵巢、肠以及肝脏中的表达量比较高;胚胎发育过程中PoFEL1表达分析显示,在胚胎发育的早期PoFEL1的表达量比较高,随着胚胎的逐渐成熟,其表达量逐渐降低,呈母源性表达。体外细胞刺激实验表明LPS、PGN、Poly(I∶C)和E.tarda刺激牙鲆卵巢细胞系后,PoFEL1的表达上调。利用牙鲆卵巢细胞研究了PoFEL1蛋白的亚细胞定位,证实其分布在细胞质中。用LPS刺激过表达PoFEL1的牙鲆卵巢细胞系,发现细胞因子p38、IL-6和TNF-α的表达显著上调。通过双荧光素酶检测系统发现,过表达PoFEL1能显著上调NF-κB报告基因的表达,从而引起机体的免疫应答,说明PoFEL1对NF-κB通路可能具有调节作用。以上研究结果说明PoFEL1在牙鲆先天性免疫过程中发挥作用。     

性类固醇激素及其受体在半滑舌鳎性腺分化发育过程中的表达与生理功能

首次用17β-雌二醇(E_2)及其受体(ERα)、睾酮受体(AR)的多克隆抗体在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevisG(u|¨)nther)性腺分化发育过程中进行免疫细胞化学定位研究。结果表明:在半滑舌鳎原始性腺中已有E_2、ERα和AR的分布和表达;卵原细胞、初级卵母细胞、精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞对E_2及ERα、AR抗体均呈现不同程度的阳性反应,在精细胞和精子中对E_2和ERα呈免疫阴性反应,而AR则一直保持较强表达,揭示了半滑舌鳎性腺中类固醇激素可能通过旁分泌调控机制刺激卵子和精子发育和成熟。性类固醇激素及其受体免疫阳性物定位在生殖细胞的胞质、胞膜和核膜等广泛部位并有表达,在性腺分化和不同发育时期的表达强度有所不同,表明其在性腺分化发育过程各阶段所起生理功能不同。这些结果为证明性类固醇激素及受体参与调节半滑舌鳎性腺分化发育提供了重要形态学新证据。     

基于新型仿生智能方法的边坡变形位移预测

边坡地变形,具有高度复杂的非线性演化特征。将BP神经网络和免疫克隆算法改进并集成结合,提出一种新型的仿生智能方法,即免疫克隆神经网络。并利用其强大的非线性拟合能力,对边坡进行变形位移的预测。结果表明,此方法拥有较高的预测精度,为边坡变形位移的预测提供了行之有效的途径,从而为边坡稳定性判别和滑坡预报提供了可靠的分析依据。     

球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)对斑马鱼幼鱼生长、肠道菌群及代谢的影响

旨在探究养殖水体中添加球形赖氨酸芽孢杆菌对斑马鱼幼鱼生长、抗氧化免疫、肠道菌群与代谢的影响。将初体重为(0.019±0.003) g的270尾斑马鱼随机均分为3组, ZF0组(对照组, 基础饲料)、ZF5组(基础饲料+10⁵CFU/mL球形赖氨酸芽孢杆菌)与ZF7组(基础饲料+10⁷CFU/mL球形赖氨酸芽孢杆菌), 每组3个平行,试验周期为33 d。实验结果表明: (1) 各组间的终末体重、增重率和特定生长率都没有显著性差异(P>0.05)。(2) ZF5和ZF7组的GPT活性显著高于ZF0组(P<0.05), ZF5组AKP的活性显著高于其他组(P<0.05)。(3) ZF7组胰蛋白酶和脂肪酶的活性相对于ZF0和ZF5组显著提高(P<0.05)。(4) ZF7组肠道绒毛高度、V/C都显著高于ZF0与ZF5组(P<0.05); ZF7组的隐窝深度显著低于其他两组(P<0.05)。(5) 从肠道菌群组成来看, 各组间优势菌门均为变形菌门(Proteobacteria), ZF5和ZF7组显著降低了肠道中梭杆菌门(Fusobacteriota)的丰度并显著提高了放线菌门(Actinobacteriota)的丰度(P<0.05)。属水平上, 对照组与试验组的优势菌属为鲸杆菌属(Cetobacterium), 试验组显著减少了邻单胞菌属(Plesiomonas)的丰度同时显著提高了戈登氏菌属(Gordonia)、细杆菌属(Microbacterium)等有益菌属的丰度(P<0.05)。(6)ZF5和ZF7组与ZF0组的肠道代谢物差异明显, 其中Lipoxin a4、Prostaglandin g2和11-dehydrothromboxane b2显著上调(P<0.05), 5''-phosphoribosyl- 5-amino-4-imidazolecarboxamide (aicar)显著下调(P<0.05)。差异代谢物主要富集在ABC转运蛋白、神经活性配体-受体相互作用以及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸通路中。综上所述,养殖水体中添加球形赖氨酸芽孢杆菌有利于改善斑马鱼幼鱼的肠道消化性能、组织结构和微生物多样性及其代谢产物。     

凡纳滨对虾C-型凝集素LvLec2 对不同刺激的免疫应答

克隆获得了与中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)C-type lectin 3同源的C-型凝集素LvLec2基因序列,并通过Real-time PCR研究了其在脂多糖(lipopolysaccharide,简称LPS)、灭活溶壁微球菌(Micrococcus lysodeikticus)和白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,简称WSSV)刺激后的转录表达变化。结果表明,LvLec2编码157个氨基酸,含有1个糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,简称CRD),其CRD结构域中具有决定糖结合特异性的基序"EPS"(Glu118-Pro119-Ser120)序列。系统进化树分析表明LvLec2与已发表的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)C-型凝集素亲缘较远。LPS、灭活溶壁微球菌和WSSV刺激后,LvLec2基因在肝胰脏中的转录表达有明显的变化但表达模式不同。LvLec2可能作为模式识别受体参与了对虾对病原的识别或防御。     

Histological and Histochemical Analyses of the Cuttlebone Sac of the Golden Cuttlefish Sepia esculenta

The secretion function of mantle is closely related to shell formation in some bivalves and gastropods. Up to now, few researches have been reported for cuttlebone formation in the class Cephalopoda. In this study, the structure and secretion function of cuttlebone sac of the golden cuttlefish Sepia esculenta was analyzed using the histological and histochemical methods. The results showed that high and columnar cells located in sac epithelium, and flat cells existed near the base membrane. A lot of fibroblasts were found in the lateral mantle collective tissue. Some mucus, mucopolysaccharide and alkaline phosphatase (ALP) were found in the sac. The ultrastructural characteristics of Quasi-connective-tissue-calcium cells (QCTCC) were observed using a transmission electron microscope (TEM). The relationship between cuttlebone sac secretion function and shell formation was discussed.     

Non-specific immune response of bullfrog <Emphasis Type="Italic">Rana catesbeiana</Emphasis> to intraperitoneal injection of bacterium <Emphasis Type="Italic">Aeromonas hydrophila</Emphasis>

Non-specific immune response of bullfrog Rana catesbeiana to pathogenic Aeromonas hydrophila was studied to 60 individuals in two groups. Each bullfrog in bacterium-injected group was injected intraperitoneally （i.p.） with 0.2 ml bacterial suspension at a density of 5.2 × 10^6 CFU/ml, while each one in control group injected i.p. with 0.2 ml sterile saline solution （0.85%, w/v）. Three bullfrogs in both groups were sampled at 0, 1, 3, 7, 11, 15 and 20 days post-injection （dpi） for the evaluation of non-specific immune parameters. It was observed that intraperitoneal injection of A. hydrophila significantly increased the number of leucocytes and that of NBT-positive cells in peripheral blood. Significant increases in serum bactericidal activity and serum acid phosphatase activity were also observed in the bacterium-injected frogs when compared with those in the control group. However, a significant reduction was detected in vitro in phagocytosis activity of peripheral blood phagocytes. No significant difference in changes in the number of peripheral erythrocytes, serum superoxide dismutase （SOD） activity, and lysozyme activity was detected between the two groups. It is suggested that bullfrogs may produce a series of non-specific immune reactions in response to the A. hydrophila infection.     

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒衣壳蛋白基因的克隆表达及抗体制备

本文根据GenBank登录的对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的全基因组序列(NC-002190),设计出主要结构蛋白基因的相应引物,从厦门发病的对虾中,提取DNA,以此为模板,利用PCR扩增目的基因.再将目的基因分别与pGEX-6p1载体和pET-28a载体连接,构建重组表达载体pGEX-Ⅳ、pET-Ⅳ,重组子经酶切和测序鉴定后导入表达型大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测,大小约为62KDa和41KDa,与预测大小一致.将pET-Ⅳ表达重组蛋白经纯化,免疫小鼠,Western免疫印迹反应结果表明其抗体均可与pGEX-Ⅳ和pET-Ⅳ表达的蛋白发生特异性反应.本研究的结果为对虾IHHNV的快速检测及其免疫提供了研究基础.