南极冰藻Chlamydomonas L4的RPS5基因的获得及其在分类中的作用

通过对南极冰藻L4(Chlamydomonas L4)cDNA文库的筛选,克隆出一个具有5'和3'非编码区的40S核糖体蛋白S5(RPS5)全长基因序列.通过与GenBank中日本凋毛藻、拟南芥、果蝇、斑马鱼、非洲爪蟾、人等物种的同源基因或ESTs序列比对,得到了根据RPS5基因的序列相似性绘制的系统分类树,其符合传统的物种分类系统.证明了通过持家基因的一种--RPS5基因的序列相似性进行分子分类学研究具有可行性.     

南极阿德雷岛不同基底中真菌的分离培养及初步鉴定

为了探索南极真菌的多样性,进一步揭示其生态学角色和筛选有特定酶活性菌株,本研究对中国第27次南极科学考察采集自阿德雷岛的6份样品进行了真菌的分离培养及其胞外酶活性测定。从6份样品中共分离得到168株真菌,其中大型海藻腐烂物样品中分离到的真菌种类和数量最多,占所分离菌株总数的34.6%;对选取的15株代表菌株进行了真菌ITS1-5.8S-ITS2序列鉴定,结果表明它们分属于4个纲,8个属,其中青霉属5株,假散囊菌属、地丝菌属和枝孢属各2株,生赤壳属、曲霉属、出芽短梗霉属和unclassified Onygenales各 1株,该结果表明南极地区具有丰富的真菌物种多样性,其优势类群青霉菌。胞外酶测定显示产淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶产生菌分别占供试菌株的64.6%、45.1%、14.6%,产纤维素酶的菌株可能在南极物质能量循环中扮演着重要角色。     

低温脂肪酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达

通过PCR技术扩增得到南极适冷菌低温脂肪酶基因lip-948,将其与表达载体pPIC9K连接后转化巴斯德毕赤酵母GS115,通过筛选得到高效表达低温脂肪酶的酵母菌株,该菌株发酵48 h后上清液中脂肪酶活力达到27.5 U·mL-1,普遍高于其他细菌低温脂肪酶在毕赤酵母中的表达活性.     

四片藻利用无机碳和氮源生长的研究

研究了四片藻 (Tetraselmissp.)利用无机碳、氮源生长的情况 ,结果表明 ,四片藻以利用乙酸盐和脲生长最好 ,其最佳浓度分别为 1 .2g·L- 1 和 0 .6g·L- 1 。以总脂和脂肪酸组成为例 ,比较了基本培养基、有机碳、氮源培养基和无机碳、氮源培养基对四片藻生长和生化组成的影响 ,结果表明 ,在光培养条件下 ,上述各培养基对四片藻生长的影响差别很大 ,培养 7d ,有机和无机碳、氮源培养基中的细胞浓度分别为基本培养基中细胞浓度的 3.2倍和 2 .4倍 ;总脂含量以添加有机或无机碳、氮源培养基的较高 ,分别占细胞干重的 9.7%和 1 0 .3 % ;上述各培养基对脂肪酸组成与含量的影响差别不大。     

海蓬子种子营养成分分析及制备共轭亚油酸的研究

分析了盐生植物——海蓬子种子的营养成分，并利用其种子油制备共轭亚油酸。研究结果表明：海蓬子种子蛋白质含量为42．59％，高于大豆和其它蛋白质植物；氨基酸组分较齐全，优于鸡蛋蛋白。种子油不饱和脂肪酸含量高，为89．77％，其中亚油酸为73．63％，组成类似红花油，有很高的营养保健功能。用种子油制备共轭亚油酸，亚油酸转化为共轭亚油酸的转化率达到86．07％，共轭亚油酸含量将近70％，海蓬子种子油可制成优质食用油，也可作为制备共轭亚油酸的原料。     

复合酶对卡德藻溶壁效果的研究

早在１８９２年 ,Ｋｌｅｒｃｋｅｒ就用机械法从藻类中分离到原生质体。该法靠手工操作 ,难度非常大 ,原生质体的得率非常少 ,费时费力。１９６０年 ,英国Ｃｏｏｋｉｎｇ首先采用酶解法从番茄幼苗根尖中的细胞用纤维素酶把原生质体分离出来 ,从而开创了酶法大量获得原生质体的新时期。由于此法的创立 ,才使原生质体培养、融合、转化等的一系列研究得到很大的发展。尽管该技术被应用于陆生植物已有很长时间 ,但由于海藻多样独特的细胞壁组成和结构 ,其应用仍处于发展阶段。海洋微藻类因其结构简单和易于培养等特点 ,成为原生质体制备、细胞融…     

南极芽孢杆菌Bacillus sp.107生长特性及抑制植物病原真菌的研究

从南极海泥中筛选获得对植物病原真菌有抑制作用的芽孢杆菌Bacillus sp.107,以常见植物病原真菌为主要指示菌,测定菌株发酵上清液的抑菌谱;研究温度、NaCl质量分数和初始pH值对其生长和抑菌活性的影响,并测定菌株发酵液对黄瓜白粉病的防治作用.结果表明,芽孢杆菌Bacillus sp.107发酵上清液对常见植物病...     

分子伴侣共表达对低温脂肪酶Lip-837异源可溶性表达的影响

将南极嗜冷菌Moritella sp.2-5-10-1的低温脂肪酶基因Lip-837克隆到表达载体pCold Ⅲ中,成功构建了重组质粒pColdⅢ+Lip-837,并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3).SDS-PAGE实验结果表明,实现了该基因在E.coli的异源表达,且其表达量达到细胞总蛋白的39%;但表达...     

南极菌Psychrobacter sp.B-3胞外多糖化学特征及其对番茄抗氧化酶的诱导作用研究

以B-3多糖诱导番茄叶,采用试剂盒测定其对番茄叶抗氧化酶活性的影响,并对南极茵B-3胞外糖的分子量、单糖组成等化学特征进行了初步分析.结果表明,不同质量浓度的B-3在诱导不同时间后,均能提高番茄各抗氧化酶的活性.0.5％的B-3多糖诱导24 h过氧化氢酶(CAT)活性最高;0.5％的B-3多糖作用48h对超氧化物歧化酶...     

Purification and characterization of cold-active endo-1,4-β-glucanase produced by Pseudoalteromonas sp. AN545 from Antarctica

A bacterium hydrolyzing carboxymethylcellulose, isolated from Antarctic sea ice, was identified as Pseudoalteromonas sp. based on 16S rDNA gene sequences and named as Pseudoalteromonas sp. AN545. The extracellular endo-1,4-β-glucanase AN-1 was purified successively by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Sepharose ion exchange chromatography and Sephadex G-75 gel filtration chromatography. The molecular mass of AN-1 was estimated to be 47.5 kDa utilizing SDS-PAGE and gel chromatography analysis. AN-1 could hydrolyze caboxymethylcellulose, avicel and β-glucan, but not cellobiose, xylan and p-Nitrophenyl-β-D-glucopyranoside. The optimal temperature and pH for the β-glucanase activity of AN-1 were determined to be at 30°C and pH 6.0, respectively. AN-1 was stable at acidic solutions of pH 5.0-6.5 and temperatures below 30°C for 1 h. Moreover, the specific activity was enhanced by Ca2+ and Mg2+, and inhibited by Cu2+. The kinetic parameters Michaelis constant (Km) and maximum velocity (Vmax) of AN-1 were 3.96 mg/mL and 6.06×10-2 mg/(min·mL), respectively.