6种帘蛤科贝类及4个地理种群文蛤线粒体COI基因片段序列分析

对文蛤(Meretrix meretrix L.,1758)、青蛤(Cyclina sinensis G.,1791)、硬壳蛤(Mercenaria mercenaria L.,1758)、江户布目蛤(Protothaca jedoensis L.,1874)、薄片镜蛤(Dosinia corrugata R.,1850)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum A.,1850)6种帘蛤科贝类和4个地理种群文蛤(大连、连云港、湛江、防城港)的细胞色素c氧化酶亚基I(COI)基因片段的核苷酸序列进行了分析,以探讨这一序列在种质鉴定、种群遗传结构和分子系统发生研究中的应用价值.测序结果表明,所有物种扩增片段长度均为709 bp,序列A+T含量(62.2%~67.6%)明显高于GC含量.物种间共有变异位点311个,其中简约信息位点202个;文蛤4个地理种群间共有变异位点46个,其中简约信息位点2个.此区段共编码235个氨基酸,种间共有氨基酸变异位点85个;文蛤种群间只有1个氨基酸变异位点.以COI基因片段序列为标记,用大竹蛏(Solen grandis)作外群,构建了帘蛤科贝类的系统发生树,其拓扑结构显示4个地理种群文蛤首先聚为1个单元,然后与青蛤聚在一起,最后所有帘蛤科物种聚为一枝,与外群相区别,其结果与传统形态分类基本一致,说明COI基因适合作为该科贝类种群遗传结构和系统发生研究的分子标记.     

山东沿海菲律宾蛤仔不同地理群体遗传多样性的AFLP 分析

利用AFLP技术对山东沿海菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)4个野生群体(乳山、无棣、牟平、即墨)进行了遗传多样性分析。采用6对引物组合对4个群体进行扩增,共得到356个位点,乳山群体、无棣群体、牟平群体和即墨群体的多态位点比例依次为74.40%、70.50%、72.80%、74.70%,具有较高的遗传多样性水平。其中,即墨群体多态性比例最高,无棣群体多态性比例最低。聚类分析表明,各群体间的遗传距离为0.0263~0.0448,乳山群体和无棣群体间的遗传距离最近(0.0263),两群体首先聚在一起,随后与牟平群体和即墨群体聚在一起。     

两种蛤仔群体遗传多样性的形态参数及AFLP分析

采用多变量形态度量学方法,对大连(DL)、青岛(QD)、厦门(XM)、珠海(ZH)4个菲律宾蛤仔群体和湛江(RV)1个杂色蛤仔群体的形态变异进行了比较研究,建立了群体形态聚类图和形态判别函数,结果较客观地显示了4个菲律宾蛤仔群体之间以及与杂色蛤仔群体之间的差异。利用4对引物组合对菲律宾蛤仔青岛群体与杂色蛤仔湛江群体共48个个体进行了AFLP分析,共得到216个位点,其中特有位点29个,可作为2个物种鉴别的分子标记。两种蛤仔都显示了较高的群体遗传多样性,菲律宾蛤仔群体内遗传相似度为0.6051,杂色蛤仔为0.6882,群体间的平均遗传相似度只有0.2968。群体内香农多样性指数菲律宾蛤仔为0.2526,略高于杂色蛤仔的0.2154。对所有个体聚类分析,同种个体可以很好地聚在一起,没有出现种间的交叉,表明两种蛤仔具有明显的遗传差异。     

山东沿海菲律宾蛤仔不同地理群体遗传多样性的AFLP分析

利用AFLP技术对山东沿海菲律宾蛤仔（Ruditapes philippinarum）4个野生群体（乳山、无棣、牟平、即墨）进行了遗传多样性分析。采用6对引物组合对4个群体进行扩增,共得到356个位点,乳山群体、无棣群体、牟平群体和即墨群体的多态位点比例依次为74.40%、70.50%、72.80%、74.70%,具有较高的遗传多样性水平。其中,即墨群体多态性比例最高,无棣群体多态性比例最低。聚类分析表明,各群体间的遗传距离在0.0263～0.0448之间,乳山群体和无棣群体间的遗传距离最近(0.0263),两群体首先聚在一起,随后与牟平群体和即墨群体聚在一起。     

彩虹明樱蛤基因组DNA提取及RAPD扩增的初步研究

对采自浙江温岭的彩虹明樱(Moerella iridescens)养殖群体的DNA提取和RAPD扩增条件进行了研究.从38种随机引物中筛选到重复性好的6种引物分别对11个个体的DNA进行扩增,共产生247个DNA条带(300～1 600 bp),总共检测到43个位点,其中多态位点32个,多态位点比例为74.42%.11个个体间的遗传相似系数在0.553～0.884之间,平均为0.691,个体间的平均遗传距离为0.309.表明该群体的遗传多样性比较丰富,种质资源处于良好状态.     

菲律宾蛤仔不同地理群体生化遗传结构与变异的研究

采用聚丙稀酰胺凝胶电泳技术对福建平潭岛、浙江象山港、江苏海州湾和辽宁辽东湾4个海区菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)野生群体的生化遗传特征进行了分析.结果表明,菲律宾蛤仔4个群体的多态位点比例为62.5%～75.0%,平均杂合度观测值在0.274 3～0.338 7之间,与平均杂合度期望值相近;平均有效等位基因数在1.489 1～1.632 5之间,遗传变异水平较高;杂合子缺失不显著.比较群体间的遗传分化指数和群体每代迁移数发现,平潭岛、象山港和海州湾3个群体间的遗传分化不显著,而辽东湾群体与3个群体间出现遗传差异.聚类分析同样表明,平潭岛群体首先与象山港群体聚类,再与海州湾群体相聚,最后与辽东湾群体相汇.讨论了杂合子缺失不显著原因和群体间遗传分化机制.     

香鱼(Plecoglossus altivelis)养殖群体遗传多样性的AFLP分析及性别特异性分子标记筛选

采用扩增片段长度多态性(AFLP)技术分析了香鱼(Plecoglossus altivelis)养殖群体的遗传多样性,并筛选性别特异性分子标记。结果表明,15对选扩引物组合共扩增到889个位点,其中多态性位点380个,多态率为42.74%;群体Nei氏遗传多样性指数为0.1454,Shannon氏指数I为0.2174。香鱼养殖群体的遗传多样性较丰富,处于中等偏上水平。仅引物组合E-ATG/M-CTG扩增到1条雄性特异性条带,长度为139bp。以该雄性特异性AFLP条带的DNA序列为模板,设计1对特异的PCR引物并在10尾已知性别的香鱼(雌雄各5尾)中扩增检验,结果显示5尾雄鱼均可扩增到目的条带而5尾雌鱼均无扩增。表明该序列是雄性特异性分子标记,可用于鉴别香鱼的遗传性别,并为香鱼的性别决定机制和性别控制研究奠定基础。     

紫扇贝、海湾扇贝及其正反杂交子代群体遗传结构的AFLP分析

本研究应用 AFLP 分子标记技术,对紫扇贝(Argopecten purpuratu, PP)、海湾扇贝(Argopecten irradians, II)、正交子一代(紫扇贝♀×海湾扇贝♂, PI)及反交子一代(海湾扇贝♀×紫扇贝♂, IP)群体的遗传结构进行了分析和比较。用5对AFLP引物扩增得到433个位点,其中多态位点为88.45%;正反交子代中的扩增位点大部分(97.23%)来源于紫扇贝和海湾扇贝;扩增中出现了非孟德尔遗传位点,如紫扇贝和海湾扇贝的部分扩增位点在杂交子代中丢失,正反交子代中出现12个紫扇贝和海湾扇贝中没有的扩增位点;通过多态位点比率、Nei’ s基因多样性、香农式多样性指数、遗传距离和AMOVA分析发现,正反杂交子代之间的遗传分化最小,与紫扇贝和海湾扇贝的遗传分化均显著。     

羊鲍野生群体遗传多样性与分化的研究

运用随机扩增片段长度多态性DNA标记(RAPD)技术对中国海南省英州、安游和亚龙湾海域的3个羊鲍(Haliotis ovina)野生群体进行遗传多样性与分化的研究.利用14个10bp随机引物,在90个个体中共检测到72个位点,其中英州,安游和亚龙湾群体的多态位点数分别为65,61和62个,多态位点百分数(P)分别为90...     

梭鱼人工养殖群体与自然群体的随机扩增多态DNA(RAPD)分析

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,对黄河口海域棱鱼人工养殖群体与自然群体的遗传多样性进行了分析比较,以期由分子水平了解梭鱼的种群遗传多样性背景及人为干涉因素对梭鱼种群遗传多样性造成的影响.选用OPC组20个10碱基对(bp)的随机引物,对采自河北省黄骅市的24尾野生梭鱼和15尾人工养殖梭鱼进行了分析.选出11个扩增效果稳定的引物用于群体分析,扩增结果具有较好的可重复性.11个引物共检出112个位点,其中养殖群体中有94个表现多态,多态比例为83.93%;自然群体在96个位点上表现多态,多态比例为85.71%.经计算,养殖群体的遗传多样性指数为0.2124,自然群体的遗传多样性指数为0.2271;梭鱼两群体间的相似系数为92.82%,遗传距离为0.0718.研究结果表明,目前黄河口海域梭鱼群体的遗传多样性比较丰富,人工养殖过程对其未造成明显的影响,估计这与人工养殖过程中人为干涉因素少(如育苗历史短、亲鱼来源于自然群体、无定向选择和近亲繁殖等)有关.这一结果表明,梭鱼的人工养殖业在黄河口海域有很好的发展前景.     

五种海洋鱼类消化道G细胞的定位

应用胃泌素多克隆抗体和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学方法(SP法),对中华乌塘鳢(Bostrichthys sinensis)、黄鳍鲷(Sparus latus)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)、褐篮子鱼(Sigauns fusces-ens)和大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)消化道胃泌素细胞(G细胞)进行免疫组化鉴别和定位。结果显示:中华乌塘鳢G细胞主要分布在小肠,直肠偶见。黄鳍鲷G细胞仅在小肠发现。牙鲆G细胞大量位于幽门胃和小肠。褐篮子鱼G细胞在幽门盲囊和小肠有少量分布。大弹涂鱼G细胞在贲门胃、幽门胃和小肠均有出现,大量分布于幽门胃。5种鱼类G细胞主要出现在胃和小肠的分布状况,与胃泌素调节胃肠消化吸收的功能相一致。5种鱼类G细胞形态类型多样,提示了胃泌素以不同的内分泌方式参与消化生理过程。     

褐篮子鱼消化道内分泌细胞的鉴别与定位

应用4种兔抗胃肠激素抗体和SABC免疫组织化学方法,对褐篮子鱼(Sigauns fuscesens)消化道中的内分泌细胞进行鉴别和定位。结果表明,Som细胞集中位于食道和胃部;PP细胞在幽门盲囊分布较多,少量分布于小肠和直肠;NPY细胞在幽门盲囊和小肠有少量分布;5-HT细胞在消化道各段均有分布,且数量较多。4种内分泌细胞的数量分布和形态特征存在一定的差异,对其可能的内分泌方式和生理作用进行了讨论。     

黄鳍鲷消化道内分泌细胞的免疫组化定位

应用4种兔抗胃肠激素抗体和SABC免疫组织化学方法,对黄鳍鲷（Sparus latus）消化道中的内分泌细胞进行鉴别和定位。结果表明：PP细胞在幽门盲囊较为丰富,食道和小肠较少。Som细胞在贲门胃分布密度最高,在食道和幽门胃也有较多分布。5-HT细胞主要分布在食道和胃部,在幽门盲囊和小肠数量较少。NPY细胞在消化道各部位均未发现。黄鳍鲷消化道PP、Som和5-HT细胞的数量分布和形态特征存在一定的差异,为参与不同的消化生理作用提供了形态学依据。     

Aroclor 1254对大弹涂鱼精巢线粒体氧化应激的影响

大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)是盛产于我国东南沿海滩涂的两栖经济鱼类。分别用1,2,4μg/g的Aroclor 1254对生殖期雄性大弹涂鱼腹腔注射28 d后,检测大弹涂鱼精巢与储精囊的绝对与相对重量,并检测其精巢线粒体氧化水平、抗氧化酶活性与非酶类抗氧化剂含量。结果显示,1μg/g Aroclor1254剂量组中大弹涂鱼精巢、储精囊绝对重量与对照组均无显著差异(p=0.90),而较高剂量组(2,4μg/g Aroclor1254)上述指标均显著低于对照组(p0.05);相对重量指标中仅4μg/g Aroclor1254剂量组的储精囊相对重量显著低于对照组(p0.05)。此外,Aroclor1254使精巢抗氧化防御能力降低,三个处理组的SOD活性与GSH含量均比对照显著下降(p0.05),较高剂量组CAT,GPx,GR活性及Vit C含量也均显著低于对照(p0.05);而H2O2产量与脂质过氧化反应显著增加,1,2和4μg/g剂量组中MDA含量分别为对照组的1.12,1.52和1.80倍,H2O2含量分别为对照组的1.20,1.40和1.75倍,与Aroclor1254剂量呈现明显相关性。表明Aroclor1254可以诱导精巢线粒体的氧化应激对精巢产生毒性,影响雄性大弹涂鱼生殖机能。     

Effects of Aroclor 1254 on reproductive organ weight, sperm quality and testicular mitochondria oxidative stress of Boleophthalmus pectinirostris

Boleophthalmus pectinirostris is an amphibious economic fish and wildly distributed in the southeast coast of China. In this study, Aroclor 1254 was intraperitoneally injected into B. pectinirostris with 1, 2 and 4 μg/(g·d) for 28 d to assay the reproductive organ weight, the sperm quality (sperm concentration and motility), and the testicular mitochondrial testicular mitochondria oxidative stress. The results show that the sperm number and motility in seminal vesicles, the absolute weight of testes and seminal vesicles of B. pectinirostris treated with 2 and 4 μg/(g·d) Aroclor 1254 decreased significantly as compared to the controls (p <0.05), while those treated with 1 μg/(g·d) Aroclor 1254 had no significant effects on these indictors. For the relative weight of reproductive organs, significant reduction (p <0.05) was only observed in the seminal vesicles of B. pectinirostris treated with 4 μg/(g·d). SOD activities and GSH levels in all the Aroclor 1254 treatments were significantly lower than those of the controls (p <0.05). The activities of CAT, GPx, GR and the levels of Vit C also decreased significantly in comparison with the controls (p <0.05) at the higher dose of 2 and 4 μg/(g·d) Aroclor 1254 treatments. In addition, both H₂O₂ level and MDA content in testicular mitochondria of B. pectinirostris had a close correlation with Aroclor 1254 dosage, and were significantly higher than the controls (p <0.05). Those indicate that Aroclor 1254 can induce the oxidative stress of testicular mitochondria, and impair the reproductive function of male B. pectinirostris.     

Growth characteristics,pigmentation, and the identificaton of whitebait (galaxias spp., Salmonoidea)

Definitions are given for stages in the development of five species of Galaxias, family Galaxiidae, which have marine larvae.

Larvae of Galaxias maculates attenuates and G. brevipinnis are large, and those of G. fasciatus relatively small as they enter fresh water from the sea. Development as whitebait involves shrinkage by about 25% in total length; the head length, considered separately, shrinks by about 15%. The ratio of standard length to head length alters from the larval to the adult value before positive growth recommences. These features are probably similar for G. postvectis and G. argenteus

Minimum observed pigmentation is described for the late larvae of G m. attenuates, G. brevipinnis, and G. fasciatus and for early whitebait of these and of G. postvectis and G. argenteus Subsequent development of melanophores and of colour pattern is described and figured. Large melano‐phores along the lateral line distinguish early whitebait of G. m. attenuates, but no distinguishing feature of pigmentation has been found in other species until the juvenile pattern is apparent. This pattern is characteristic for each species, and it persists in adult G. m. attenuates. G. argenteus has distinct juvenile and adult patterns, the latter being developed in a second, superficial, layer of pigment cells. Adult G. postvectis develop a distinctive fin colour pattern unlike other New ‐Zealand Galaxias; the superficial pigment layer is without definite pattern. In adult G. brevipinnis this layer resembles the persistent juvenile pattern and the two layers combined give a reticulate appearance. In G. fasciatus the juvenile pattern persists and develops as the fish grow; the superficial pigment layer is present in adults but is not usually apparent.

Until now positive identification of whitebait has depended on colour pattern. Recently recorded identifications of unpigmented whitebait are shown to be misleading. A key is given for the identification of early and late whitebait using absolute measurements as an important character.     

裸体方格星虫消化道组织学研究

报道了裸体方格星虫(Sipunculus nudus Linnaeus,1766)消化道各部的形态、组织学结构.结果表明:裸体方格星虫消化道分为口、咽、食道、肠、盲肠、直肠和肛门.肠是消化道的主体,约为躯干长的4倍,通过固肠肌与体壁相连.肠由两个长短不一的肠环组成,肠环下降支和上升支相互盘绕,使肠呈双螺旋状.消化道管壁由黏膜、黏膜下层、肌层和外膜组成,消化道黏膜上皮主要由柱状细胞组成,但消化道的不同部位,柱状细胞的类型和分布不同.除盲肠外,黏膜均向腔面褶成皱襞.肠的各段中均有"V"字型纤毛沟的存在.此外,皱襞的形态、黏膜下层和肌层的厚度等在消化道各部也存在差异.研究表明裸体方格星虫消化道结构与其食性是相适应的.     

Environmental effects on the recruitment variability of nursery species

The recruitment variability of the marine fish species Dicentrarchus labrax, Platichthys flesus and Solea solea was evaluated in the Mondego estuary (Portugal) from 2003 to 2007. The relationships between sea surface temperature, NAO index, coastal wind speed and direction, precipitation and river runoff prior to the estuarine colonization and the abundance of 0-group fish were evaluated using gamma-based Generalized Linear Models. Dicentrarchus labrax and P. flesus 0-group decreased in abundance towards the end of the study period, while S. solea, despite low abundance in 2004, increased in abundance in 2007. For D. labrax, river runoff, precipitation and east–west wind were significant; for P. flesus, precipitation, river runoff and both north–south and east–west wind components were significant parameters, while for S. solea only river runoff was important. Results were compared with recent projections for climate change scenarios, to evaluate their effects on future recruitment levels.     

黑鲷消化系统的胚后发育研究

于１９９５年３－６月,在中国科学院海洋研究所养殖池采集养殖黑鲷的各期仔鱼、稚鱼和幼鱼样品,利用组织切片技术,综合外观特征,在显微和电镜水平对其消化系统的发育特点和细胞结构等作了系统观察研究。结果表明,黑鲷仔、稚、幼鱼消化系统的发育煌阶段性,胃、肠、肝、胰和幽门盲囊在仔鱼期开始发育,后逐渐成熟。仔鱼在饵料转换期内的死亡率较高,主要原因是其消化系统的结构和功能尚不完善。饵料的种类和适口性亦可直接影响仔     

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)肠道和肝胰腺5-羟色胺(5-HT)和5-羟色胺受体2(5-HTR2)的定位研究

肠道和肝胰腺是中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)重要的消化器官,本文运用组织学技术测量了中肠和后肠长度,并对肠道长与体长进行相关性分析。应用免疫组化技术对5-HT和5-HT受体2进行组织定位和计数。结果表明:(1)中华绒螯蟹的肠道长与体长接近,两者之间呈极显著正相关(P0.01)。后肠长度约为中肠的2倍;(2)5-HT和5-HT受体2在中肠和后肠中的组织定位和数量相似,均分布于黏膜上皮细胞间和肌层与外膜交界处,亦见于后肠的固有膜和黏膜下层与肌层交界处,在肠球外膜中也有大量分布;(3)5-HT和5-HT受体2阳性物质在肝胰腺的四种细胞的胞核中均有分布,在F细胞的胞质中也有分布。5-HT和5-HT受体2在中华绒螯蟹肠道和肝胰腺组织中的分布规律一致,表明中华绒螯蟹消化道5-HT发挥生理功能可能与5-HT受体2有关。此外,5-HT和5-HT受体2在后肠近肌细胞分布的特点可能与肠道收缩有关。后肠在中华绒螯蟹消化生理中的作用应引起重视。