温度休克诱导长牡蛎三倍体的研究

本文采用低温２～９℃和高温３５～３９℃温度休克法、在受精后１０～２５ｍｉｎ，进行１０～２５ｍｉｎ处理，诱导牡蛎三倍体。结果表明：各处理组都有不同程度的三倍体产生，其中受精后２０ｍｉｎ开始在４～５℃下处理１５ｍｉｎ诱导三倍体效果最好，诱导率为６８×１０＾－２，幼贝三倍体率为６０．５×１０＾－２，生长速度处理组壳高明显超过对照组，而壳长生长和幼虫死亡率无明显差异。     

温度休克诱导长牡蛎三倍体的研究

本文采用低温２～９℃和高温３５～３９℃温度休克法，在受精后１０～２５ｍｉｎ进行１０～２５ｍｉｎ处理，诱导牡蛎三倍体。结果表明：各处理组都有不同程度的三倍体产生，其中受精后２０ｍｉｎ开始在４～５℃下处理１５ｍｉｎ诱导三倍体效果最好，诱导率为６８×１０－２，幼贝三倍体率为６０．５×１０－２，生长速度处理组壳高明显超过对照组，而壳长生长和幼虫死亡率无明显差异。     

低温诱导太平洋牡蛎产生三倍体

用低温休克法诱导太平洋牡蛎产生三倍体。实验结果表明,２￣７℃的低温均可获得三倍体,其中４￣５℃的效果较好,最优水平组合的,处理温度为４￣５℃,处理时刻为受精后１５ｍｉｎ,处理持续时间为１５ｍｉｎ,最高三倍体率为３６．８％,影响三倍体诱导率的３因素的顺序为处理持续时间→处理时刻→处理温度。     

低温诱导太平洋牡蛎产生三倍体

用低温休克法诱导太平洋牡蛎产生三倍体。实验结果表明,２～７℃的低温均可获 得三倍体,其中４～５℃的效果较好,最优水平组合为,处理温度为４～５℃,处理时刻为受精 后１５ｍｉｎ,处理持续时间为１５ｍｉｎ,最高三倍体率为３６．８％。影响三倍体诱导率的３因素的顺序为处理持续时间→处理时刻→处理温度。     

黑鲷三倍体的人工诱导研究

分别于1989年3—6月、1990年3—5月在天津和青岛两地采用冷、热休克法对黑鲷进行三倍体的人工诱导研究。结果表明,冷休克法诱导三倍体的效果好于热休克法,其最适诱导条件为卵子在受精后5min,温度为3—4℃的海水中处理10—20min,三倍体诱导率最高可达50.35％;正交试验证明,三倍体率受冷、热休克法的三因素影响程度的顺序由大到小依次为,处理时间、处理时刻、处理温度;黑鲷染色体数目:2n=48,3n=72,它们的染色体组型也同时获得。     

静水压休克诱导大黄鱼三倍体

采用静水压休克方法诱导大黄鱼三倍体，在水温20-26℃条件下，卵受精后2min用450kg/cm^2的静水压处理大黄鱼受精卵2min，三倍体诱导率65.6%，孵化率相对对照组达70%。文中还就处理条件与三倍体诱导率和胚胎存活率关系进行了讨论。     

真鲷三倍体诱导初步研究

在南鲷Ｐａｇｒｏｓｏｍｕｓ ｍａｊｏｒ三倍体诱导研究中，对染色体倍数的分析表明，受精卵受精５ｍｉｎ后，在１．５℃冰水中处理５ｍｉｎ可获得１７％的三倍体诱导率和２８％的嵌合体比率，染色体数分别是：２Ｎ＝４８，３Ｎ＝７２，嵌合体５０－６８。仔鱼红血细胞测量和组织切片分析显示，三倍体和二倍体的红血细胞核直径，视网膜神经节细胞核直径物中脑细胞核直径大小存在差异，其比率分别是１．４２，１．３５和１．４１，这     

诱导三倍体太平洋牡蛎群体发育过程中三倍体率的变化

借助染色体计数和流式细胞计数计对 6 - DMAP处理和冷休克两种诱导方法获得太平洋牡蛎 (Crassostrea gigas)三倍体群体在各个发育时期三倍体率进行了系统检测。结果发现 ,在 4～ 8细胞时期 ,6 - DMAP诱导三倍体率为 75 % ,冷休克诱导三倍体率为 5 0 % ,在发育至 D形幼虫期和稚贝期 ,两类三倍体群体的三倍体率均有所下降。如从 4～ 8细胞期发育至稚贝期 ,冷休克诱导群体下降了 5 3.0 8%以上 ,6 - DMAP诱导群体三倍体率下降了 2 7.36 %。养殖一年后 ,6 - DMAP诱导群体三倍体率仍保持在 6 0 %以上 ,而冷休克诱导群体三倍体率已下降至不足 10 %。这一结果说明 ,利用 6 - DMAP诱导来获得三倍体是比较理想的方法     

两种方法诱导太平洋牡蛎三倍体在生产上的应用效果

本文就太平洋牡蛎三倍体育苗中，常用的低温休克法和6－DMAP法进行了生产性试验比较。其结果为：在三倍体诱导率方面，低温休克的三倍体率低且不稳定，6－DMAP法诱导三倍体率高且稳定；在生长方面，低温休克法诱导的三倍体在养成期的生长和成活均差于6－DMAP法诱导的，三倍体率差异明显，但在幼虫期二者差异不显著。     

杂色鲍和九孔鲍三倍体的化学诱导

本文首次报道了用化学药物法（ＣＢ、咖啡因以及高ＰＨ高钙溶液）休克杂色鲍和九孔鲍受粗卵诱导产生三倍体的试验结果。结果表明,用ＣＢ诱导杂色鲍,三倍体诱导率高达５９．０￣７６．２％;用咖啡因诱导杂色鲍和九孔鲍,三倍体导率低,分别为３０￣２０％。本就它们在诱导中的作用机理进行了讨论。     

大菱鲆四倍体的人工诱导研究

大菱鲆(Scophthalmus maximus)为我国北方沿海主要的海水经济品种,其四倍体的获得对种质改良和三倍体的规模化生产具有重要的价值。到目前为止,有关大菱鲆四倍体的人工诱导尚未见报道。本文采用静水压抑制受精卵卵裂的方法,进行了四倍体诱导条件的摸索。结果显示,在14.8—15.5?C培育时,在卵裂前15min用67.5MPa处理6min可获得较好的诱导效果,其孵化率最高可达72%,染色体制片计数法计算其原肠胚期诱导率可达70%,初孵仔鱼流仪检测诱导率最高为73%。诱导组胚胎发育与对照组在形态学上基本一致,仅发育孵化时间比对照组略有滞后。     

三倍体牙鲆的核型证明

于1990，1993 - 1994年以捕自青岛近海的牙鲆亲鱼，采用冷休克法（0－4°C）进行多倍体的人工诱导实验，以期掌握牙鲆细胞遗传学特征和研究遗传育种方法。通过实验得到了三倍体牙鲆并进行培育。在原肠胚期采用空气干燥法、Giemsa染色获得正常二倍体、三倍体的染色体制片。镜检得，牙鲆二倍体染色体以2n=48，均为端部着丝点染色体，核型为24t，其管数NF=48；三倍体的染色体3n=72，也都为端部着丝点染色体，其臂数NF=72，并依据二倍体的枝型得出了三倍体的核型图。     

Cytochalasin B induced triploidy in Penaeus chinensis

ＣｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢｉｎｄｕｃｅｄｔｒｉｐｌｏｉｄｙｉｎＰｅｎａｅｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ￥ＢａｏＺｈｅｎｍｉｎ，ＺｈａｎｇＱｕａｎｑｉ，ＷａｎｇＨａｉａｎｄＤａｉＪｉｘｕｎ（ＲｅｃｅｉｖｅｄＡｐｒｉｌ５，１９９３；ａｃｃｅｐｔｅｄＡｕｇｕｓｔ１...     

杂交与三倍体诱导对海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫的复合作用

基于2×2交叉实验设计,通过杂交和6-DMAP等诱导处理,构建了二倍体自交组、二倍体杂交组、三倍体诱导自交组和三倍体诱导杂交组等四个实验组家系,探讨了海湾扇贝(Argopecten irradians)幼虫期生长及存活的杂种优势和6-DMAP诱导处理效应的复合作用。分别计算各家系的孵化率,测定了各家系幼虫期第1、5、10天幼虫个体的壳长以及第5天和第10天各家系幼虫的存活率。利用一般线性模型(general linear model (GLM))计算表型变量的原因方差组分,评估了杂交和6-DMAP处理对扇贝幼虫生长和存活的影响。结果显示:6-DMAP处理组孵化率要显著低于非处理实验组(P0.05)。三倍体诱导自交组第5天幼虫存活率显著低于其他组(P0.05),到第10天三倍体自交组全部死亡。三倍体诱导杂交组第10天存活率低于二倍体组但不显著(P0.05)。在第1天幼虫生长中,三倍体诱导杂交组幼虫壳长显著小于其他组(P0.05),第5天幼虫生长中,三倍体诱导杂交组壳长则显著大于其他组,而三倍体诱导自交组则显著小于其他组(P0.05)。在第10天幼虫生长中,二倍体自交组显著小于二倍体杂交组和三倍体诱导杂交组组(P0.05)。上述结果显示扇贝幼虫生长期的杂种优势和三倍体诱导效应间存在一定相互作用。     

香港巨牡蛎♀×太平洋牡蛎♂异源三倍体的初步研究

本文以香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和太平洋牡蛎(C.gigas)为研究对象,进行牡蛎异源三倍体研究试验。在水温25℃条件下,香港巨牡蛎剥离卵子于海水中浸泡促熟1.5h后,与太平洋牡蛎精子受精,获得最高卵裂率为(24.40±3.79)%。受精后20min,采用盐度为10的低渗海水处理杂交受精卵25min,可获得68.65%的异源三倍体幼虫,孵化率为12.71%。异源三倍体幼虫的存活率和生长率均未表现出优势。受精后第9天,异源三倍体幼虫的存活率仅为(0.116±0.023)%,平均壳长为(103.50±0.85)(m;对照组的存活率和壳长分别为(42.17±2.74)%和(123.25±8.60)μm。幼虫在附着变态前死亡。     

香港牡蛎二倍体及三倍体幼虫生物学特征比较

为了评估香港牡蛎二倍体及三倍体幼虫生物学特征,于2013~2015年,在湛江和北海两地比较了二倍体及三倍体幼虫生长、存活及变态差异,计算了三倍体优势率,评估了倍性与环境效应互作对其表型性状的影响。结果表明:三倍体D形幼虫显著大于二倍体幼虫,之后,伴随着个体增长,生长优势逐渐增大,15日龄时的三倍体优势率为8.9%~9.1%。三倍体幼虫存活力与二倍体相当,未出现大量致死现象。三倍体变态规格显著大于二倍体,其优势率为5.1%~5.3%;三倍体变态时间显著低于二倍体,但其变态率与二倍体相当,不存在显著差异(p>0.05)。经过双因子分析模型的方差分析检测,发现倍性和环境效应都会对香港牡蛎幼虫生长产生显著影响(p<0.001),环境是影响幼虫存活率及变态的主要因子(p<0.05)。     

Improvement of polyploidy induction in Eriocheir sinensis

An incubating temperature of 15℃ is used to induce triploidy in Eriocheir sinensis through inhibition of the release of polar body I1, and that of 18℃ to induce tetraploidy through inhibition of the first cleavage. Flow cytometry is used to identify the ploidy in different developmental stages. For induction of triploidy in fertilized eggs in vitro, the highest induction rate observed in blastula by cytochalasin B, 6-DMAP and KC1 is 49.1%, 51.7% and 77.5%, respectively. In the KC1 treatment of pregnant crabs with the fertilized eggs, the highest triploid induction rate observed in the zoea is 85.3%. For induction of tetraploidy, the highest induction rate observed in the blastula by cytochaslasin B, 6-DMAP and KC1 is 50.3%, 54.9% and 79.8% respectively. In the KC1 treatment of pregnant crabs with the fertilized eggs, the highest induction rate in zoea is 27.3%. Through this study such difficulty as in vitro culture is overcome. Triploid zoea Eriocheir sinensis has been developed for the fh‘st time. The induction rate of tetraploid zoea has also been greatly improved.     

中华绒螯蟹多倍体诱导技术改进

采用抑制第二极体排放的方式对15℃孵育的中华绒螯蟹自然受精卵人工诱导三倍体,通过抑制第一次卵裂对18℃孵育的自然受精卵人工诱导四倍体,应用流式细胞仪进行倍性鉴定.分别使用CB,6-DMAP和KCl三种试剂对受精卵处理,发育至囊胚期检测,获得的最高三倍体诱导率依次是49.1%,51.7%和77.5%,获得的最高四倍体诱导率依次是50.3%,54.9%和79.8%.使用KCl试剂对抱卵蟹诱导处理,孵出潘状幼体检测,最高三倍体诱导率为85.3%,最高四倍体诱导率为27.3%.克服了以往三倍体诱导中离体培养的困难,首次获得了中华绒螯蟹三倍体潘状幼体,并极大提高了潘状幼体阶段四倍体诱导率.     

平鲷雌核发育二倍体的人工诱导

平鲷(Rhabolosargus sarba)养殖群体具有雌性生长优势的特点.应用冷休克方法进行平鲷雌核发育二倍体人工诱导,采用高温消毒的自然海水为精子稀释液,精液经强度为700μW/(cm2·s)的紫外线(UV)照射100 s,染色体遗传物质失活,卵子经激活后,可以获得95%～100%单倍体胚胎.实验结果表明:在卵子激活后5 min进行冷休克,温度0～8℃,处理时间持续15min,雌核发育二倍体的受精率达71.3%～82.7%,孵化率为24.7%～36.3%,2～6℃为适宜冷休克温度,此范围内的温度对雌核发育二倍体的受精率和孵化率没有显著影响(P>0.05),而与0,1和8℃实验组的受精率和孵化率差异均显著(P<0.05);在冷休克温度为3℃、持续时间为15 min的条件下,初始冷休克时间在4～6 min之间的受精率和孵化率均较高,分别达到60.0%～67.1%和30.6%～36.5%,其组间受精率和孵化率没有显著差异(P>0.05),而与其他实验组的孵化率存在显著差异(P<0.05);冷休克持续时间以11～19 min为宜,受精率和孵化率分别为46.9%～65.8%和31.7%～42.4%,在此时间内,冷休克持续时间对平鲷的雌核发育二倍体受精率和孵化率影响不显著(P>0.05).选用冷休克温度、初始冷休克时间和持续时间分别为3℃,5和15 min作为平鲷雌核发育二倍体的诱导条件是显著有效的.