酚类污染物对菲律宾蛤仔抗氧化和解毒系统相关酶活性的影响

壬基酚、辛基酚、二氯酚和双酚A是水环境中普遍存在的酚类污染物,由于其内分泌干扰活性和致癌性近年来受到广泛的关注.本研究以菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)为受试生物,研究4种典型酚类污染物暴露对其内脏组织和鳃组织中抗氧化酶包括超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)以及解毒酶谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性的影响.研究结果表明:壬基酚低浓度处理组(0.05～0.2 mg/L)3种酶活性无显著变化,高浓度处理组(0.4 mg/L),SOD、CAT和GST 3种酶活性均受到显著抑制,抑制率分别为56.6％,59.0％和35.5％.在实验浓度范围(0.05～0.4 mg/L)内,二氯酚能够显著抑制内脏组织CAT活性,双酚A能够显著抑制鳃组织GST活性.3种酶活性变化对于酚类污染物的响应呈现较好的规律性,因此可以作为生物标志物联合指示水体中的酚类污染.     

冬季胶州湾及其周边河流中酚类环境激素的分布特征

分析青岛胶州湾及其临近河流中丁基酚、辛基酚、二氯酚和双酚A等环境激素的污染特征。结果表明,胶州湾水体中上述4种污染物的浓度分别为<1.2~28.0,<1.2~16.1,<2.7~9.5和<3.8~161.5ng/L;胶州湾沉积物中上述4种污染物的浓度分别为<1.0~1.4,<1.0~2.8,<0.8~1.6和<0.7~5.4ng/g。胶州湾内上述污染物均呈现东高西低的分布格局,说明湾内污染与沿岸工业分布和河流输入密切相关。胶州湾周围河流中上述污染物浓度远远高于湾内,其中墨水河污染最严重。文中同时讨论了酚类环境激素对当地生物的潜在危害。     

17 β-雌二醇对雄性瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)的雌激素效应

以三峡库区小型经济鱼类瓦氏黄颡鱼雄鱼为对象,研究17β-雌二醇对它的雌激素效应.在不同的温度和剂量条件下测定血清卵黄蛋白原、Ca2+、总磷、无机磷的含量,以及肝胰脏RNA/DNA比率.结果表明,与对照组相比,当水温≥16℃、剂量≥1.0μg/g,以及水温≥19℃、剂量≥0.1μg/g条件下,17 β-雌二醇可诱导雄性瓦氏黄颡鱼产生卵黄蛋白原,而且其水平增加呈明显的剂量依赖;当水温≥16℃、剂量≥1.0μg/g时,血清Ca2+含量极显著增加,呈明显的剂量依赖;试验组血清各种 磷组分增加也呈剂量依赖;17 β-雌二醇也引起肝胰脏代谢指标RNA/DNA比率增加.结果表明,雄性瓦氏黄颡对雌激素有较高的敏感性,加上其体型适中,容易获得等特性,可以作为水环境雌激素内分泌干扰物检测的指示生物.血清卵黄蛋白原与Ca2+可以作为污染水体雌激素内分泌干扰物的检测指标.     

雌二醇、壬基酚和三丁基锡对斑马鱼雌激素响应基因表达的影响

为研究天然雌激素、环境拟雌激素和环境抗雌激素共存条件下的雌激素效应,分别以雌二醇(17β-estradiol, E2)、壬基酚(Nonylphenol, NP)和三丁基锡(Tributyltin, TBT)为代表,采用实时荧光定量PCR和相对定量分析法,测试并分析了3种污染物单独和不同组合联合暴露条件下成年雄性斑马鱼(Danio rerio)肝脏组织中雌激素响应基因vtg1、esr1、esr2a和esr2b mRNA的相对表达情况。结果显示:E2和NP的联合暴露,会显著诱导vtg1和esr1 mRNA的表达,且其相对表达量远高于两者单独暴露时的表达量之和。E2和TBT的联合暴露中,当TBT浓度较高(100 ng/L)而E2浓度较低(10 ng/L)时,TBT能够抑制E2对vtg1和esr1 mRNA表达的诱导作用。NP和TBT的联合暴露,会导致vtg1和esr1 mRNA的相对表达量远小于两者单独暴露时的表达量之和。而在E2、NP和TBT三者共同暴露中,当TBT浓度较高(100 ng/L),且E2和NP浓度较低(E2 10 ng/L, NP 25μg/L)时,TBT能抑制E2和NP对vtg1 mRNA表达的诱导作用。由此可见,不同类型环境雌激素共存条件下的联合效应与各组分的浓度配比有关,本研究结果为探索多种环境雌激素类污染物共存条件下的生物效应和生态风险提供了科学依据。     

17β-雌二醇对雄性瓦氏黄颡鱼（Pelteobagrus vachelli）的雌激素效应水

以三峡库区小型经济鱼类瓦氏黄颡鱼雄鱼为对象，研究17β-雌二醇对它的雌激素效应。在不同的温度和剂量条件下测定血清卵黄蛋白原、Ca^2＋、总磷、无机磷的含量，以及肝胰脏RNA／DNA比率。结果表明，与对照组相比，当水温≥16℃、剂量≥1．0μg／g，以及水温≥19℃、剂量≥0．1μg／g条件下，17β-雌二醇可诱导雄性瓦氏黄颡鱼产生卵黄蛋白原，而且其水平增加呈明显的剂量依赖；当水温≥16℃、剂量≥1．0μg／g时，血清Ca^2＋含量极显著增加，呈明显的剂量依赖；试验组血清各种磷组分增加也呈剂量依赖；17β-雌二醇也引起肝胰脏代谢指标RNA／DNA比率增加。结果表明，雄性瓦氏黄颡对雌激素有较高的敏感性，加上其体型适中，容易获得等特性，可以作为水环境雌激素内分泌干扰物检测的指示生物。血清卵黄蛋白原与Ca^2＋可以作为污染水体雌激素内分泌干扰物的检测指标。     

久效磷对雄性金鱼的生殖毒性研究

分别用0.01，0.1和0．5mg／L的久效磷暴露雄性金鱼，取尾静脉血进行血浆聚丙烯酰胺凝胶电泳和精子超微结构的电镜观察。结果表明，与对照组雄鱼和雌鱼相比，各浓度暴露组均发现了1条特异性蛋白。这条蛋白带在电泳凝胶上的位置与17β-雌二醇诱导雄性金鱼分泌的卵黄原蛋白相同，因而可以认定这条特异性蛋白为卵黄原蛋白；0.01mg/L暴露组金鱼精子质膜局部出现溶解，0．1mg／L暴露组的多数精子细胞质膜溶解并断裂，少量精子颈部中心粒复合体和线粒体溶解。     

诸氏鲻虾虎鱼卵黄蛋白原基因全长cDNA的克隆及表达

为了探讨诸氏鲻虾虎鱼(Mugilogobius chulae)卵黄蛋白原组织分布及17β-雌二醇(E2)暴露对雄性诸氏鲻虾虎鱼Vg的影响,作者采用RT-PCR、RACE方法克隆并分析了诸氏鲻虾虎鱼卵黄蛋白原(Vg)基因的全长cDNA序列,并对Vg在诸氏鲻虾虎鱼体内的组织表达分布及E2诱导后不同时间表达规律进行了研究。结果表明:获得的Vg cDNA序列全长5 067 bp,开放阅读框(ORF)含4 992 bp,编码1 663个氨基酸,含有信号肽、多丝氨酸区域,推测其编码氨基酸分子量为186.2 ku,等电点为9.31。荧光定量PCR结果显示,Vg在诸氏鲻虾虎鱼肝脏中表达量最高。E2诱导后,诸氏鲻虾虎鱼肝脏中Vg m RNA的表达量第1天达到小高峰,第3天达到高峰,第7天开始明显下降,第11天仍能维持较高水平。本研究成功克隆了诸氏鲻虾虎鱼Vg基因全长cDNA序列,诸氏鲻虾虎鱼肝脏是Vg主要合成场所,E2诱导雄性诸氏鲻虾虎鱼Vg的表达作为生物标志物用于近海环境雌激素类物质的检测具有良好的应用前景。     

市政污水厂尾水对文蛤卵黄蛋白原的诱导效应研究

本研究目的是检验市政污水厂尾水排放对海洋双壳类动物文蛤的内分泌干扰效应,判断其血浆中卵黄蛋白原(Vtg)水平作为尾水受纳海域雌激素效应生物标志物可行性。将文蛤在不同浓度的尾水-海水混合液(0%、1%、5%、10%、20%、40%)中持续暴露培养20d,定期测定雄性文蛤血浆中Vtg含量,分析暴露期间Vtg水平随尾水体积比(EVR)和培养时间的变化趋势。结果表明,暴露培养10d后,尾水体积比40%的处理组中雄性文蛤的血浆Vtg含量明显上升(P0.05),随着培养时间延长到15和20d,在较低的EVR(10%、20%)下也能监测到尾水对文蛤Vtg的明显诱导,表明污水处理厂尾水中存在一定数量的内分泌活性物质,对雄性文蛤具有显著类雌激素效应;Vtg最大值出现在EVR20%的尾水暴露15d以及EVR40%的尾水暴露20d,分别比对照组增加45.86%和47.40%。如果采用笼养文蛤监测尾水受纳海域的类雌激素效应,适宜的暴露时间为20d,此时采集的雄性文蛤Vtg可指示较大范围尾水的影响。     

西瓦湖中壬基酚和双酚A的污染特征

本文研究了西瓦湖内外各环境介质 ,包括表层水体、悬浮物、间隙水和沉积物中的壬基酚和双酚 A的浓度分布。结果表明 ,湖内上述介质中的壬基酚浓度分别为 1 7.4～ 1 1 3.4 ng/ L ,1 5 .6～ 2 8.6 ng/ L,2 4 0～ 3890 ng/ L和 5 .6～ 1 6 2 9ng/ g,西瓦湖外的壬基酚浓度则相对较低。表层水体与其他介质中的壬基酚浓度之间存在显著性相关关系。双酚 A的分布特征与壬基酚相似 ,但前者的浓度较低 ,在上述介质中的浓度分别为 1 3.0～ 5 0 .4 ng/ L,3.2～ 8.5 ng/ L,85～ 2 80 ng/ L和 1 .3～1 1 .2 ng/ g。本文还讨论了西瓦湖中的壬基酚和双酚 A污染对当地生物的潜在危害     

褐牙鲆卵黄原蛋白免疫胶体金技术的开发及其在环境雌激素检测中的应用

为快速检测海洋环境雌激素,本研究利用20 nm胶体金颗粒和褐牙鲆(Paralichthys olivaceus) Vtg单/多克隆抗体开发了夹心法免疫胶体金检测试纸条,并对胶体金标记条件、T线和C线抗体浓度等参数进行了优化,构建了褐牙鲆Vtg的快速检测技术。实验结果表明该胶体金试纸条工作范围为15.7～1 000 ng·mL^-1(R²>0.98),检出限为7.8 ng·mL^-1。本研究制备的胶体金试纸条检出限与目前常用的多种Vtg的ELISA方法相近,但是检测时间仅为15 min,比常规方法节省了约14 h。此外,该试纸条在存放30和90 d后,对Vtg的检测结果并无明显偏差,表现出较好的稳定性和可重复性。最后,通过测定多种常见环境雌激素(双酚A、雌二醇、乙炔雌二醇)暴露对雄性成年褐牙鲆血浆中Vtg的诱导情况,进一步验证了该试纸条在海洋环境雌激素活性检测中的应用。