斑节对虾一种新球形病毒的研究

应用电镜超薄切片技术，发现斑节对虾肝胰腺上皮、肠上皮和淋巴样细胞质中一种新的球形形病毒，称之为斑节对虾球形病毒。病毒粒子为球形，直径２８－３５ｎｍ，核衣壳直径２１－２８ｎｍ，囊膜光滑无纤突，包涵体多数为球形，体积差异颇大，外有单位膜包被。ＭＳＶ与ＭＢＶ混合感染，造成严重理变化。     

中国对虾球形病毒的初步研究

用电子显微镜对中国对虾进行病毒的检测，发现一种新的球形病毒，这种病毒直径约８０～１００ｎｍ，具有包涵体，形态上有两种电子密度，球形病毒数量较多，分布在细胞质中，细胞核中没有发现，主要侵染对虾的肠、鳃、肌肉、肝胰腺等组织；宿主细胞的病理变化表现为内质网水肿，线粒体内嵴肿胀及局部溶解，酶原颗粒和粘蛋白原变性等；球形病毒与杆状病毒混合感染是对虾爆发流行病的主要病因     

中国对虾（Penaeuschinensis）核包涵体型杆状病毒装配的电镜观察

９４－９５斫养殖对虾病毒爆发流行期间，对患病中国对虾肝胰上皮细胞和胃肌细胞进行了电镜检测，发现一种核包涵体型杆状病毒（１４０－１６０ｎｍ×２８０－３３０ｎｍ），对其装配机质的超微结构研究表明，核包涵 体型杆状病毒以核内装配为主，部分病毒基质转入胞质进行了装配。     

中国对虾中一种与肝胰腺细小病毒混合感染的呼肠孤病毒的初步鉴定

于１９９１年９月在青岛市沙子口镇对虾养殖场采集中国对虾病虾，采用酒石酸钾－甘油密度梯度离心法从病虾肝胰腺中分离出一种呼肠孤科病毒，并通过电子显微镜观察和提取分析病毒基因组核酸等方法初步鉴定，结果显示，该病毒在酒石酸钾－甘油密度梯度离心纯化时与肝胰腺细小病毒混合存在，病毒颗粒为有包膜的正二十面体立体对称结构；带包膜的完整颗粒直径在６４－６６ｎｍ；裸露核衣壳平均直径为５３．２ｎｍ，病毒基因组由分成１０     

中国对虾（Penaeuschinensis）糖虾肌肉组织中球形病毒的超现结构研究

本文用电镜技术对中国对虾糠虾肌组织进行病毒检测,在平滑肌和横纹肌组织中均检出一种球形病毒粒子,直径为８０－１００ｎｍ,具有核包涵体;平滑 病毒粒子存在于肌纤维和核膜催具有不规则形态病毒包涵体;横纹肌组织中,病毒粒子存在于肌浆网和肌浆中。病变肌组织中,肌纤维变形,肌浆网膨胀,核膜水肿。     

杆状病毒感染越冬亲虾(Penaeus chenesis)的研究——越冬亲虾感染及其垂直传播的可能性

在中国对虾越冬亲虾中检出杆状病毒。经对病虾鳃、前中肠、卵巢组织进行电镜观察，在这些组织中发现大量有囊膜的杆状病毒。病毒粒子大小约为３６７ｎｍ×１２８ｎｍ，核衣壳为３２４ｎｍ×９２ｎｍ。病毒在细胞内不形成包涵体，在核内或在细胞质的发生基质中装配。从病毒的形态特征、感染组织以及典型的发病症状和病理变化，初步认为亲虾感染的病毒与近年广泛报道的造成养殖对虾大规模流行病的主要原因——中国对虾杆状病毒为同一种。卵巢组织也是病毒的主要靶器官之一，亲虾卵巢组织的被感染暗示着该病毒有可能通过生殖细胞而垂直传播     

对虾白斑综合症病毒的诊断和检测

对虾白斑综合症病毒（White Spot Syndrome Virus，WSSV）也叫白斑综合症杆状病毒（WSBV）、系统外胚层和中胚层杆状病毒（SEMBV）、日本对虾杆状核病毒（RV-PJ）、对虾杆状DNA病毒（PRDV）、皮下及造血组织坏死杆状病毒（HHNBV）、中国对虾杆状病毒（PCBV）、淋巴样细胞核性杆状病毒（LNBV）（陈秀男等，1994；Wongteerasupaua等，1995；Inouye 等，1994、1996；黄倢等，1995a；战文斌等，1995；陈细法等，1997），是全球对虾养殖业危害性最大的病毒之一。自1992年WSSV暴发性流行以来，造成了对虾养殖业的严重萎缩。鉴…     

厦门地区杂色花蛤的病毒观察与检测

在厦门海区对虾养殖内外环境中,电镜观察发现了杂色花蛤肝胰腺的一种杆状病毒和两种球状病毒.杆状病毒大小为(85～90)nm×(240～264)nm,有包膜,存在于细胞核中,细胞质可见.一种球状病毒直径为70～80nm,有包膜,存在于细胞质中.另一种球状病毒直径为95～120nm,有包膜,存在于细胞核中.用免疫酶组织化学法检测表明,杂色花蛤所带杆状病毒与BMNV有抗原性正相关,其检出率随季节变化,暗示自然生长且感染病毒的杂色花蛤可能是日本对虾杆状病毒病的传染源.     

中国对虾（Penaeuschinensis）杆状病毒的装配和包涵体形成过程研究

对中国对虾肝胰腺上皮细胞的透射电镜观察，发现杆状病毒可在对虾肝胰腺上皮细胞的细胞质内繁殖。增殖过程中在病毒发生基质表面及附近形成晶格状排列的包涵体，通过包涵体的形成、分化等过程，完成杆状病毒的装配。杆状病毒的装配过程似可分为５个时期：１．病毒发生基质形成期；２．未成熟包涵体期；３．成熟包涵体期；４．包涵体分化与病毒粒子装配期；５．侵染期     

中国对虾(Penaeus chinensis)病害爆发流行期间杆状病毒亚微形态的电镜观察

对１９９４～１９９５年中国对虾病害爆发期间病虾肝胰脏、鳃、胃及肠组织进 行了透射电镜观察。结果表明，多亚群杆状病毒感染是病害发生的主要原因。杆状 病毒以无包涵体１００～１３０ｎｍ×５００～５２０ｎｍ、１１０～１３０ｎｍ×３００～３３０ｎｍ及有包涵 体的 １００～１３０×３００～３３０ｎｍ ３种形态存在。     

中国对虾肝胰腺细小病毒的纯化与鉴定

于１９９１年９月－１９９３年底，利用在青岛市沙子口对虾养殖场采采的中国对虾病虾肝胰腺样品，采用一种改进的酒石酸钾－甘油密度梯度离心法，对原先称之为肝胰腺细小样病毒的一种对虾病毒进行纯化。通过电子显微镜观察，提取病毒核酸用不同核酸酶处理并结合电泳等方法，对病毒的基本生物物理和生物化学特性作鉴定，结果表明，用酒石酸钾－甘油密度梯度离心法，可获得良好的病毒纯化效果；纯化后的病毒颗粒显示正二十面体立体对称     

中国对虾(Penaeus chinensis)病害爆发流行期间杆状病毒亚微形态的电镜观察

对１９９４￣１９９５年中国对虾病害爆发期间病虾肝胰脏、鳃、胃、及肠组织进行了透射电镜观察。结果表明，多亚群杆状病毒感染是病害发生的主要原因。杆状病毒以无包涵体１００￣１３０ｎｍ×５００￣５２０ｎｍ、１１０￣１３０ｎｍ×３００￣３３０ｎｍ及有包涵体的１００￣１３０×３００￣３３０ｎｍ３种形态存在。     

中国对虾复合疫苗的初步研究

于１９９６年１１月－１９９７年５月,运用差异离心,蔗糖梯度离心、柱层析等方法从发病中国对虾分离出杆状病毒并纯化;分别用冷乙酸处理法、十二烷基硫酸钠－苯酚法提取纯化该病毒的结构蛋白与核酸、λＤＮＡ;分别用十二烷基硫酸钠煮沸法、三氯乙酸法纯化孤菌的肽菊聚糖和鸡卵粘蛋白;配制出小牛血清白蛋白、蜗牛凝集素两溶液。然后从超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力和溶菌活力两种免疫指标分析灭活病毒和以上提取、纯化的７种大分     

中国对虾一种C型杆状病毒的纯化技术及形态特征研究

染病中国对虾于１９９５年７月取自青岛崂山对养殖场。为探索对虾杆状病毒分离纯化技术，采用组织超薄切片技术对染病对虾进行电镜观察：被病毒感染的对虾经组织匀浆、差速离心和密度梯度离心，纯化出杆状病毒粒子；纯化的杆状病毒经钨酸钾负染色，于透射电子显微镜下观察形态结构。结果表明，中国对虾中肠组织     

中国对虾(Penaeus chinensis)糠虾肌肉组织中球形病毒的超微结构研究

本文用电镜技术对中国对虾糠虾肌组织进行病毒检测,在平滑肌和横纹肌组织中均检出一种球形病毒粒子,直径为80－100nm,具有核包涵体;平滑肌组织中,病毒粒于存在于肌纤维和核膜中,核内具有不规则形态病毒包涵体;横纹肌组织中,病毒粒子存在于肌浆网和肌浆中。病变肌组织中,肌纤维变形,肌浆网膨胀,核膜水肿。     

中国对虾育苗期球形病毒的感染及垂直传播途径的初步探讨

１９９４－１９９５年山东文登市高岛盐厂对虾育苗池和养虾池,随机和定点采集中国对虾的卵,无节幼体,蚤状幼体,糠虾幼体,仔虾及幼虾,成虾样品,利用透射电子显微镜对其进行病毒的检测。结果表明,卵细胞中含有大量的卵黄,没有明显的细胞分化,卵细胞质中有球形病毒感染;无节幼体的肝胰腺和上皮细胞的分化程度较低,有大量球形病毒分布;糠虾幼体已有明显的肝胰腺和上皮细胞的分化,肝胰腺上皮细胞的胞质中发现有球形病毒包涵     

中国对虾血细胞及其免疫研究

于１９９１年３月－１９９２年４月青岛近海及一养虾场捕集中国对虾亲虾和越冬亲虾，以扫描电镜和透射电镜观察中国虾的血细胞形态及其亚显微结构；研究定量测定细胞吞噬活性的方法。结果表明，中国对虾血细胞分３种：无颗粒细胞，呈球形或梭形，胞质不含颗粒粒；小颗粒细胞及颗粒细胞，卵球形或椭球球形，胞质含有电子致密颗粒，颗粒可分均匀、非均匀的；小颗粒细胞质富含线粒体，可能与它对异物敏感易发生胞吐作用有关，该细胞是识     

中国对虾卵细胞中病毒的初步研究

对中国对虾卵巢和受精卵细胞进行了电子显向镜超微结构观察，发现卵巢内有球状病毒粒子，大小为８０ｎｍ左右，受精卵细胞内有传染性皮下和造血组织坏死病毒（ＩＨＨＮＶ）感染，其严重影响对虾受精卵的发育，从获得的结果来看，中国对虾病毒（ＩＨＨＮＶ）垂直传播的可能性极大。     

福建省连江县养殖对虾病毒性疾病的调查研究

对福建省连江县养殖对虾的虾病流行情况和发病规律及流行过程中水环境化学、浮游植物、微生物等的动态变化进行了调查，研究了对虾疾病的传染性、传播途径，以及病原与各因子的相互关系。结果表明：不同的对虾种类发病症状基本一致，典型症状为甲壳白斑，甲壳下水肿。该疾病的流行过程可分为三个阶段：发病前期（１－７ｄ）；发病中期（持续时间约１０—１５ｄ）；发病晚期（对虾暴发性死亡时间仅为２—５ｄ）。该流行病是杆状病毒引起并发细菌性传染病，可借海水和病虾尸体为媒介，通过消化道和体表面在不同种虾体间迅速传播。     

中国对虾(Penaeus chinensis)的白点综合征病毒(WSSV)的提纯和核酸提取

作者从发生白点综合征的中国对虾中,提取了一株白点综合征病毒,用电镜对纯化的病毒进行了形态学观察,并对病毒纯化过程中蛋白酶抑制剂的使用及离心速度的选择进行了探讨。经蔗糖密度梯度离心,分取各带负染后电镜观察,病毒条带位于４０％～５０％蔗糖梯度之间,其完整毒粒长２２５～２７０ｎｍ,直径７５～８８ｎｍ,有的完整毒粒带有很长的尾,病毒衣壳长２５０～３２０ｎｍ,直径６０～８０ｎｍ。在匀浆使用的缓冲液中加入蛋白酶抑制剂ＰＭＳＦ,可得到完整的带包膜的病毒颗粒,比不使用ＰＭＳＦ的提纯效果要好。经３０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ,５０００ｒ／ｍｉｎ离心２５ｍｉｎ,去除大部分的组织碎片,经１００００ｒ／ｍｉｎ离心１ｈ,可使大部分病毒沉淀。并采用传统的方法对病毒核酸进行了提取,其基因组经初步分析为ｄｓＤＮＡ。