鳀鱼蛋白酶水解物的营养评价

对鱼蛋白酶水解物EAPH进行评价。EAPH蛋白质含量88．26％，氨基酸比例会理，必需氨基酸占总氨基酸43．61％，并含丰富的水溶性维生素和微量元素。EAPH对动物的生长效果、饲料效率（FE）、蛋白质效率（PER）、净蛋白质效率（NPR）均与对照乳粉蛋白相近；表征其消化吸收利用率的其消化率（TD）、生物价（BV）、蛋白质净利用率（NPU）均略高于对照乳粉蛋白；小麦粉蛋白经EAPH强化后，其蛋白质消化吸收利用率大幅度提高。EAPH为优良蛋白制品。     

青鳞鱼下脚料水解蛋白的制取及其营养评价

以青鳞鱼（Harengula zunast)下脚料为原料，采用碱萃取，蛋白酶水解，浓缩，喷雾干燥等手段，制得水解鱼蛋白。研究了碱萃取，蛋白酶水解条件及不同沉淀方法对水解鱼蛋白沉淀效果的影响，并对水解鱼蛋白制品营养价值进行了评价，结果表明，下脚料水解鱼蛋白制品含粗蛋白72．9％，氨基酸总量67．6％，其中必需氨基酸占44．6％，氨基酸分为96，苏氨酸为其限制性氨基酸（1973年FAO／WHO标准），无机盐钙，镁，铁，锌，铜，磷含量丰富，以有机溶剂（异丙醇，乙醇)为沉淀剂沉淀水解蛋白时，粗蛋白损失率约为30％（干基计）。     

鳀鱼（Engraulis japonicus）蛋白水解物的营养成分及抗高血脂作用的研究

采用化学分析、氨基酸组成分析及动物体内实验等方法，进行了鳀鱼蛋白水解物的一般成分、氨基酸组成和抗高血脂作用研究。结果表明，蛋白水解物含蛋白质20．50％、脂肪9．63％、水分67．37％、灰分1．09％；在必需氨基酸中，异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和胱氨酸、苏氨酸、色氨酸及缬氨酸达到FAO／WHO（1973）提出的理想氨基酸模式中相应氨基酸的88％-100％；该蛋白水解物能显著抑制由高脂类饲料喂养导致的高血脂大鼠的TC、TG、HDL升高，其抗高血脂作用可能来源于它本身的功能因子（包括牛磺酸、DHA、EPA、Ca、P和Fe等）。     

紫色无硫细菌对栉孔扇贝幼虫生长发育的影响

于１９９１年，以栉孔扇贝幼虫为材料，用１０００ｍｌ烧杯模拟育菌现场条件，进行光合细菌作为饵料添加剂的试验。分析表明，光合细菌中含粗蛋白６２．３％；１８种氨基酸的总量为５１．２４％；维生素Ｂ１，Ｂ２，Ｂ１２含量分别为０．０１０６５％，０．００９３８８％，０．００２６４％；脂类和其他生理活性物质。生长试验结果表明，在开始的１２ｄ，在补充Ｒｐｓ ｓｐ，５０ｍｇ／Ｌ和１００ｍｇ／Ｌ时，幼虫平均增长率分别为     

带鱼(Trichiurus lepturus)下脚料蛋白水解物的成分分析及抗高血脂功效的研究

采用化学分析、氯基酸组成分析及动物体内实验等方法，研究了带鱼下脚料蛋白水解物的一般成分、氨基酸组成和抗高血脂作用，以期为带鱼及其下脚料蛋白水解物的高效利用提供资料。结果表明，带鱼下脚料蛋白水解物含蛋白质17．16％、脂肪9．08％、水分71．61％、灰分1．12％。在必需氨基酸中，异亮氯酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和胱氨酸、苏氨酸、色氯酸及缬氨酸达到FAO／WHO（1973）提出的理想氯基酸模式中相应氨基酸的88％-100％。动物体内实验结果表明，该蛋白水解物能显著抑制由高脂类饲料喂养导致的高血脂大鼠的TC、TG、HDL升高。带鱼下脚料蛋白水解物具有抑制高血脂动物血脂的升高，其抗高血脂作用可能源于它本身的功能因子，包括牛磺酸、DHA、EPA、Ca、P和Fe等。     

军曹鱼营养成分的分析及评价

对军曹鱼Rachycentron canadum Linnaeus进行解剖比较、营养分析和评价，结果显示，军曹鱼的含肉率为68．7％，肌肉蛋白质含量为21．2％，氨基酸总量为65．05％；蛋氨酸为第一限制氨基酸，其中赖氨酸含量高达591mg.gN^-1，军曹鱼的不饱和脂肪酸含量为65．2％，其中二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid，简称EPA）和二十二碳六烯酸（docosahexenoic acid简称DHA）的含量分别为4．5％和12．0％。研究结果表明，军曹鱼含肉率高，营养质量好，有较高的营养价值和药用价值。     

赤点石斑鱼人工配合饵料中蛋白质最适含量的研究

本文探讨了不同蛋白质含量的配合饵料对赤点石斑鱼（Epinephelusakaara）生长的影响。通过60d度验得出：在各配合饵料组中，蛋白质含量为49．52％的试验的相对增重率（46．84％）体长相对增长率（15．96％）、蛋白质效率（60．35％）和饵料转化率（29．85％）等均为最佳。配合饵料组鱼体肌肉营养成分（蛋白质、脂肪、氨基酸和鲜味氨基酸）也均优于对照组，而更接近野生鱼。经回归方程分析，赤点石斑鱼人工配合饵料中蛋白质最适含量为48．37％～49．24％。     

南海沉积物细菌胞外蛋白酶在家族水平上的多样性

海洋产蛋白酶细菌及其分泌的胞外蛋白酶在降解有机氮以推动海洋氮循环进行方面发挥着重要作用，但目前对这二者多样性的认识非常有限。本研究自南海沉积物中筛选得到90株产蛋白酶细菌，并通过N-端氨基酸序列，分析了其胞外蛋白酶在家族水平上的多样性。16S rRNA基因序列分析的结果表明，筛选的产蛋白酶细菌均属于Gammaproteobacteria纲，且大多数属于Alteromonadales目和Vibrionales目的不同属。对其中14株菌株的14个胞外蛋白酶的N-端氨基酸序列分析表明，所有这些蛋白酶属于金属蛋白酶的M4家族或丝氨酸蛋白酶的S8家族。本研究提供了海洋沉积物产蛋白酶细菌在类群及其胞外蛋白酶在类型上的新细节，这将有助于全面了解微生物酶促降解海洋沉积物有机氮的过程和机理。     

不同剂型的微量元素及不同水平的氨基酸螯合物对黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco）生长及体组成的影响

黄颡鱼的基础饲料中分别添加无机微量元素和不同水平的氨基酸螯合态微量元素Cu、Fe、Zn、Mn，投喂平均体重为11．80g的黄颡鱼70天，研究饲料微量元素对黄颡鱼生长、饲料利用情况及肌肉组成成分的影响，并对肌肉、骨骼组织中微量元素的残留含量进行测定分析。结果表明，添加微量元素的各实验组的增重率、饵料系数、蛋白质效率均优于对照组。等量添加微量元素的氨基酸Ⅰ组明显优于无机微量元素组。氨基酸Ⅰ组的增重率显著高于无机组（P〈0．05），比无机组、氨基酸Ⅱ组、氨基酸Ⅲ组比较分别提高了16．86％、7．60％、8．03％。饵料系数、蛋白质效率在各组间有一定的差异，但均不显著（P〉0．05）。等量添加微量元素的氨基酸Ⅰ组各组织中微量元素的残留量高于无机组，微量元素含量高的氨基酸Ⅱ组残留量最多，但其增重效果不如氨基酸Ⅰ组（P〉0．05）。微量元素在黄颡鱼组织中的积累顺序为：骨骼〉肌肉。微量元素的添加对黄颡鱼肌肉的常规营养成分、氨基酸组成及风味未产生显著的影响（P〉0．05）。因此，在本实验条件下，每kg饲料添加氨基酸微量元素的适宜量为Cu4mg、Fe140mg、Zn20mg、Mn12mg。     

石斑鱼鱼虱病的研究：Ⅰ.南海鱼虱,新种Caligus nanhaiensis n.sp.

记述华南地区网箱养殖石斑鱼鱼虱病病原－南海鱼虱，新种Ｃａｌｉｇｕｓ ｎａｎｈａｉｅｎｓｉｓ ｎ．ｓｐ．形态的光镜和电镜观察结果，并对南海鱼虱与相似种Ｃ．ｓｅｒｉｏｌａｅ ｙａｍａｇｕｔｉ，１９３６和Ｃ．ｔａｎａｇｏ Ｙａｍａｇｕｔｉ，１９３９的形态特征进行详细比较。     

利用贝类废弃物制造水解动物蛋白

以扇贝加工废弃物—扇贝边为原料 ,采用枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、Flavourzyme对其进行深度水解 ;然后应用超滤技术对酶解液进行分离 ,除去未水解的蛋白质、细菌、微细的颗粒等物质 ,得到富含氨基酸和小分子肽的超滤透过液 ;再应用反渗透技术进行预浓缩 ,以除去其中过多水分 ;最后 ,对该浓缩液进行减压浓缩或喷雾干燥 ,即得到浓液状或粉状的水解动物蛋白产品。其中 ,粉状产品的粗蛋白含量为 6 6 .88% ,氨基酸态氮含量为 6 .96 % ,氨基酸态氮 /总氮 6 5 .0 5 % ,均优于国外同类产品     

基于UF、GFC及RP-HPLC的长牡蛎(Crassostrea gigas)蛋白抗衰老小分子活性肽(Zel'ner)的纯化及结构解析

牡蛎肉质鲜美,营养丰富,具有很高的食用价值。本研究以舟山长牡蛎(Crassostreagigas)为研究对象,以DPPH自由基清除率为测试指标,通过UF、GFC及RP-HPLC等技术,对牡蛎蛋白酶解液进行分离纯化,获得牡蛎蛋白小分子肽样品,并对其氨基酸组成进行营养性评价。研究结果表明:浓度为30%—100%的硫酸铵处理酶解液的分离效果明显优于低于浓度为30%硫酸铵的分离效果,其DPPH自由基清除率达到52.43%;纯化后得到两种牡蛎蛋白小分子肽分别标记为组分a(Mw1kDa)和组分b(1kDaMw3kDa);组分a中牡蛎蛋白小分子肽分子量分布主要为1995.2Da、1258.9Da、1023.3Da、398.1Da;对牡蛎蛋白小分子肽组分a进行检测,发现其中氨基酸种类及含量丰富,其中必需氨基酸(EAA)含量为18.863%,总氨基酸含量(TAA)为43.3748%,必需氨基酸占总氨基酸43.49%,必需氨基酸与非必需氨基酸(NEAA)的比例为76.95%,风味氨基酸(FAA)含量为18.9147%,占总氨基酸含量的43.61%。综上可见,牡蛎蛋白小分子肽具有极高的营养价值和市场经济效益,此研究为牡蛎蛋白抗衰老小分子活性肽(Zel'ner)的开发提供了新的思路和方向。     

AMINO ACID CONTENT OF MARINE PHYTOPLANKTON

Five species of marine phytoplankton, Phaeodactylum tricornutum, Chaetoccros minutissimus, Platymunas suhcordiforinis, Nitzschia sp. and Dunaliella sp. were analyzed for the contents of total nitrogen, free amino acid and total amino acid. Their total nitrogen content was relatively high, ranging 3.37-7.6% and the total amino acid content 15.1-36.0%, Glu, Asp, Leu, Ala, Arg, and Gly being the main components. The free amino acid content in two species, Dunalietta sp. and Nitzschia sp. ranged 0.13-0.30%, in which Arg, Ala, Glu, and Asp were predominant. The crude protein in phytoplankton is high enough to be comparable with that of higher classes of seaweed such as Porphyra and Laminaria.     

缢蛏（Sinonovacula constricta）GST和HSP90基因克隆及其在氨氮胁迫下的表达特征分析

克隆获得缢蛏(Sinonovacula constricta)谷胱甘肽S-转移酶(Sc-GSTσ)和热休克蛋白90(Sc-HSP90)基因的cDNA全长，分析了它们的组织表达差异及其在氨氮胁迫下的表达特征。结果表明，Sc-GSTσ的全长cDNA为1 414 bp，含有639 bp的开放阅读框(Open Reading Frame，ORF)，编码212个氨基酸，Sc-GSTσ氨基酸序列与其他物种的GST氨基酸序列同源性为31.88%～43.40%；而Sc-HSP90的全长cDNA为2 752 bp，ORF为2 181 bp，编码726个氨基酸，其氨基酸序列与其他物种HSP90的氨基酸序列同源性为76.77%～87.05%。荧光定量PCR分析发现，Sc-GSTσ和Sc-HSP90在缢蛏各组织中均有表达，两者均在肝胰腺中表达量最高。氨氮胁迫后，Sc-GSTσ和Sc-HSP90 mRNA在肝胰腺中表达均显著上调(p<0.05)，表明氨氮胁迫引起机体的应激反应，2个基因可能参与机体解毒或防御过程。但胁迫后期表达量下降推测是机体的防御能力有限，不足以完全保护宿主免受应激诱导的细胞损伤。     

碳、氮源浓度和培养时间对裂殖壶菌生长和脂肪酸组成的影响

对细胞干重的测定和应用气相色谱仪测定了不同碳、氮源浓度和不同培养时间下裂殖壶菌(Schizochytrium limac-inum)OUC88的生长和脂肪酸的组成。结果表明,在含有9%的葡萄糖和6%的豆粕水解物的培养基中,细胞生物量达到最高,为25.92 g/L;在含有6%的葡萄糖和2%的豆粕水解物的培养基中,细胞总脂含量以及总脂中的DHA含量均达到最高,分别为50.56%和35.83%。另外,不同生长时期内裂殖壶菌的总脂含量和脂肪酸组成不同。在培养到第4~5天,细胞的生物量、总脂以及DHA产量均最高。     

金枪鱼(Thunnus sp.)胰腺酶解液对H2O2诱导的胰岛素瘤细胞(INS-1)氧化损伤的保护作用

本文首先通过MALDI-TOF/TOF-MS技术,测定金枪鱼(Thunnus sp.)胰腺酶解液中的多肽组分及其丰度,确定GQPVR、GLPPK和EHER是其中的优势肽;再利用Discovery Studio平台中的反向找靶和分子对接模块,发现这些优势肽均可以与Keap1蛋白结合,推测其可能具有抗氧化活性;最后,利用细胞实验对酶解液的抗氧化活性进行验证,发现其对H2O2氧化损伤的胰岛素瘤细胞(INS-1)具有剂量依赖型保护效果,高剂量和低剂量酶解液处理后细胞活力较模型组显著提高,凋亡率从79.17%分别下降到43.2%(P0.01)和28.9%(P0.01);胰岛素的分泌量从3.65mIU/L分别增加到5.75mIU/L(P0.01)和4.95mIU/L(P0.01)。DiscoveryStudio的抗氧化功能预测和细胞学实验相结合的研究方法,为酶解液的功能组分鉴定提供了新的思路。     

A comparison of non-hydrolytic methods for extracting amino acids and proteins from coastal marine sediments

Advances in analytical techniques now allow for the potential analysis of intact peptides and proteins isolated from marine sediments. However, there is no established technique for the extraction of macromolecular materials from marine sediments. Six different methods for extracting the amino acid component from coastal marine sediments were compared to the standard hot acid hydrolysis technique for their percent recovery and amino acid composition. The standard hot acid hydrolysis on dried, whole sediments released the greatest concentration of total amino acids (PS-THAA; 3.52 mg gdwt^− 1 ± 10% (SMD)), yet this only accounted for 22% of the total nitrogen in Puget Sound sediments (Washington, USA). Repeated hydrolysis of the same samples did not improve the recovery of nitrogen by more than an additional 10%. Base extraction (0.5 N NaOH) was the second best method for recovering amino acid nitrogen, releasing 60% of the Puget Sound total hydrolyzable amino acids (PS-THAA) (corresponding to 13% of the total sedimentary nitrogen), and has the advantage that it does not rely on peptide hydrolysis to free the nitrogenous component from the sediment matrix. The amino acid distribution of the 0.5 N NaOH extract was not significantly different than the initial THAA. Other non-hydrolyzing methods released lower yields of amino acids (Triton X-100 ≥ hot water > 50 mM NH₄HCO₃ > HF), but might prove to be of use to investigators interested in specific fractions of sedimentary organic nitrogen because these four methods had distinctly different amino acid compositions (enrichments in basic amino acids and depletions in acidic amino acids). Treatments with HF both before and after traditional hydrolysis and/or extractions with base did not release any more of the sedimentary nitrogen. Our results are consistent with the hypothesis that a large fraction of the sedimentary nitrogen (TN) is protected within an organic matrix.     

金枪鱼(Katsuwonus pelamis)碎肉蛋白降压肽的酶解制备及活性研究

以血管紧张素转换酶(ACE)抑制率为指标,通过正交试验L9(34)确定碱性蛋白酶(Alcalase)对金枪鱼(Katsuwonus pelamis)碎肉蛋白的最佳酶解条件,利用D101大孔树脂建立了酶解物的脱盐工艺,利用超滤、葡聚糖凝胶(G-25)色谱和反相-高效液相色谱(RP-HPLC)分离降压肽,并确定其纯度,利用氨基酸序列分析和ESI-MS鉴定纯化多肽的结构。结果表明,碱性蛋白酶酶解金枪鱼碎肉蛋白制备降压肽的最佳酶解条件是:pH 9.5,酶用量1.5%,酶解温度50°C,酶解时间5h;D101大孔吸附树脂脱盐工艺条件为:上样浓度10 mg/mL、上样流速1.5 BV/h、解吸剂为75%乙醇;酶解物经超滤和Sephadex G-25分离获得一个纯度较高的四肽,经氨基酸序列分析和ESI-MS鉴定结构为Phe-GlyGly-Val(FGGV),ESI-MS检测给出分子离子峰m/z 379.50([M+H]+)。利用碱性蛋白酶酶解并经超滤和色谱技术制备的金枪鱼碎肉蛋白降压肽具有良好的ACE抑制活性,可作为降压药物、保健食品或添加剂进行开发。     

不同含量水解鱼蛋白添加对大菱鲆幼鱼生长、血浆和肌肉游离氨基酸含量及后肠组织形态的影响

为研究水解鱼蛋白(FPH)对大菱鲆(Scophthalmus maximus L.)幼鱼生长的影响,本实验以60%的鱼粉(FM)组为正对照组,以复合植物蛋白源替代40%的FM作为负对照组(含36%的FM),在负对照组的基础上添加3个梯度水平(3%、6%、9%)的FPH作为实验组,分别喂养大菱鲆幼鱼74 d。研究表明,与负对照组相比,添加6%和9%的FPH可显著提高大菱鲆幼鱼的生长性能,并达到与正对照组相似的效果。添加不同含量的FPH会改善大菱鲆幼鱼的后肠形态,且改善状况随添加量的增加而愈加明显,当FPH添加水平达到9%时,可显著增加大菱鲆幼鱼后肠的肠绒毛直径比、肠上皮细胞高度和微绒毛高度。与负对照组相比,9%FPH组显著提高了血浆和肌肉中必需氨基酸、非必需氨基酸和总氨基酸浓度。此外,饲料中添加6%和9%的FPH显著促进了PepT1的基因表达量。研究结果表明,水解鱼蛋白是一种潜在的替代鱼粉的有效蛋白源,可起到改善大菱鲆幼鱼生长指标、提高机体游离氨基酸含量和促进肠道吸收能力的作用。     

金乌贼(Sepia esculenta)蛋白抗氧化肽的酶解制备及活性评价

采用木瓜蛋白酶水解金乌贼(Sepia esculenta)蛋白, 利用超滤、凝胶色谱和反相高效液相色谱从金乌贼蛋白水解物中制备抗氧化肽, 采用氨基酸序列分析仪和质谱(ESI-MS)确定抗氧化肽结构, 采用自由基清除实验和脂质过氧化抑制实验对多肽抗氧化能力进行评价。结果表明, 金乌贼蛋白经木瓜蛋白酶水解和分离纯化得到1个抗氧化肽(AEH-P3), 经氨基酸序列分析和质谱(ESI-MS)确定其结构为Ala-Pro-Pro-Glu-Asn-Gly-Met-Ala-Gln-Met (APPENGMAQM), 分子量为1045.22Da。体外抗氧化实验结果表明: AEH-P3对DPPH自由基(EC50 4.01mg/mL)、羟自由基(EC50 4.66mg/mL)、ABTS自由基(EC50 3.44mg/mL)和超氧阴离子自由基(EC50 6.03mg/mL)具有良好的清除作用, Ala-Pro-Pro-Glu-Asn-Gly-Met-Ala-Gln-Met (APPENGMAQM)亦显示出了良好的脂质过氧化抑制作用, 可以用于抗氧化相关的功能食品、药物或者食品添加剂。