斜带石斑鱼与赤点石斑鱼的核型研究

采用PHA体内注射肾细胞直接制片法研究斜带石斑鱼和赤点石斑鱼的核型。结果表明 ,斜带石斑鱼的核型为 2n =4 8,2sm +46t ,NF =5 0 ;赤点石斑鱼的核型为 2n =4 8,5st+43t ,NF =4 8。两种鱼的 2n数相同 ,它们的核型特点符合典型的高位类群鱼类核型特征。     

棕点石斑鱼(♀)与蓝身大斑石斑鱼(♂)杂交子代核型分析

【目的】研究棕点石斑鱼(Epinephelus tukula,♀)与蓝身大斑石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus,♂)杂交F1代(下称"金虎斑")的染色体核型。【方法】采用头肾-PHA注射法制备金虎斑染色体,并分析其核型。【结果与结论】金虎斑二倍体染色体数为48,包括23对端部着丝粒染色体,1对亚中部着丝粒染色体,核型公式是2n=48=2sm+46t,染色体臂数(NF)为50。与其他石斑鱼核型相比,金虎斑染色体核型特点符合典型的高位类群鱼类核型特征;根据染色体臂数,金虎斑属于特化类群。     

斜带石斑鱼与赤点石斑鱼的核型研究

采用PHA体内注射肾细胞直接制片法研究斜带石斑鱼和赤点石斑鱼的核型。结果表明，斜带石斑鱼的核型为2n=48，2sm 46t，NF=50；赤点石斑鱼的核型为2n=48，5st 43t，NF=48。两种鱼的2n数相同，它们的核型特点符合典型的高位类群鱼类核型特征。     

斑带石斑鱼与黑边石斑鱼核型的研究

以斑带石斑鱼与黑边石斑鱼为材料，胸腔注射秋水仙碱溶液，取全肾经空气干燥制片法制片。姬姆萨染色和银染，分析核型及Ａｇ－ＮＯＲ带，结果表明斑带石斑鱼的核型为２ｎ＝４８、４８ｔ、ＮＦ＝４８。黑边石斑鱼的核型为２ｎ＝４８、４８ｔ、ＮＦ＝４８。在最小一对端部着丝粒染色体上均具有明显的次缢痕。银染结果显示该次缢痕部位即为核仁组织者区域。     

云纹石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交F_1与亲本的形态学比较

【目的】比较研究云纹石斑鱼(Epinephelus moara♀)×鞍带石斑鱼(E. lanceolatus♂)杂交F_1与亲本的形态学特征。【方法】运用常规测量方法测量杂交F_1与亲本3个群体幼鱼的形态学指标,对3个群体的12项可量、可数性状进行杂种指数分析和聚类分析。【结果】杂交F_1鱼体呈棕褐色,体侧具有6条深棕色横带,头部和体表密布白色点状和块状斑纹,各鳍呈灰褐色;可量、可数的性状中有5项性状偏向云纹石斑鱼,6项性状偏向鞍带石斑鱼,1项与两者相同;聚类分析表明,杂交F_1与鞍带石斑鱼聚为一类。【结论】杂交F_1的外部形态较接近于鞍带石斑鱼,体色和条纹较接近于云纹石斑鱼。     

几种因子对鞍带石斑鱼精子活力的影响

研究不同梯度的盐度、pH、温度及低温保存时间对鞍带石斑鱼精子活力的影响。结果表明:鞍带石斑鱼精子活力的适宜盐度范围为27.5～35.0,最适盐度为32.5,此时精子的快速运动时间和寿命分别为13.2min和14.8min;最适pH为8.5,精子的快速运动时间及寿命最长,分别达12.7min和17.3min;温度范围为27～31℃,以29℃时快速运动时间最长,达16.6min;在0～4℃冰箱保存6h后鞍带石斑鱼精子活力未显著降低,其中保存前精子快速运动时间为18.4min,保存6h后为18.2min,保存120h后仍有活力,精子快速运动时间为2.3min,精子激活率为3.3%。以x为保存时间,快速运动时间y和寿命y′符合线性方程y=-0.8334x+19.164(R2=0.9856),y′=-1.1358x+27.8(R2=0.9573)。     

凡纳滨对虾与点带石斑鱼的混养模式

对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)与点带石斑鱼(Epinephelus malabaricus)进行90 d的混养试验,研究点带石斑鱼混养密度、规格对凡纳滨对虾生长、成活率和产量的影响。结果表明,点带石斑鱼混养密度、规格均对凡纳滨对虾生长、成活率和平均产量的影响有统计学意义(P0.05)。在混养密度相同的条件下,混养小规格点带石斑鱼的凡纳滨对虾成活率比混养大规格点带石斑鱼提高15.1%~23.2%,平均产量比混养大规格点带石斑鱼提高19.0%~40.6%。随着点带石斑鱼混养密度增加,凡纳滨对虾成活率和平均产量呈下降趋势。小规格点带石斑鱼混养密度分别为0.4尾·m-2时,凡纳滨对虾成活率和平均产量最高,分别为66.25%%±7.24%、(1 181.0±101.8)kg,较单一养殖凡纳滨对虾成活率提高5.46%,平均产量提高16.2%;大规格点带石斑鱼混养密度为0.2尾·m-2时,凡纳滨对虾成活率和平均产量最高,分别为(52.04±6.11)%、(959.8±89.1)kg,但较单一养殖凡纳滨对虾成活率下降8.75%,平均产量下降5.88%     

洛氏鱥染色体核型分析

以洛氏鱥(Phoxinus lagowskii)肾组织为材料,采用腹腔注射植物血球凝集素(PHA)、秋水仙素和空气干燥法制备染色体标本,进行染色体组型分析。结果表明:洛氏鱥染色体为50条,核型公式为2n=50=24m+14sm+12t,臂数NF=88,未发现异型染色体、随体染色体和次缢痕。     

网箱养殖鞍带石斑鱼的生长及性腺发育

鞍带石斑鱼（Epinephelus lanceolatus）俗称龙趸、龙胆石斑鱼，属鲈形目，鳍科，石斑鱼亚科，石斑鱼属。鞍带石斑鱼有“石斑鱼之王”之称号，是石斑鱼类中体型最大的种类，最大体长270cm，体重可达400kg以上，主要产地在东南亚、大洋洲海域，在我国的南海（南沙群岛）亦曾发现，但数量稀少。鞍带石斑鱼生长迅速，抗病性强且肉味鲜美，     

鞍带石斑鱼人工繁殖及胚胎发育研究

为建立鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)人工繁殖技术,研究了鞍带石斑鱼亲鱼培育、催产及胚胎发育过程。根据性腺检查及催产结果,判定鞍带石斑鱼在广东的繁殖季节为每年的7-9月份,产卵水温在28~31℃。使用10~12尾雌鱼和3尾雄鱼搭配进行催产实验,亲鱼未出现发情和追尾现象,虽能产卵但均未受精,通过人工授精可得受精卵。对鞍带石斑鱼胚胎发育进行了观察,详细描述从受精卵到初孵仔鱼的28个具体发育时期的形态特征和发育时间,结果表明,将鞍带石斑鱼胚胎发育划分为卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期和器官形成期。在水温(27±0.5)℃、盐度31.0、pH 7.8的海水中,鞍带石斑鱼胚胎历时25 h 40 min完成整个胚胎发育孵化出膜。     

盐度渐变和骤变对褐点石斑鱼存活和摄饵的影响

以人工育苗所得的褐点石斑鱼苗为材料,水温28～31.5℃下,盐度范围0～70以组间距5共设置15个梯度,分别进行盐度渐变和骤变对鱼苗存活和摄饵影响的研究。结果表明:渐变实验中,以5/d升高或者降低盐度时,盐度10～55之间,鱼苗存活率100%;而在盐度降低至5时,平均存活时间为15.16 h,24 h存活率19.1%;盐度降至0,平均存活时间7.92 h,24 h存活率为0,盐度0时其平均存活时间与盐度5时的平均存活时间有极显著差异(P<0.01);盐度60,鱼苗基本不摄食,24 h平均存活时间38.51h,24 h存活率为89.8%,24～48 h存活率为89.8%;盐度65,鱼苗不摄食,平均存活时间10.95 h,24 h存活率0%;盐度65平均存活时间与盐度60之间有极显著差异(P<0.01);鱼苗在盐度25～45间摄食活动活跃。骤变实验中,盐度5～50,鱼苗存活时间>48 h;盐度0,24 h存活率5%,48 h存活率为0;盐度55,24 h存活率100%,24～48 h间存活率83.3%;盐度60,24 h存活率44.1%,48 h存活率降至11.1%;鱼苗在盐度65、70中24 h存活率0%;盐度0、65、70的处理组48 h平均存活时间的显著短于其它各组,盐度0～5、55～70为褐点石斑鱼苗骤变的极限生存盐度。     

Molecular cytogenetic of the Amoy croaker,A rgyrosomus amoyensis(Teleostei,Sciaenidae)

The family Sciaenidae is remarkable for its species richness and economic importance. However, the cytogenetic data available in this fish group are still limited, especially those obtained using fl uorescence in situ hybridization(FISH). In the present study, the chromosome characteristics of a sciaenid species, Argyrosomus amoyensis, were examined with several cytogenetic methods, including dual-FISH with 18 S and 5 S rDNA probes, and a self-genomic in situ hybridization procedure(Self-GISH). The karyotype of A. amoyensis comprised 2 n=48 acrocentric chromosomes. A single pair of nucleolar organizer regions(NORs) was located at the proximal position of chromosome 1, which was positive for silver nitrate impregnation(AgNO_3) staining and denaturation-propidium iodide(DPI) staining but negative for Giemsa staining and 4',6-diamidino-2-phenylindole(DAPI) staining, and was confi rmed by FISH with 18 S rDNA probes. The 5 S rDNA sites were located at the centromeric region of chromosome 3. Telomeric FISH signals were detected at all chromosome ends with dif ferent intensities, but internal telomeric sequences(ITSs) were not found. Self-GISH resulted in strong signals distributed at the centromeric regions of all chromosomes. C-banding revealed not only centromeric heterochromatin, but also heterochromatin that located on NORs, in interstitial and distal telomeric regions of specifi c chromosomes. These results suggest that the karyotype of Amoy croaker was relatively conserved and primitive. By comparison with the reported cytogenetic data of other sciaenids, it can be deduced that although the karyotypic macrostructure and chromosomal localization of 18 S rDNA are conserved, the distribution of 5 S rDNA varies dynamically among sciaenid species. Thus, the 5 S rDNA sites may have different evolutionary dynamics in relation to other chromosomal regions, and have the potential to be ef fective cytotaxonomic markers in Sciaenidae.     

花染色体组型分析及细胞核DNA含量的测定

采用PHA、秋水仙碱腹腔或背部肌肉注射,活体培养法,取花肾细胞制成悬浮液,用空气干燥法制片。经Giemsa染色,镜检细胞分裂相,统计结果为2n=50,核型公式为:2n=20m+12sm+10st+8t,NF=82。同时,取花肌肉和肝脏为材料,以鸡血细胞为DNA标准(2.30pg/2c),使用EPICS-XL型流式细胞仪测定了花细胞DNA含量,分别为2.219±0.055pg/2c和2.214±0.083pg/2c。     

孔雀石绿在青石斑鱼肌肉组织中的残留与消除规律

为了解运输和疾病防治过程非法使用孔雀石绿后,青石斑鱼(Epinephelus awoara)对孔雀石绿的蓄积及消除规律,以指导对孔雀石绿的禁用监管,采用3种浓度的孔雀石绿分别连续药浴5 h,以及分3次间断药浴15 min,再转移至水泥池中用海水养殖,采用液相色谱—串联质谱法(LC/MS/MS)测定青石斑鱼肌肉组织中孔雀石绿的残留。结果表明:模拟运输过程用药后,残留量依次为247、102、113 g/kg,模拟疾病防治用药后,最大残留量依次为14.3、10.2、8.62 g/kg;两种用药方式下,用药浓度为0.15 mg/L时,其残留峰值均出现在清水养殖一个月后;模拟运输过程用药后,青石斑鱼肌肉组织孔雀石绿需245 d方可降至检测限以下,模拟疾病防治需122 d。种苗阶段的非法用药也可能成为水产品孔雀石绿残留的来源。     

蜂巢石斑鱼随机扩增多态性DNA的初步研究

采用RAPD技术分析了湛江沿海野生蜂巢石斑鱼的遗传多样性 ,从 6个系列 1 2 0个引物筛选出1 6个引物 ,对 1 0尾蜂巢石斑鱼进行RAPD分析 ,1 6个引物共检测到 1 5 4个位点 ,其中 ,多态位点比例 (P)为 6 5 5 8% ,平均个体间遗传相似系数 (S)为 0 7887,平均个体间遗传距离 (D)为 0 2 1 1 3,遗传多样性指数 (H)为 0 1 776。研究结果表明 ,湛江沿海的野生蜂巢石斑鱼的遗传多样性较高。     

A Bioassay for the Cytotoxicity of Gemcitabine Using the Marine Ciliate Euplotes vannus

This study investigated the cytotoxicity of gemcitabine using the marine ciliate Euplotes vannus as the test organism.The median lethal concentrations(LC_(50) values)were determined using acute toxicity tests within an exposure time of 30 min with 0,6,12,24,and 48 mg mL~(-1) gemcitabine.The median inhibition effect(IC_(50) value)on the growth of the ciliate cells was examined using chronic toxicity tests within 5 days(120 h)after exposure for 30 min with 0,0.7,3.5,7,and 14 mg mL~(-1) gemcitabine.The 30-min LC_(50)value was 10.66~-mg mL ~1.The LC_(50) values decreased with increasing exposure times and well fitted to the toxicity curve equation LC_(50)=10.93+28.4e~(-0.19t)(R~2=0.93;P0.05,t=exposure time).The IC_(50) value for growth rates was 7.05 mg mL~(-1),and the inhibition effect on growth rates well fitted to the model equation r_%=0.8681e~(-0.0782Cgem)(r_%means growth rate with inhibition by gemcitabine,C_(gem) means concentrations of gemcitabine,R~2=0.99 and P0.05).The LC_(50) values of a wide range of gemcitabine concentrations could therefore be predicted for any given exposure time.These results suggest that the clinical dose of gemcitabine(20 mg mL~(-1))was higher than the 30-min LC_(50) value,which was almost the same as the 6-min LC_(50) value(19.88 mg mL~(-1))for E.vannus cells.The results also demonstrate that E.vannus can be used as a robust test organism for bioassays of chemotherapeutic drugs during short exposure periods.     

甲状腺素对斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼生长发育的影响

用4种不同浓度的甲状腺素(T4)分别浸泡斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼,研究T4对仔鱼发育、生长和存活的影响。结果表明,在孵化后24 h内,T4对仔鱼发育的促进作用不明显;在孵化24 h后,T4对仔鱼消化道的发育有促进作用。在孵化后72 h,0.01 mg·L-1 T4处理组仔鱼小肠管径、直肠管径、全长与对照组相比差异均不明显;0.10 mg·L-1和1.00 mg·L-1 T4处理组仔鱼小肠和直肠管径显著比对照组大(P<0.01),1.00 mg·L-1 T4处理组仔鱼全长显著比对照组短(P<0.01),而0.10 mg·L-1处理组仔鱼全长与对照组相比无明显差异(P>0.05)。在孵化后第8天,0.10 mg·L-1 T4处理组仔鱼存活率明显比对照组高(P<0.01),而0.01 mg·L-1 T4组和1.00 mg·L-1 T4组与对照组之间存活率差异不明显(P>0.05)。结果提示0.10 mg·L-1 T4处理能促进斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼的消化道发育并提高其存活率。     

Preliminary study on chromosomes of induced triploid in the red sea bream,Pagrosomus major

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｂｅｖｅｒｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｆｏｒｐｒａｃｔｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｆｉｓｈｂｒｅｅｄｉｎｇ.Ｔｒｉｐｌｏｉｄｙｈａｓｂｅｅｎｏｆｉｎｔｅｒｅｓｔｂｅｃａｕｓｅｔｒｉｐｌｏｉｄｆｉｓｈａｒｅｓｕｐｐｏｓｅｄｔｏｂｅｓｔｅｒｉｌｅｄｕｅｔｏｔｈｅｆａｉｌｕｒｅｏｆｔｈｅｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｙｎａｐｓｉｓｄｕｒｉｎｇｅａｒｌｙｇａｍｅｔｏｇｅｎｅｓｉｓ(ＳｕｇａｍａａｎｄＴ…