| 环介导恒温扩增技术快速检测米氏凯伦藻方法的建立环介导恒温扩增技术快速检测米氏凯伦藻方法的建立 |
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| 引用本文： | 张凤英,徐兆礼,马凌波,﹡,郑俊斌,缪宇平,陆亚男.环介导恒温扩增技术快速检测米氏凯伦藻方法的建立环介导恒温扩增技术快速检测米氏凯伦藻方法的建立[J].海洋学报,2009,31(6):169-174. |
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| 作者姓名： | 张凤英 徐兆礼 马凌波 ﹡ 郑俊斌 缪宇平 陆亚男 |
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| 作者单位： | 1.中国水产科学研究院 东海水产研究所，上海 200090；2.农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室，上海 200090 |
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| 基金项目： | 上海市科学技术委员会科研计划项目（062358101）;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金（中国水产科学研究院东海水产研究所）资助项目(2007M22) |
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| 摘 要： | 利用环介导恒温扩增（LAMP）技术成功检测了米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)基因，并对其反应程序和反应体系进行了优化，建立起一种简单快速的微藻检测技术。利用本实验优化体系对米氏凯伦藻进行了LAMP扩增，得到了理想的扩增产物，同时以其他8种藻类为阴性对照实验，只有米氏凯伦藻为特异性扩增，其他藻类均呈现阴性反应。另外，对扩增终产物进一步进行酶切分析，并与以F3和B3为引物PCR扩增的片段相比较，均与预期结果相吻合。采用2种方法进行阳性反应检测，一是阳性反应管内可见白色焦磷酸镁沉淀，二是LAMP产物与SYBR Green I反应呈现绿色。这种技术简单快速，有望应用到赤潮藻类的现场检测，在赤潮的预测预报中发挥强大作用。
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| 关 键 词： | 环介导恒温扩增反应 米氏凯伦藻 核糖体DNA 分子鉴定 |
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